鐵皮石斛組培苗培養(yǎng)及叢生芽增殖體系的建立.pdf

1、本文針對鐵皮石斛組織培養(yǎng)過程中存在的，培育周期長、轉(zhuǎn)瓶次數(shù)多、操作繁瑣等問題，展開了以鐵皮石斛種子為外植體的組培苗培養(yǎng)以及莖段和組培苗為材料的叢生芽增殖的研究。通過單因素和正交實驗，篩選出最佳培養(yǎng)基，研究基礎培養(yǎng)基、植物生長調(diào)節(jié)劑、天然附加物、時間等多種因素對組培苗的培養(yǎng)、腋芽誘導以及叢生芽增殖的影響，以達到減少組培苗和叢生芽的培養(yǎng)步驟、縮短生長時間和簡化實驗操作的目的。實驗結(jié)果表明:
　　以鐵皮石斛種子為外植體培養(yǎng)組培苗的研究發(fā)

2、現(xiàn):一步成苗法中鐵皮石斛種子萌發(fā)為幼苗的最佳成苗培養(yǎng)基為N6+6-BA0.1mg/L+NAA0.5mg/L+馬鈴薯100g/L+活性炭2g/L;最佳壯苗培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L+香蕉汁100g/L+活性炭3g/L。而兩步成苗法的實驗中1/2MS比MS更適合將鐵皮石斛種子培養(yǎng)為組培苗，其中原球莖的最佳萌發(fā)培養(yǎng)基為1/2MS+芋頭100g/L;最佳原球莖增殖分化培養(yǎng)基為1/2MS+馬鈴薯100g/L+香蕉1

3、00g/L+6-BA0.2mg/L;最佳壯苗生根培養(yǎng)基為1/2MS+馬鈴薯100g/L+香蕉100g/L+NAA0.5mg/L。這兩種方法育苗的步驟都比較簡便、培養(yǎng)組培苗比較方便，且都具有可行性，生長的組培苗都顏色翠綠、生長健壯。
　　鐵皮石斛莖段為外植體的叢生芽增殖的實驗分為兩個步驟，即腋芽誘導和叢生芽增殖。結(jié)果表明，馬鈴薯對鐵皮石斛莖段腋芽誘導的效果最佳，腋芽誘導最佳的培養(yǎng)基為:N6+6-BA1.0mg/L+NAA0.2mg/

4、L+馬鈴薯100g/L;香蕉對叢生芽增殖的影響效果最佳，最佳的叢生芽增殖培養(yǎng)基為:N6+TDZ0.05mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA1.0mg/L+香蕉100g/L，且最佳增殖時間為60天。60天時的叢生芽生長狀況最好，能夠進行壯苗和生根生長。
　　以鐵皮石斛組培苗為材料增殖叢生芽的研究發(fā)現(xiàn):香蕉對叢生芽增殖的影響效果最佳，最佳增殖培養(yǎng)基分別為:N6+TDZ0.05mg/L+6-BA1.0mg/L+NAA0.6mg/L+

5、香蕉100g/L，且最佳增殖時間與莖段增殖叢生芽的最佳增殖時間一致，都為60天。在相同實驗條件下，莖段比組培苗增殖叢生芽的增殖系數(shù)大，叢生芽也生長的更壯;但組培苗比莖段增殖叢生芽少了誘導腋芽的步驟，減少了實驗操作和叢生芽生長的時間;叢生芽生根培養(yǎng)的實驗中莖段和組培苗增殖的叢生芽均能進行正常的壯苗生根培養(yǎng)。本文對鐵皮石斛莖段和組培苗增殖叢生芽的生長條件和過程進一步優(yōu)化，達到了提高叢生芽增殖系數(shù)、縮短叢生芽生長時間的實驗目的，且文中的叢生芽