黃體期不同飼喂量對(duì)湖羊卵泡發(fā)育、血液理化指標(biāo)和卵泡內(nèi)微環(huán)境的影響.pdf

1、本文研究了在同一生殖和營(yíng)養(yǎng)生理狀態(tài)下湖羊黃體期不同發(fā)育階段卵泡內(nèi)代謝產(chǎn)物和激素含量的變化關(guān)系，探討了黃體期不同飼喂量對(duì)湖羊卵泡發(fā)育、血液和卵泡內(nèi)代謝產(chǎn)物和激素濃度、卵泡和黃體細(xì)胞類固醇調(diào)節(jié)基因表達(dá)的影響，旨在揭示黃體期不同飼喂量影響卵泡發(fā)育的機(jī)制，為規(guī)?；驁?chǎng)空懷母羊的科學(xué)飼養(yǎng)以及進(jìn)一步研究營(yíng)養(yǎng)影響綿羊繁殖性能的精細(xì)信號(hào)通路提供一定的參考。試驗(yàn)共分5個(gè)部分:
　　 試驗(yàn)一、湖羊不同發(fā)育階段卵泡內(nèi)代謝產(chǎn)物和激素含量的比較研究

2、>　　 選擇體重40 kg左右的湖羊11頭，同期發(fā)情結(jié)束后第12天屠宰，按不同大小卵泡分離卵泡液。試驗(yàn)結(jié)果顯示，與≤2.5 mm卵泡相比，＞2.5 mm卵泡內(nèi)葡萄糖濃度顯著提高(P＜0.05)，胰高血糖素濃度顯著降低(P＜0.05)，乳酸脫氫酶活性和睪酮濃度極顯著降低(P＜0.01)，雌二醇濃度極顯著提高(P＜0.01)，血氨、游離脂肪酸、尿素、胰島素和孕酮濃度差異不顯著。雌二醇濃度與LDH活性極顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.01)，與葡萄糖濃

3、度顯著正相關(guān)(P＜0.05)，與胰高血糖素濃度顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.05)，與睪酮濃度極顯著負(fù)相關(guān)(P＜0.01)，與孕酮濃度接近正相關(guān)(P=0.051)。試驗(yàn)結(jié)果表明，卵泡內(nèi)代謝產(chǎn)物和激素共同參與調(diào)節(jié)卵泡發(fā)育。
　　 試驗(yàn)二、黃體期不同飼喂量對(duì)湖羊卵泡發(fā)育的影響
　　 選擇體重40 kg左右，3-4歲的經(jīng)產(chǎn)健康母羊28頭，隨機(jī)分三組:R組(n=11)，C組(n=6)和S組(n=11)，同期發(fā)情結(jié)束后第6天分別按0.5倍體

4、重維持需要量(0.5×M)，1×M和1.5×M飼喂，第12天每組屠宰6只，分離不小于1.0 mm的卵泡，分別計(jì)算每頭羊卵泡直徑為1.0-2.0 mm，2.0-2.5 mm，2.5-3.5 mm和≥3.5mm卵泡數(shù)和卵泡體積，剩下的湖羊用于觀察發(fā)情。分別在放栓、拆栓、不同飼喂量處理和屠宰時(shí)稱重和評(píng)定體況。試驗(yàn)結(jié)果顯示，整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中體重和體況無(wú)顯著性差異。隨著飼喂水平提高，≥3.5 mm卵泡數(shù)顯著增加(P＜0.05)，2.5-3.5 mm

5、卵泡數(shù)顯著降低(P＜0.05)，平均發(fā)情周期縮短（P＜0.05），＞2.5 mm卵泡平均體積顯著增大(P＜0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明，黃體溶解前限飼6天抑制卵泡發(fā)育。
　　 試驗(yàn)三、黃體期不同飼喂量對(duì)湖羊血液理化指標(biāo)的影響
　　 發(fā)情周期第12天屠宰后，測(cè)量器官重量，在不同飼喂量處理期每天采血。試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著飼喂水平降低，血液尿素，膽固醇，低密度脂蛋白、游離脂肪酸、FSH、雌二醇和孕酮含量及孕酮與雌二醇比值和胰島素和胰

6、高血糖素比值顯著升高(P＜0.05)，葡萄糖、甘油三酯、三碘甲狀原氨酸、胰島素和胰高血糖素含量顯著降低(P＜0.05);血液尿酸，血氨，高密度脂蛋白和谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性差異不顯著(P＞0.05)，但尿酸、血氨、低密度脂蛋白含量和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性具有時(shí)間效應(yīng)(P＜0.05)。R組亮氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、絲氨酸、乙醇胺、必須氨基酸、必須氨基酸衍生物、氨基酸代謝物和總氨基酸在飼喂期間低于S組，而?；撬?、瓜氨酸和氨能代謝產(chǎn)物與總

7、氨基酸比值高于S組。與S組相比，R組脾臟重，脾臟與體重比值顯著升高(P＜0.05)，肝臟重、小腸重、肝臟與體重比和胃重與體重比顯著降低(P＜0.05)。試驗(yàn)結(jié)果表明，綿羊黃體期不同生理階段具有不同的營(yíng)養(yǎng)需求和代謝特點(diǎn);黃體期限飼抑制卵泡發(fā)育與能量負(fù)平衡引起蛋白質(zhì)和脂類合成降低，分解增強(qiáng)以及氨基酸代謝和內(nèi)分泌激素分泌模式改變相關(guān)。
　　 試驗(yàn)四、黃體期不同飼喂量對(duì)湖羊卵泡液微環(huán)境的影響
　　 發(fā)情周期第12天屠宰后，取每頭

8、羊卵巢，分離1.0-2.0 mm組，2.0-2.5 mm組和單個(gè)＞2.5 mm卵泡卵泡液。試驗(yàn)結(jié)果顯示，與S組相比，R組增加了卵泡內(nèi)雌二醇、磷酸乙醇胺、尿素(P＜0.05)和δ-羥賴氨酸濃度(P=0.085)，減少了鳥氨酸濃度、必須氨基酸與必須氨基酸衍生物比值(P＜0.05)和氨能代謝產(chǎn)物與總氨基酸比值(P=0.075)。限飼和補(bǔ)飼組卵泡內(nèi)胰島素水平相似，但高于對(duì)照組(P＜0.05)。不同大小卵泡顯著影響卵泡液葡萄糖、雌二醇、睪酮、胰島

9、素、胰高血糖素和乳酸脫氫酶水平(P＜0.05)，但僅在R組≤2.5 mm卵泡液和＞2.5 mm卵泡液乳酸脫氫酶活性和睪酮濃度差異不顯著。試驗(yàn)結(jié)果表明，黃體期限飼影響了發(fā)育后期卵泡內(nèi)氨基酸代謝，增加雌二醇和睪酮濃度以及乳酸脫氫酶的活性，抑制了卵泡發(fā)育。
　　 試驗(yàn)五、黃體期不同飼喂量對(duì)湖羊卵泡細(xì)胞類固醇調(diào)節(jié)基因表達(dá)的影響
　　 發(fā)情周期第12天屠宰后，取每頭羊卵巢，分離1.0-2.0 mm組，2.0-2.5 mm組和單個(gè)＞

10、2.5 mm卵泡細(xì)胞以及黃體細(xì)胞。試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同飼喂量?jī)H影響ESR1、CYP17A1和CYP19A1 mRNA表達(dá)水平(P＜0.05)。對(duì)＞2.5 mm卵泡細(xì)胞，R和C組CYP17A1 mRNA表達(dá)水平顯著低于S組(P＜0.05)，R組CYP19A1 mRNA表達(dá)水平顯著高于S組(P＜0.05)，ESR1 mRNA表達(dá)水平顯著低于C和S組(P＜0.05)。不同大小卵泡顯著影響VLDLR、ESR2、FSHR(P＜0.05)、CYP17