長江江豚的微衛(wèi)星標(biāo)記篩選與親子鑒定研究.pdf

1、長江江豚(Neophocaena phocaenoides asiaeorientalis)是目前唯一已知的江豚淡水種群，僅分布于我國長江中下游干流及洞庭湖和鄱陽湖。近年來，由于長江流域諸多人類活動的影響導(dǎo)致其棲息地環(huán)境的惡化，長江江豚的種群數(shù)量迅速下降，最新的調(diào)查結(jié)果表明其種群數(shù)量只有1800頭左右。該種群已被IUCN紅色名錄列為瀕危等級，在我國則為國家二級重點保護(hù)動物?；谠摲N群所面臨的嚴(yán)峻現(xiàn)狀，其保護(hù)和研究工作亟待加強。

2、長江江豚的遷地保護(hù)及人工飼養(yǎng)和繁殖已經(jīng)基本成功，但是遷地保護(hù)群體需要加強遺傳管理才能保證遷地保護(hù)措施最終取得成功，而親子鑒定技術(shù)則是種群遺傳管理的基礎(chǔ)和前提。微衛(wèi)星親子鑒定技術(shù)已經(jīng)在眾多瀕危、珍稀物種的保護(hù)和管理中得到了成功應(yīng)用，而本論文的主要目的在于建立長江江豚的親子鑒定技術(shù)。為了達(dá)到這個目的，本研究首先采用非變性PAGE電泳方法對一組新設(shè)計的長江江豚特異性微衛(wèi)星引物進(jìn)行了多態(tài)性篩選；隨后采用了熒光標(biāo)記引物擴(kuò)增和基因分型方法對8個特異

3、性微衛(wèi)星座位進(jìn)行了多態(tài)性分析；此外，本研究還通過這8個微衛(wèi)星座位成功地對武漢白鱀豚館和銅陵保護(hù)區(qū)的兩個長江江豚繁殖群體進(jìn)行了親子鑒定。 本研究的主要結(jié)果如下： (1)采用非變性PAGE電泳方法從14對新設(shè)計的長江江豚微衛(wèi)星引物中篩選到11個多態(tài)性微衛(wèi)星座位； (2)采用熒光標(biāo)記引物擴(kuò)增和等位基因分型方法對8個江豚特異性的微衛(wèi)星座位進(jìn)行了多態(tài)性分析。結(jié)果表明：這8個微衛(wèi)星座位在被測試的三個長江江豚種群中均存在2個至

4、2個以上的等位基因，并且其中6個座位的多態(tài)信息含量(PIC值)大于0.5，表現(xiàn)為高度多態(tài)座位。 (3)采用8個多態(tài)性微衛(wèi)星座位對武漢白鱀豚館和銅陵保護(hù)區(qū)兩個遷地保護(hù)長江江豚繁殖群體進(jìn)行了親子鑒定。在母本已知情況下，成功地鑒定出了這兩個群體所有出生幼豚的父本。 本研究為長江江豚的研究積累了更多有效的微衛(wèi)星遺傳標(biāo)記，這些遺傳標(biāo)記大多數(shù)能夠成功應(yīng)用于長江江豚繁殖群體的親子鑒定，從而為今后不同遷地保護(hù)繁殖群體的譜系構(gòu)建和遺傳管理