寒地稗草種質(zhì)資源遺傳多樣性研究.pdf

1、黑龍江省寒地稗草資源豐富，種類多樣，但是分布混亂，遺傳基礎(chǔ)復(fù)雜，給其推廣和應(yīng)用帶來了很大的困難。為進一步推廣和發(fā)展應(yīng)用這些優(yōu)質(zhì)稗草，應(yīng)加強對稗草種群分布、資源搜集、系統(tǒng)分類及遺傳多樣性的研究。本研究共收集到43份寒地稗草，利用形態(tài)標記和ISSR分子標記技術(shù)對寒地稗草的遺傳多樣性進行分析，旨在為黑龍江省寒地稗草的分類鑒定及其種質(zhì)資源的利用提供參考依據(jù)。
　　(1)本試驗選擇了21個形態(tài)性狀來研究黑龍江省寒地稗草的遺傳多樣性，結(jié)果顯示

2、有15個性狀表現(xiàn)出不同程度的遺傳差異。其質(zhì)量性狀多樣性指數(shù)為0.20-1.36，數(shù)量性狀變異系數(shù)為6.40％-23.28％。這表明黑龍江省寒地稗草的遺傳多樣性豐富，在種質(zhì)變異和創(chuàng)新方面蘊藏著很大潛力。
　　(2)聚類分析將43份寒地稗草劃分成4大類群，其中第Ⅱ類群的種質(zhì)特點是花序和小穗都比較大，適合加工成精飼料或做釀酒的原料;第Ⅳ類群的植株高大粗壯、莖葉豐茂，可作為優(yōu)質(zhì)牧草進一步推廣和利用。此外，主成分分析也將全部材料分成了4大類

3、，且與聚類結(jié)果較一致。
　　(3)方差分析和顯著性檢驗表明，葉長、葉寬、圓錐花序長度、總狀花序長度、小穗長度、主莖直徑、株高、小穗脫粒性、圓錐花序彎曲程度、總狀花序是否貼向主軸和總狀花序彎曲程度這11個形態(tài)性狀在上述4大類群間表現(xiàn)出顯著性差異，這些性狀是鑒定寒地稗草的重要形態(tài)指標。
　　(4)通過正交試驗法對寒地稗草的ISSR-PCR反應(yīng)體系進行優(yōu)化。確定了寒地稗草的最佳反應(yīng)體系（20μL）為:dNTPs0.3mmol/L、

4、引物0.2μmol/L、Taq DNA酶0.75U、模板DNA20ng、10×PCRBuffer(Mg2+plus)2μL。以該體系為基礎(chǔ)對引物進行篩選，從哥倫比亞大學(xué)公布的50條通用引物中共篩選出8條適合寒地稗草擴增的引物，分別為UBC808、UBC826、UBC827、UBC856、UBC857、UBC888、UBC889和UBC890，并利用梯度PCR儀確定了這8條引物的最適退火溫度。
　　(5)利用篩選出的8條ISSR引物