卵泡抑素影響牛胚胎早期發(fā)育的研究.pdf

1、目前雖然牛的胚胎體外操作技術(shù)已經(jīng)比較完善，但是囊胚率等胚胎發(fā)育指標(biāo)仍然不能和體內(nèi)相比，發(fā)育率低下仍然是限制胚胎工程技術(shù)的一個主要瓶頸。所以本研究試圖通過添加卵泡抑素來提高囊胚率。
　　 本研究采用了胚胎體外操作方法，顯微注射方法，分子生物學(xué)方法，熒光免疫學(xué)方法等技術(shù)手段，驚喜的發(fā)現(xiàn)發(fā)生早期卵裂牛胚胎如果在IVC1和IVC2階段都添加卵泡抑素可以在受精后第7天顯著提高囊胚率和擴(kuò)張囊胚率，最高的囊胚率可穩(wěn)定達(dá)到65％。并且得到以下結(jié)

2、論。
　　 1)在IVC1階段添加不同濃度卵泡抑素對牛胚胎早期發(fā)育有不同影響，但是即使沉默了也不會影響早期卵裂率，這提示我們可能在早期的胚胎發(fā)育的最初階段，尤其是發(fā)生早期卵裂的階段，卵泡抑素并不是必須的，但是如果外源性的加入適量的卵泡抑素可以在正常的基礎(chǔ)上提高早期卵裂率。
　　 2)在IVC1和IVC2階段全都添加10ng/mL的卵泡抑素可以在受精后第7天提高囊胚率和擴(kuò)張囊胚率。在IVC1階段添加卵泡抑素，要比在IVC2

3、階段添加卵泡抑素，獲得顯著提高的囊胚率，添加卵泡抑素雖然影響囊胚率，這主要是通過提高滋養(yǎng)層細(xì)胞的數(shù)量來實現(xiàn)的，但是不影響內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞數(shù)量。
　　 3)發(fā)生早期卵裂牛胚胎添加卵泡抑素可以在受精后第7天顯著提高囊胚率。發(fā)生早期卵裂牛胚胎，不添加或者IVC1階段單獨添加10ng/mL的卵泡抑素，也可以達(dá)到50%囊胚率，顯著高于批次對照組。發(fā)生中期卵裂牛胚胎如果在培養(yǎng)時不添加卵泡抑素，都顯著低于在培養(yǎng)時添加卵泡抑素的囊胚率，并且與批次對