草魚主要寄生蟲動(dòng)態(tài)變化與水生態(tài)因子關(guān)系研究.pdf

1、草魚(Ctenopharyngodon idellus)是一種重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類,約占中國(guó)淡水魚養(yǎng)殖總量的20％,然而,草魚的病害較多,其中危害草魚的寄生蟲主要有:車輪蟲、指環(huán)蟲、斜管蟲、小瓜蟲、絳蟲等。本文對(duì)草魚集約化養(yǎng)殖的廣東省清遠(yuǎn)市清新縣地底下村養(yǎng)殖場(chǎng)、中山市廣成圍養(yǎng)殖場(chǎng)2個(gè)場(chǎng)及草魚散養(yǎng)的廣州市西朗養(yǎng)殖池塘及草魚寄生蟲病進(jìn)行了初步的調(diào)查,旨在摸清草魚寄生蟲種類和數(shù)量與池塘中水質(zhì)因子、自由生活的纖毛類原生動(dòng)物數(shù)量之間的關(guān)系。同時(shí)在調(diào)

2、查的過(guò)程中,對(duì)指環(huán)蟲在鰓片上的寄生特點(diǎn)及動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行了研究;在不同硬度堿度水質(zhì)中對(duì)多子小瓜蟲孢囊孵化及幼蟲活力的影響研究。在實(shí)驗(yàn)室條件下,感染草魚,進(jìn)行組織病理觀察;對(duì)在調(diào)查中收集到的一株多子小瓜蟲對(duì)熱應(yīng)激的分子機(jī)理進(jìn)行了初步研究。主要結(jié)果和結(jié)論如下:
　　1.調(diào)查發(fā)現(xiàn),草魚的寄生蟲與季節(jié)和溫度密切相關(guān),在溫度較高(15℃~32℃)的5~11月,草魚的寄生蟲主要為車輪蟲、指環(huán)蟲;在氣溫變化的交替時(shí)節(jié),車輪蟲更容易暴發(fā)。分析數(shù)據(jù)顯示

3、,集約化養(yǎng)殖草魚纖毛類寄生蟲平均感染率、豐盛度分別為71％和(5~10)‘;散養(yǎng)的平均感染率、豐盛度分別為20％和+(1~5)‘。集約化養(yǎng)殖草魚纖毛類寄生蟲感染率、豐盛度比散養(yǎng)化的高。對(duì)廣州西朗養(yǎng)殖草魚塘的調(diào)查發(fā)現(xiàn),散養(yǎng)的草魚鰓上指環(huán)蟲感染率高,都在0.93以上,在溫度較高的7、8月,鰓上指環(huán)蟲的豐盛度分別達(dá)到33.5和31.5。指環(huán)蟲種群方差和平均數(shù)之比DI,負(fù)二項(xiàng)參數(shù)K值,擴(kuò)散性指數(shù)I§大于1,表明指環(huán)蟲種群在宿主種群呈聚集分布,在

4、6~11月調(diào)查期間,發(fā)現(xiàn)草魚鰓上指環(huán)蟲右側(cè)第1對(duì)鰓片豐盛度小于左側(cè)的外,其余的都大于左側(cè)鰓片上的豐盛度。
　　2.調(diào)查采得一株在28~30℃水體中依然能感染草魚的多子小瓜蟲,對(duì)多子小瓜蟲的HSP70(熱激蛋白70)基因進(jìn)行了克隆以及在不同溫度下多子小瓜蟲不同階段的表達(dá)分析,發(fā)現(xiàn)其ORF為1995bp,編碼664aa。多子小瓜蟲HSP70(Im HSP70)的基因結(jié)構(gòu)分析發(fā)現(xiàn),Im HSP70的二級(jí)結(jié)構(gòu)主要為以α-螺旋和無(wú)規(guī)卷曲為主

5、,空間構(gòu)型包括 N端ATPase功能域和 C端多肽結(jié)合功能域。與其它物種 HSP70蛋白序列進(jìn)行同源性比較發(fā)現(xiàn),Im HSP70與螅狀獨(dú)縮蟲(Carchesium polypinum)HSP70的同源性最高為78.08％。系統(tǒng)發(fā)育分析顯示, Im HSP70與分類地位同為纖毛門的螅狀獨(dú)縮蟲、嗜熱四膜蟲(Tetrahymena thermophila)、變蘚棘毛蟲(Sterkiella histriomuscorum)的 HSP70聚在一

6、個(gè)分支。采用熒光定量 RT-PCR檢測(cè)了多子小瓜蟲在三種不同溫度中(20℃、25℃和30℃),Im HSP70基因在三個(gè)不同發(fā)育階段(幼蟲、滋養(yǎng)體和包囊)的表達(dá)量情況。結(jié)果顯示,幼蟲在3種溫度下表達(dá)量均最低;在20℃和25℃時(shí),滋養(yǎng)體中的表達(dá)量高于幼蟲和包囊;而在30℃時(shí),包囊中的表達(dá)量高于滋養(yǎng)體和幼蟲;幼蟲和包囊在30℃時(shí)的表達(dá)量均高于25℃。
　　3.在適溫20℃條件下,通過(guò)硬度、堿度對(duì)多子小瓜蟲孵化及活力的影響研究發(fā)現(xiàn),在水

7、體硬度和堿度都為0mmol/L時(shí),多子小瓜蟲包囊壁的厚度最大為70.5μm,當(dāng)硬度和堿度增大到4mmol/L時(shí),包囊壁厚度變薄為21.4μm。多子小瓜蟲孵化時(shí)間在硬度、堿度為0.5mmol/L和0.1mmol/L顯著的低于其他實(shí)驗(yàn)組;幼蟲保持活力時(shí)長(zhǎng),硬度、堿度分別為0mmol/L組顯著的低于其他組;其次是硬度、堿度分別為4mmol/L和0.1mmol/L組。
　　本論文結(jié)果表明,草魚寄生蟲的發(fā)生與生態(tài)因子中的水溫、堿度、硬度等有