油菜籽中酚類物質(zhì)提取純化及其活性功能研究.pdf

1、油菜系十字花科作物，世界第三大油料作物，分布甚廣，除我國以外，加拿大、印度、波蘭、法國、巴基斯坦等國家也大量種植。我國油菜籽的種植面積700萬公頃以上，產(chǎn)量高達(dá)1200多萬噸，均居世界之首。目前國內(nèi)外菜籽的綜合利用都距工業(yè)化應(yīng)用還有一段距離，但為了更好的利用油菜籽，還是很有必要重視在油菜籽綜合利用方面的科學(xué)研究。本文研究了菜籽酚類物質(zhì)提取工藝，確定了菜籽中酚類物質(zhì)的最優(yōu)提取工藝參數(shù);研究了大孔吸附樹脂對菜籽中酚類物質(zhì)的最佳純化條件，使菜

2、籽酚類物質(zhì)的純度大大提高;評價了菜籽酚類物質(zhì)的體外抗氧化活性;探索了菜籽酚類物質(zhì)對植物性病原菌（小麥紋枯菌、番茄早疫菌、白菜黑斑菌）的抑制作用，得到最低抑菌濃度。主要研究如下:
　　 (1)本實驗研究了油菜籽酚類物質(zhì)的最佳提取工藝。以整粒破碎菜籽為原料，在單因素的基礎(chǔ)上，通過Plackett Burman試驗篩選出對提取菜籽酚類物質(zhì)影響較大的四個因素（乙醇濃度、提取時間、提取溫度、提取次數(shù)），采用響應(yīng)曲面分析對其進(jìn)行工藝優(yōu)化，得

3、到最佳工藝參數(shù):乙醇體積分?jǐn)?shù)65％，提取溫度70℃，提取時間50 min，料液比1∶8(m∶V)，鹽酸含量0.04％，振蕩器轉(zhuǎn)速200 r/min，提取3次。優(yōu)化后，菜籽酚物質(zhì)的提取率為75.39％，與預(yù)測模型所得數(shù)值接近，可以為菜籽中酚類物質(zhì)提取提供理論基礎(chǔ)。
　　 (2)本實驗研究了菜籽酚類物質(zhì)的最佳純化條件。對8種不同型號的大孔樹脂的篩選試驗證明，HPD100型大孔樹脂對菜籽中酚類物質(zhì)有較強(qiáng)的吸附和解吸附能力，適用于菜籽中

4、酚類物質(zhì)的純化。通過菜籽酚類物質(zhì)在HPD100樹脂上的動態(tài)吸附與解吸附研究，確定最佳吸附與解吸附條件:上樣溶液質(zhì)量濃度3.5mg/mL，進(jìn)樣流速3mL/min，乙醇體積分?jǐn)?shù)60％，洗脫流速2mL/min，洗脫體積100mL。純化后，菜籽中酚類物質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)從原來的3.79％提高到35.48％。說明HPD100型大孔樹脂對菜籽中酚類物質(zhì)的純化效果較好，能大幅度提高提取物中酚類物質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。
　　 (3)本實驗研究了菜籽酚類物質(zhì)的

5、體外抗氧化活性及其抑菌作用。通過還原能力、ABTS+·自由基、DPPH自由基、ORAC四種不同體系測定菜籽酚類物質(zhì)的抗氧化性。菜籽中酚類物質(zhì)的還原能力隨著濃度的增大相應(yīng)提高，當(dāng)濃度為45ug/mL左右時，菜籽酚類物質(zhì)的還原力和Vc相當(dāng);菜籽中酚類物質(zhì)對ABTS+·自由基、DPPH自由基有較強(qiáng)的清除能力，并隨濃度的增加而增強(qiáng)，在同一濃度下菜籽酚類物質(zhì)清除ABTS+·自由基和DPPH自由基的能力均低于Vc。菜籽的ORAC值是2.26 mmo

6、l trolox/g干重，總體抗氧化性低于茶葉。說明菜籽中酚類物質(zhì)具有適度的抗氧化能力，具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。
　　 菜籽多酚對植物病害菌有一定的抑制作用，并隨著濃度的增大抑制效果增強(qiáng)。菜籽多酚對番茄早疫菌的最低抑菌濃度是0.8mg/mL左右，對小麥紋枯菌的MIC值是0.6mg/mL左右，對白菜黑斑菌的MIC值是1.5mg/mL左右。當(dāng)菜籽多酚的濃度達(dá)到6mg/mL時，對這三種植物病害菌的抑制率均達(dá)到80％以上。菜籽酚類物質(zhì)的