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文檔簡介
1、稗屬植物為中國農(nóng)田危害最為嚴重的雜草,每年給農(nóng)業(yè)帶來巨大損失。由于耕作和除草等方式的不同,稗屬植物具有豐富的變異,這給農(nóng)田稗屬植物的鑒定和防除工作增加了困難。本研究收集了我國主要農(nóng)區(qū)稗屬植物共計206份,通過形態(tài)標記與ISSR標記技術,分析了稗屬植物的多樣性,為稗屬植物的鑒定與農(nóng)田稗屬植物的防除工作提供理論依據(jù)。主要結果如下:
(1)從206份樣本中可以鑒別出形態(tài)性狀相對穩(wěn)定的8組,分別對應于湖南稗子(Echinochloaf
2、rumentaceae,2份樣本)、水田稗(Echinochloaoryzoides,5份)、細葉旱稗(Echinochloacrusgallivar.praticola,6份)、硬稃稗(Echinochloaglabrescens,14份)、光頭稗(Echinochloacolona,2份)、長芒稗(Echinochloacaudate,16份)、孔雀稗(Echinochloacruspavonis,8份)和包括稗原變種(Echino
3、chloacrusgallivar.crusgalli)及無芒稗(Echinochloacrusgallivar.mitis)、短芒稗(Echinochloacrusgallivar.breviseta)和西來稗(Echinochloacrusgallivar.zelayensis)(150份),有3份樣本沒有聚合成組,分別占總樣本量的0.97%、0.97%、2.42%、2.91%、3.88%、7.77%、6.80%、72.81%和1.
4、46%,這反映出中國主要稻區(qū)稗草屬植物主要稗及其變種為主;
(2)單因素方差分析表明,葉長、葉寬、圓錐花序長、總狀花序長、芒長、小穗長、第一穎長/小穗長度、主莖直徑、株高、小穗顏色、總狀花序分枝、穗立形狀、穗型、總狀花序貼/不貼向主軸、植株基部狹展情況、莖基部顏色這16個形態(tài)指標在以上8組之間有顯著差異,這些性狀應該是稗屬植物分類的重要性狀;
(3)根據(jù)8個組之間的形態(tài)差異特點,給出了區(qū)別這8個種及變種的檢索表。確定
5、了8個類群的主要區(qū)分形態(tài)特征。其中湖南稗子小穗不易脫落,小穗無芒,常為紫色,總狀花序向內側彎曲;水田稗的小穗較大,長度超過4mm,葉片較短6-18cm;硬稃稗的小穗外稃革質化突起,堅硬明亮;光頭稗的小穗在總狀花序上呈四列排列,小穗無芒,第一穎較長約為小穗長度的1/2;細葉旱稗植株粗壯高大(約150cm),小穗短于3mm、呈紫黑色;孔雀稗具長芒,芒長超過15mm,且總狀花序由明顯的小枝組成;長芒稗具長芒,芒長約20mm,總狀花序簡單;稗及
6、其變種小穗無芒或部分具芒,芒長短不一。
(4)分類上,雖然前人將細葉旱稗作為稗的變種,但是該類群總狀花序簡單、小穗無芒、葉較寬、植株高大、小穗紫黑色等特點,在聚類圖上單獨聚成一組,建議將細葉早稗作為獨立的種處理。
(5)通過正交設計的方法建立與優(yōu)化了稗屬植物ISSR擴增體系,確定了稗屬植物最佳反應體系(20μl):10×buffer2μl、dNTP0.2mmol/L、LATaq酶0.5U/20ul、模板150ng/2
7、0μl、引物0.1μmol/L;得到適宜擴增程序:94℃預變性4min,隨后進行35個循環(huán)包括94℃變性30S、52℃退火30S、72℃復性1min,72℃延伸10min,4℃保存。根據(jù)哥倫比亞大學設計并公布的ISSR隨機引物,篩選出了9條適合稗屬植物ISSR擴增的引物:UBS808、UBS826、UBS827、UBS856、UBS857、UBS888、UBS889、UBS89和UBS891,并通過溫度梯度確定了每條引物的最佳退火溫度。
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