山東三個(gè)地方雞種早期肌纖維生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律及相關(guān)基因表達(dá)比較分析.pdf

1、隨著生活水平的提高，消費(fèi)者對(duì)雞肉的品質(zhì)要求也逐漸提高。肌肉的基本單位是肌纖維，雞的肌纖維生長(zhǎng)發(fā)育及特性與雞肉品質(zhì)性狀密切相關(guān)。遺傳是影響肌纖維發(fā)育的主要因素之一。山東省擁有豐富的地方雞品種資源，是我們進(jìn)行優(yōu)質(zhì)雞育種的良好素材，對(duì)不同雞品種肌纖維特性及調(diào)控機(jī)制的研究，可為我們深入探討山東省地方雞種肉品質(zhì)特性，進(jìn)行雞肉品質(zhì)改良奠定基礎(chǔ)。
　　本研究選用1日齡體重相近的濟(jì)寧百日雞、汶上蘆花雞和魯西斗雞3個(gè)地方雞種作為試驗(yàn)材料，每個(gè)品種3

2、6只，共108只。分別在1日齡、1周齡、2周齡、3周齡、4周齡、5周齡采集相同部位的胸肌和腿肌樣品，采用石蠟切片對(duì)各時(shí)間點(diǎn)肌纖維形態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行觀察，測(cè)定各品種胸腿肌的肌纖維直徑、肌纖維密度、肌節(jié)長(zhǎng)度、肌內(nèi)膜厚度，肌束膜厚度等指標(biāo)；分別提取不同時(shí)間點(diǎn)胸肌和腿肌總RNA，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR測(cè)定Myf6、MyoD1、Myf5和MSTN等基因在胸肌和腿肌中的表達(dá)量，分析同一時(shí)間不同品種間和同一品種內(nèi)不同發(fā)育階段各基因的表達(dá)量變化，探討肌纖維早

3、期發(fā)育的基因表達(dá)調(diào)控規(guī)律，為今后肉品質(zhì)性狀分子標(biāo)記輔助選擇提供科學(xué)依據(jù)。
　　研究結(jié)果如下：
　　1.肌纖維直徑和肌纖維密度4周齡時(shí)，百日雞和斗雞胸肌肌纖維直徑顯著長(zhǎng)于蘆花雞（P<0.05），5周齡時(shí)，斗雞顯著長(zhǎng)于百日雞和蘆花雞（P<0.05），從出殼到4周齡時(shí)，3個(gè)雞品種差異不顯著；1日齡，百日雞腿肌肌纖維直徑顯著長(zhǎng)于斗雞，1周齡，百日雞和蘆花雞腿肌肌纖維直徑顯著長(zhǎng)于斗雞（P<0.05），4周齡斗雞腿肌肌纖維直徑顯著長(zhǎng)于蘆

4、花雞（P<0.05），5周齡斗雞顯著長(zhǎng)于百日雞和蘆花雞（P<0.05）.1日齡，百日雞和蘆花雞胸肌肌纖維直徑密度顯著高于斗雞（P<0.05），1周齡，蘆花雞和斗雞顯著高于百日雞（P<0.05），3周齡和5周齡，百日雞和蘆花雞顯著高于斗雞（P<0.05）；1日齡，斗雞腿肌肌纖維密度顯著高于百日雞和蘆花雞（P<0.05），1周齡和3周齡百日雞顯著高于斗雞和蘆花雞（P<0.05），2周齡和5周齡百日雞和蘆花雞顯著高于斗雞（P<0.05）。從出

5、殼到5周齡斗雞、百日雞和蘆花雞胸肌肌纖維直徑分別增加17.8μm、16.01μm、16.79μm；肌纖維密度分別降低8671根/mm2、7920.18根/mm2、7710.82根/mm2；腿肌肌纖維直徑分別增加19.1μm、14.3μm、15.85μm，肌纖維密度分別降低8287.43根/mm2、8609.18根/mm2、8618.77根/mm2。
　　2.肌內(nèi)膜、肌束膜、肌節(jié)長(zhǎng)度2周齡，百日雞和蘆花雞胸肌肌內(nèi)膜厚度顯著高于斗雞（

6、P<0.05），3周齡蘆花雞顯著高于百日雞（P<0.05），4周齡和5周齡，蘆花雞和斗雞顯著高于百日雞；3周齡和5周齡，蘆花雞和斗雞腿肌肌內(nèi)膜厚度顯著高于百日雞（P<0.05），4周齡斗雞>蘆花雞>百日雞（P<0.05）；3周齡胸肌肌束膜厚度百日雞顯著高于斗雞（P<0.05），4周齡和5周齡百日雞和蘆花雞顯著高于斗雞（P<0.05）；4周齡腿肌肌束膜厚度蘆花雞>斗雞>百日雞（P<0.05），5周齡蘆花雞和斗雞顯著高于百日雞（P<0.05

7、）；1周齡斗雞胸肌肌節(jié)長(zhǎng)度顯著高于百日雞和蘆花雞，2周齡和3周齡腿肌肌節(jié)斗雞>蘆花雞>百日雞（P<0.05）；1周齡斗雞腿肌肌節(jié)長(zhǎng)度低于百日雞蘆花雞，1周齡、2周齡和3周齡，斗雞的高于蘆花雞和百日雞（P<0.05）。
　　3.基因相對(duì)表達(dá)量：MSTN基因在蘆花雞胸肌中表達(dá)量2周齡高于其它周齡，差異極顯著（P<0.01），腿肌中的表達(dá)量無(wú)顯著差異；MSTN基因在斗雞胸腿肌中的表達(dá)量4周齡時(shí)顯著高于其他周齡；MSTN基因在百日雞胸肌中

8、表達(dá)量在4周齡和5周齡顯著高于其它周齡，腿肌4周齡顯著高于其它周齡（P<0.05）。Myf6基因在4周齡蘆花雞胸肌中表達(dá)量顯著高于其它周齡（P<0.05）；腿肌Myf6是在2周齡的表達(dá)量顯著高于其他周齡（P<0.05），Myf6在斗雞胸肌中5周齡時(shí)表達(dá)量最高，Myf6基因在3周齡百日雞胸肌中表達(dá)量顯著高于其它周齡（P<0.05），腿肌Myf6是在5周齡的表達(dá)量顯著高于其他周齡（P<0.05）。蘆花雞胸肌中MyoD1的表達(dá)量在3周齡時(shí)表達(dá)

9、量最高，腿肌中是在4周齡時(shí)；MyoD1在百日雞胸肌1日齡時(shí)表達(dá)量較高，腿肌中是在2周齡時(shí)；在斗雞胸腿肌中4、5周齡時(shí)表達(dá)量高于其他周齡。在0~4周齡時(shí)，Myf5基因在斗雞中胸腿肌表達(dá)量均高于在蘆花雞和百日雞，該基因在三個(gè)雞種胸腿肌中的表達(dá)模式不同。
　　綜上所述，不同品種肌纖維發(fā)育規(guī)律存在差異，4周齡和5周齡魯西斗雞胸肌和腿肌肌纖維發(fā)育顯著快于百日雞和蘆花雞；MSTN、Myf6、MyoD1、Myf5在3個(gè)雞種胸肌和腿肌發(fā)育中發(fā)揮不