冰草屬植物種質(zhì)資源遺傳多樣性研究.pdf

1、本研究以來自國內(nèi)外的扁穗冰草26份、沙生冰草9份、西伯利亞冰草3份、蒙古冰草1份和蘭莖冰草1份為供試材料，從形態(tài)多樣性分析和ISSR（簡單重復序列區(qū)間）分子標記兩個方面進行了遺傳多樣性研究。主要研究結(jié)果如下： 1．表型多樣性的研究結(jié)果：冰草屬植物種質(zhì)資源存在豐富的形態(tài)變異，平均變異系數(shù)為22．94％，其中穗軸第一節(jié)間長的變異系數(shù)最大。方差分析表明，供試材料種間及種內(nèi)均達到極顯著差異或顯著差異，表現(xiàn)出豐富的形態(tài)學多樣性。主成分分析

2、，前5個主成分的累積貢獻率達76．369％。聚類分析，40份冰草屬種質(zhì)材料在遺傳距離為15處聚為3類：第1類主要是來源于國外的扁穗冰草、第2類主要是沙生冰草、第3類主要是來源于國內(nèi)的扁穗冰草。聚類結(jié)果按種明顯區(qū)分開來，但在種間又有交叉；聚類結(jié)果同時表明，材料地理來源對系統(tǒng)聚類結(jié)果影響較大。 2．建立了冰草屬ISSR分析的技術(shù)體系，20μL的反應體系中，含40 ng模板DNA，0．2mmol/LdNTP，0．5μmol/L ISS

3、R引物，1 U Taq DNA聚合酶，2μL10×PCRBuffer，2．5 mmol/L MgCl2。反應程序為：94℃預變性4 min，94℃變性30 s，60℃（60℃～58℃）退火45 s，72℃延伸1 min45 s，共11個循環(huán)，每個循環(huán)退火溫度降1℃；94℃變性30 s，50℃（50℃～48℃）退火45 s，共24個循環(huán)；72℃延伸5min，25℃保溫，4℃保存。 3．篩選出11條ISSR引物對33份冰草材料進行P

4、CR擴增，結(jié)果表明：33份冰草材料得到84個位點，其中多態(tài)性位點數(shù)為59，多態(tài)性位點百分率為70．2％，說明供試材料間存在較大的遺傳變異，多態(tài)性豐富。冰草屬材料的相似性系數(shù)分析，ISSR標記的GS值在0．083到0．706之間，平均GS值為0．395。運用NTSYS軟件，得到33個品種間的親緣關(guān)系樹狀圖，在GS值為0．52處將33份材料聚為4類，材料地理來源對系統(tǒng)聚類結(jié)果影響較大，基本依地理距離聚類，各來源地的材料在聚類圖又有交叉現(xiàn)象，