基于形態(tài)學(xué)和微衛(wèi)星標(biāo)記的魴屬魚(yú)類(lèi)種間及子代的鑒定.pdf

1、魴屬(Megalobrama)魚(yú)類(lèi)是我國(guó)重要的淡水養(yǎng)殖種類(lèi)，魴屬中共包括團(tuán)頭魴(M.amblycephala)、廣東魴(M.terminalis)、三角魴(M.skolkovii.)和厚頜魴(M.pellegrini)四種魚(yú)類(lèi)。其肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美，廣受消費(fèi)者喜愛(ài)，因此具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，其中相關(guān)育種工作在我國(guó)陸續(xù)展開(kāi)。本研究以魴屬四種魚(yú)為研究材料，采用單因素方差分析及主成分分析對(duì)其形態(tài)學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行了比較分析，并通過(guò)跨種擴(kuò)增開(kāi)發(fā)魴屬魚(yú)類(lèi)的

2、微衛(wèi)星標(biāo)記，同時(shí)希望通過(guò)微衛(wèi)星位點(diǎn)在自交及雜交子代中的應(yīng)用找到對(duì)于不同育種組合的鑒定方法。這些理論基礎(chǔ)的研究工作都將為魴屬在今后的育種生產(chǎn)實(shí)踐中提供重要的理論參考依據(jù)。
　　1.魴屬魚(yú)類(lèi)形態(tài)學(xué)差異
　　采用單因素方差分析及主成分分析對(duì)團(tuán)頭魴、廣東魴、三角魴和厚頜魴共340尾樣本的23個(gè)可數(shù)性狀，24個(gè)可量性狀進(jìn)行分析和比較。結(jié)果表明，4種魴的可數(shù)性狀（側(cè)線下鱗、尾脊椎數(shù)、總脊椎數(shù)）有顯著差異(P＜0.05），可量比例性狀（口

3、寬/頭長(zhǎng)、腹鰭棘長(zhǎng)/頭長(zhǎng)、4-7/體長(zhǎng)、6-8/體長(zhǎng)、7-8/體長(zhǎng)、第二鰾室長(zhǎng)/第一鰾室長(zhǎng)）存在顯著性差異(P＜0.05），可作為4種魴的判別性狀。通過(guò)主成分分析法對(duì)可數(shù)性狀（可量比例性狀）構(gòu)建了3個(gè)主成分，其貢獻(xiàn)率分別為:32.43％(24.43％)、14.70％(11.34％)和10.06％(9.57％)，累計(jì)貢獻(xiàn)率57.19％(45.34％)。主成分散點(diǎn)圖顯示，4種魴聚為4簇，廣東魴、團(tuán)頭魴區(qū)分明顯。本文與以往研究結(jié)果綜合顯示，4

4、種魴可數(shù)性狀較可量比例性狀的種內(nèi)變異小，因此可數(shù)性狀可作為種類(lèi)鑒別的依據(jù)。
　　2.團(tuán)頭魴微衛(wèi)星標(biāo)記在魴屬中的跨種擴(kuò)增
　　本研究通過(guò)跨種擴(kuò)增的方法開(kāi)發(fā)魴屬的微衛(wèi)星標(biāo)記，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)團(tuán)頭魴微衛(wèi)星標(biāo)記的在厚頜魴(90.93％)、廣東魴(93.75％)、三角魴(96.88％)中的跨種擴(kuò)增成功率都普遍較高，并成功開(kāi)發(fā)了在四種魴中都具有高多態(tài)性的13對(duì)通用微衛(wèi)星引物。而分析發(fā)現(xiàn)，13對(duì)高多態(tài)性微衛(wèi)星的在四種魴的平均等位基因數(shù)在1～1

5、2個(gè)，平均等位基因數(shù)為4.2個(gè)，平均PIC為0.60，其中團(tuán)頭魴、廣東魴、三角魴的多態(tài)性較高（平均PIC＞0.5)。觀測(cè)雜合度(Ho）在0.067～1.000之間;期望雜合度在(He)0.278～0.843之間;多態(tài)信息含量（PIC)在0.4407～0.6377之間。
　　3.微衛(wèi)星標(biāo)記在魴屬雜交子代中的應(yīng)用
　　通過(guò)已發(fā)表的團(tuán)頭魴及厚頜魴的微衛(wèi)星標(biāo)記，根據(jù)串聯(lián)序列的重復(fù)單元及在不同魴中的擴(kuò)增存在明顯差異，選擇12對(duì)微衛(wèi)星標(biāo)

6、記在魴屬自交及雜交子代（自交群體:團(tuán)頭魴♀×團(tuán)頭魴♂、廣東魴♀×廣東魴♂、厚頜魴♀×厚頜魴♂、三角魴♀×三角魴♂;雜交群體:團(tuán)頭魴♀×厚頜魴♂、厚頜魴♀×團(tuán)頭魴♂;團(tuán)頭魴♀×廣東魴♂、廣東魴♀×團(tuán)頭魴♂;團(tuán)頭魴♀×三角魴♂、三角魴♀×團(tuán)頭魴♂）中進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有4對(duì)引物MamEST46、TTF01、MP01、MP26在不同子代中表現(xiàn)出較大的差異性，能對(duì)魴屬自交及雜交的子一代進(jìn)行初步的鑒定，除了厚頜魴自交及團(tuán)頭魴♀×廣東魴♂暫時(shí)