噬菌弧菌H2的分離鑒定及其急性毒性研究.pdf

1、蛭弧菌類生物(Bdellovibrio-and-like organisms,BALOS)是一種專門以捕食細菌為生的寄生性細菌,在自然界中分布及其廣泛,能夠在較短的時間內(nèi)裂解弧菌、氣單胞菌、假單胞菌、沙門氏菌、志賀氏菌等常見病原菌,將其限制在較低的數(shù)量水平,同時又可以有效地控制水體中的氨氮、亞硝酸鹽、硫化物等有毒有害物質(zhì)。因此,利用蛭弧菌類生物作為水產(chǎn)養(yǎng)殖中的天然生物凈化因子具有廣闊的發(fā)展前景。鑒此,本文在概括了國內(nèi)外水產(chǎn)用蛭弧菌類生物

2、研究現(xiàn)狀的基礎(chǔ)上,剖析了我國在水產(chǎn)用蛭弧菌類生物研究中存在的問題,并對其在水產(chǎn)養(yǎng)殖中廣泛發(fā)展前景進行了展望,以期推動蛭弧菌類生物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的發(fā)展進程。
　　本文以霍亂弧菌作為宿主菌,從南美白對蝦養(yǎng)殖水體中分離到一株具有噬菌特性的菌株H2,通過對其形態(tài)觀察、特異性PCR鑒定與系統(tǒng)發(fā)育分析,證實菌株H2為噬菌弧菌(Bacteriovorax sp.)(GenBank登錄號:JX122409),其16S rRNA序列與GenBank基

3、因庫中噬菌弧菌屬菌株的16S rRNA序列有94％-98%的同源性,而且與噬菌弧菌菌株NE1(GenBank登錄號:EF092445)的親緣關(guān)系最近。此外,菌株H2對溶藻弧菌、哈維氏弧菌、創(chuàng)傷弧菌、副溶血弧菌、鰻弧菌等其他病原菌也具有良好的裂解能力,在pH7.5、亞硝酸鹽氮濃度為0.2 mg/L時具有良好的裂解活性,在氨氮濃度≥0.2 mg/L時的裂解活性降低。本研究確定了噬菌弧菌H2的分類地位,分析了噬菌弧菌H2對常見弧菌的噬菌效果以

4、及不同水環(huán)境因子對其噬菌活性的影響,不僅豐富了弧菌寄生菌的微生物資源,而且為其在養(yǎng)殖水體弧菌消除中的應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)。
　　實驗評價了分離的噬菌弧菌H2的環(huán)境安全性。方法:參照《GB/T13266-91水質(zhì)物質(zhì)對蚤類(大型蚤)急性毒性測定方法》、《漁藥臨床試驗技術(shù)規(guī)范》等國家標準及相關(guān)法規(guī)。觀察了噬菌弧菌H2對大型蚤、黃顙魚的急性毒性,分析了其對養(yǎng)殖水體主要理化因子的影響。結(jié)果顯示,噬菌弧菌H2在終濃度為0.2μL/L-2000μL