縊蟶三倍體育種及相關(guān)生物學(xué)研究.pdf

1、縊蟶肉味鮮美，營養(yǎng)價值高，還是我國傳統(tǒng)應(yīng)用的海洋藥物，100多年來，縊蟶一直是浙江貝類養(yǎng)殖的重要種類之一。但是隨著育苗技術(shù)的發(fā)展和成熟，養(yǎng)殖容量在不斷擴(kuò)大，縊蟶種質(zhì)資源受到嚴(yán)重的破壞。三倍體貝類具有肉質(zhì)好、生長快、個體大、產(chǎn)量高等特點。為了使縊蟶養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展，有必要通過生物技術(shù)手段對其種質(zhì)進(jìn)行改良。 本文用6-DMAP抑制縊蟶受精卵第二極體的化學(xué)方法誘導(dǎo)三倍體，研究了縊蟶三倍體的誘導(dǎo)條件，技術(shù)工藝以及其幼蟲的培育方法。同時對縊

2、蟶在個體能量收支、染色體核型排列、親蟶生殖腺結(jié)構(gòu)等進(jìn)行了分析討論。 在三倍體誘導(dǎo)試驗中，親蟶洗凈暫養(yǎng)后用溫差法對親蟶催產(chǎn)，收集精卵受精后用不同藥物處理濃度和持續(xù)時間誘導(dǎo)三倍體，試驗結(jié)果表明：在100μmol/L－500μmol/L的濃度范圍內(nèi)均可誘導(dǎo)出三倍體，隨著藥物處理濃度和處理時間的提高，三倍體倍化率和D形幼蟲畸形率有不同程度的提高， D形幼蟲孵化率會隨之下降。濃度為500μmol/L、處理時間30min的處理組中，三倍體倍

3、化率最高。綜合考慮筆者認(rèn)為在濃度為300μmol/L，處理時間為20min時，三倍體誘導(dǎo)效果最佳。 在擔(dān)輪幼蟲期時取上浮幼蟲為材料，制染色體片染色觀察，選取較好的分裂相顯微攝影后放大、記數(shù)、統(tǒng)計。試驗統(tǒng)計結(jié)果表明：縊蟶二倍體的核型為2N=4t+2st+6sm+26m，染色體臂數(shù)NF＝72，未發(fā)現(xiàn)性染色體和隨體。二、三倍體的染色體類型基本一致，三倍體只是在染色體數(shù)目上比二倍體增加了一套。 縊蟶個體能量收支試驗中，選擇個體大小基本

4、一致的縊蟶在與實驗時相同的水環(huán)境下馴化7天。測量實驗縊蟶攝食前后餌料濃度、糞便的TPM、POM值、海水中的氨氮含量、溶氧等試驗指標(biāo)。將各指標(biāo)值轉(zhuǎn)換為能量值。實驗結(jié)果表明：縊蟶攝食的能量中排糞能占的比例最大為41.1﹪，其次是生長能為30.2﹪，第三為呼吸能占23.75﹪，排泄能所占比例最小為5.64﹪?？O蟶的攝食有較明顯的晝夜變化，在晚上22點到凌晨4點的時間段中攝食行為最活躍，以后再逐漸降低，在10點到16點的時間段里降到最低值。

5、 應(yīng)用透射電子顯微和組織切片技術(shù)，觀察了繁殖期間縊蟶兩性生殖系統(tǒng)。結(jié)果表明: 縊蟶雄性生殖系統(tǒng)中存在著不同發(fā)育時期的生殖細(xì)胞,成熟精子是鞭毛型精子，由頭部、中段和尾部構(gòu)成。頭部由錐形頂體與細(xì)胞核相連而成。6個大小不一的線粒體球圍饒在中心粒周圍構(gòu)成精子的中段。中心粒與軸絲相連貫穿鞭毛構(gòu)成精子的尾部。雌性生殖系統(tǒng)中卵子形狀不規(guī)則或呈梨形。在灘涂縊蟶的卵質(zhì)中存在大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、脂滴等細(xì)胞器和顆粒。而在蓄水塘縊蟶卵質(zhì)中觀察到數(shù)目眾