鐵皮石斛離體培養(yǎng)誘導(dǎo)開花的研究.pdf

1、鐵皮石斛因具有很好的藥用價(jià)值且難于自然繁殖，隨著大量的采掘己使得野生鐵皮石斛資源瀕臨滅絕。應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，對(duì)鐵皮石斛離體培養(yǎng)進(jìn)行種質(zhì)保存和快速繁殖具有非常重要的意義。特別是通過離體培養(yǎng)研究有關(guān)開花機(jī)理，具有著重要的現(xiàn)實(shí)意義和應(yīng)用價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，通過各種激素及其配比組合處理廣西鐵皮石斛無根試管苗，誘導(dǎo)其生根和開花，研究影響鐵皮石斛試管開花的調(diào)控因子。本論文探討了MS、Miller、White三種不同基本培養(yǎng)基和三種

2、不同添加物對(duì)石斛繼代增殖的影響，激素IBA、NAA、ABT及其組合對(duì)鐵皮石斛生根誘導(dǎo)的影響，以及6-BA、NAA、KT、PP333、TDZ等激素和預(yù)處理?xiàng)l件對(duì)石斛組培苗花芽分化和花朵開放率的影響。本實(shí)驗(yàn)還采用了石蠟切片的方法，在細(xì)胞水平上對(duì)鐵皮石斛花芽分化的過程進(jìn)行了形態(tài)學(xué)觀察，研究鐵皮石斛試管苗花芽發(fā)生、發(fā)育的進(jìn)程。研究結(jié)果表明：
　　 1．在三種基本培養(yǎng)基對(duì)鐵皮石斛試管苗芽增殖影響的比較試驗(yàn)中，以MS基本培養(yǎng)基對(duì)鐵皮石斛芽的

3、增殖效果最好，芽增殖倍數(shù)為3.5倍，且增殖芽的素質(zhì)最好，芽粗壯、葉色濃綠。
　　 2．在不同添加物對(duì)鐵皮石斛芽增殖影響的比較試驗(yàn)中，以添加CPPU0.5mg/L的處理增殖效果最佳，芽增殖的倍數(shù)達(dá)到5.79倍，但是芽的素質(zhì)一般。添加KT0.5mg/L的處理芽增殖的倍數(shù)達(dá)到4.58倍，芽的素質(zhì)一般。添加有椰汁的處理增殖芽的素質(zhì)較佳，表現(xiàn)為芽粗、健壯、葉色濃綠，其芽增殖的倍數(shù)達(dá)到4.17倍。
　　 3．在不同激素對(duì)鐵皮石斛生根

4、誘導(dǎo)效果的影響的比較試驗(yàn)中，以培養(yǎng)基1/2MS+IBA4.0mg/L+PP3330.5mg/L對(duì)鐵皮石斛芽生根誘導(dǎo)的效果最好，生根率可達(dá)到100％，平均生根數(shù)為7.44條，平均根長(zhǎng)為1.73cm。
　　 4．在單因子激素對(duì)鐵皮石斛組培苗花芽誘導(dǎo)的效果的比較試驗(yàn)中，以培養(yǎng)基MS+TDZ0.06mg/L對(duì)鐵皮石斛組培苗花芽誘導(dǎo)的效果最好，其花芽形成率可達(dá)到15.5％，而花開放率可達(dá)到90.2％，平均每個(gè)具花株的花苞數(shù)為2.1朵。

5、r>　　 5．在雙因子激素對(duì)鐵皮石斛組培苗花芽誘導(dǎo)的效果的比較試驗(yàn)中，以培養(yǎng)基MS+PP3330.3mg/L+TDZ0.06mg/L對(duì)鐵皮石斛芽開花誘導(dǎo)的效果最好，其花芽形成率可達(dá)到25.2％，而花開放率可達(dá)到70.2％，平均每個(gè)具花株的花苞數(shù)為3.7朵。
　　 6．在多因子激素對(duì)鐵皮石斛組培苗花芽誘導(dǎo)的效果的比較試驗(yàn)中，以培養(yǎng)基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L+PP3330.3mg/L+TDZ0.06mg/

6、L對(duì)鐵皮石斛芽開花誘導(dǎo)的效果最好，其花芽形成率可達(dá)到80.4％，而花開放率可達(dá)到93.3％，平均每個(gè)具花株的花苞數(shù)為12.3朵。
　　 7．在激素預(yù)培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，以由培養(yǎng)基MS+TDZ0.06mg/L+PP3330.5mg/L預(yù)培養(yǎng)40天再轉(zhuǎn)入誘導(dǎo)開花培養(yǎng)基MS+KT1.0mg/L+ NAA0.5mg/L+PP3330.5mg/L的處理對(duì)石斛試管花控效果最好，其花芽形成率可達(dá)到78.0％，而花開放率可達(dá)到97.8％，平均每個(gè)具花株

7、的花苞數(shù)為7.89朵。
　　 8．在培養(yǎng)基中不同含糖量對(duì)鐵皮石斛組培苗花芽誘導(dǎo)的效果的比較試驗(yàn)中，以培養(yǎng)基含糖量為50g/L時(shí)對(duì)鐵皮石斛芽開花誘導(dǎo)的效果最好，其花芽形成率可達(dá)到87.8％，而花開放率可達(dá)到96.8％，平均每個(gè)具花株的花苞數(shù)為13.7朵。
　　 9．在鐵皮石斛組培苗是否有根對(duì)鐵皮石斛試管開花影響的比較試驗(yàn)中，無根的組培苗花芽誘導(dǎo)的效果要明顯好于有根的組培苗。
　　 10.在利用石蠟切片對(duì)鐵皮石斛花芽