高產(chǎn)γ-氨基丁酸乳酸菌選育及其在蛋雞日糧中的應(yīng)用.pdf

1、本試驗(yàn)采用微生物厭氧培養(yǎng)、GABA(γ-氨基丁酸)定性與定量檢測方法,分離、篩選得到一株高產(chǎn)GABA(γ-氨基丁酸)的乳酸菌,并對該菌株進(jìn)行形態(tài)特征、生理生化特性、16SrRNA序列分析鑒定,以及進(jìn)行GABA產(chǎn)量測定,然后對其進(jìn)行厭氧發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng)。以海蘭褐蛋雞為試驗(yàn)對象,研究添加高產(chǎn)GABA的該株乳酸菌對夏季蛋雞產(chǎn)蛋性能和抗熱應(yīng)激的影響,并從蛋品質(zhì)、血清免疫、生化、抗氧化等指標(biāo)對高產(chǎn)GABA乳酸菌的作用及機(jī)理進(jìn)行研究。
　　高產(chǎn)G

2、ABA乳酸菌的篩選、鑒定:通過初篩、復(fù)篩,從泡菜中得到一株高產(chǎn)GABA的乳酸菌,對菌株的形態(tài)特征、生理生化特性、16SrRNA基因序列分析鑒定,確定該菌株為糞腸球菌,并命名為:E.faecalis F6。在含有35 g/L的谷氨酸鈉(monosodium)的發(fā)酵培養(yǎng)基中,34℃靜置培養(yǎng)65 h,該菌株GABA的產(chǎn)量達(dá)到7.1 g/L。
　　高產(chǎn)GABA乳酸菌發(fā)酵條件優(yōu)化:將分離得到的E.faecalis F6在不同培養(yǎng)基上進(jìn)行發(fā)酵

3、培養(yǎng),采用改良紙層析法定性比較發(fā)酵液中GABA的產(chǎn)量,然后使用高效液相色譜法精確定量比較發(fā)酵液中GABA的產(chǎn)量。通過對發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化,最終確定E.faecalis F6最佳的發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度36℃,pH值為6.4,接種量4.5％,發(fā)酵時間60 h,同時確定了E.faecalis F6和GABA生長類型為生長相關(guān)型。在最佳培養(yǎng)、發(fā)酵條件下,E.faecalis F6的GABA的產(chǎn)量提高了50.0%,達(dá)到9.5g/L。
　　高產(chǎn)

4、GABA乳酸菌在蛋雞日糧中的應(yīng)用:選用280日齡健康海蘭褐殼蛋雞共1620只,采用單因子完全隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì),分為6個處理組,每組3個重復(fù),每重復(fù)90只雞。其中,A為普通對照組,飼喂基礎(chǔ)日糧;B為陽性對照組,在基礎(chǔ)日糧中添加50mg/kg的GABA;試驗(yàn)組C、D、E分別添加高產(chǎn)GABA的乳酸菌,相當(dāng)于GABA添加量分別為25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg,F為添加普通乳酸菌組,在基礎(chǔ)日糧中添加300mg/kg植物乳桿菌。預(yù)飼1

5、周,開展41-48周齡蛋雞飼養(yǎng)試驗(yàn)。測定血清生化指標(biāo)、抗氧化指標(biāo)、免疫指標(biāo)。結(jié)果表明:
　　產(chǎn)蛋性能:與對照組A相比,試驗(yàn)全期,GABA添加量為50mg/kg D組產(chǎn)蛋率提高1.45%(P<0.05),料蛋比降低2.15%(P>0.05);采食量、平均蛋重均有一定提高,但未見顯著差異(P>0.05)。
　　血清生化指標(biāo):與對照組A相比,試驗(yàn)全期,B、D、E組白蛋白(ALB)分別提高10.13%(P<0.01)、6.86%(P

6、<0.05)、9.60%(P<0.01);谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)分別降低11.54%(P<0.05)、14.08%(P<0.01)、12.31%(P<0.05);堿性磷酸酶(AKP)分別降低8.11%(P>0.05)、22.50%(P<0.01)、8.54%(P>0.05);血鈣、血磷、血糖有不同程度提高,膽固醇、血清尿素氮、乳酸脫氫酶呈降低趨勢,但均無顯著差異。
　　抗氧化性能:與對照組A相比,試驗(yàn)全期,B、D、E組GSH-PX分

7、別提高12.26%(P>0.05)、24.85%(P<0.01)、14.90%(P>0.05);SOD分別提高8.90%(P<0.05)、9.17%(P<0.05)、8.87%(P<0.05);MDA分別降低11.86%(P>0.05)、17.00%(P<0.05)、10.85%(P>0.05)。
　　免疫性能:與對照組A相比,試驗(yàn)全期,B、D、E組免疫球蛋白A(IgA)分別提高22.00%(P>0.05)、39.42%(P<0.

8、05)、15.33%(P>0.05);免疫球蛋白M、免疫球蛋白G均有提高趨勢,但差異不顯著。
　　綜上,本試驗(yàn)從酸奶中篩選出產(chǎn)GABA(γ-氨基丁酸)乳酸菌,經(jīng)鑒定該菌為糞腸球菌,并將其命名為E.faecalis F6;優(yōu)化后的發(fā)酵條件為:發(fā)酵溫度36℃,pH值為6.4,接種量4.5%,發(fā)酵時間60h;其產(chǎn)GABA的能力達(dá)到9.5 g/L。在蛋雞日糧中添加產(chǎn)GABA的該乳酸菌,能顯著提高夏季高溫期蛋雞的產(chǎn)蛋率、蛋殼硬度和厚度,同時