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文檔簡介
1、目前雖然牛的胚胎體外操作技術(shù)已經(jīng)比較完善,但是囊胚率等胚胎發(fā)育指標(biāo)仍然不能和體內(nèi)相比,發(fā)育率低下仍然是限制胚胎工程技術(shù)的一個主要瓶頸。所以本研究試圖通過添加卵泡抑素來提高囊胚率。
本研究采用了胚胎體外操作方法,顯微注射方法,分子生物學(xué)方法,熒光免疫學(xué)方法等技術(shù)手段,驚喜的發(fā)現(xiàn)發(fā)生早期卵裂牛胚胎如果在IVC1和IVC2階段都添加卵泡抑素可以在受精后第7天顯著提高囊胚率和擴張囊胚率,最高的囊胚率可穩(wěn)定達到65%。并且得到以下結(jié)
2、論。
1)在IVC1階段添加不同濃度卵泡抑素對牛胚胎早期發(fā)育有不同影響,但是即使沉默了也不會影響早期卵裂率,這提示我們可能在早期的胚胎發(fā)育的最初階段,尤其是發(fā)生早期卵裂的階段,卵泡抑素并不是必須的,但是如果外源性的加入適量的卵泡抑素可以在正常的基礎(chǔ)上提高早期卵裂率。
2)在IVC1和IVC2階段全都添加10ng/mL的卵泡抑素可以在受精后第7天提高囊胚率和擴張囊胚率。在IVC1階段添加卵泡抑素,要比在IVC2
3、階段添加卵泡抑素,獲得顯著提高的囊胚率,添加卵泡抑素雖然影響囊胚率,這主要是通過提高滋養(yǎng)層細胞的數(shù)量來實現(xiàn)的,但是不影響內(nèi)細胞團細胞數(shù)量。
3)發(fā)生早期卵裂牛胚胎添加卵泡抑素可以在受精后第7天顯著提高囊胚率。發(fā)生早期卵裂牛胚胎,不添加或者IVC1階段單獨添加10ng/mL的卵泡抑素,也可以達到50%囊胚率,顯著高于批次對照組。發(fā)生中期卵裂牛胚胎如果在培養(yǎng)時不添加卵泡抑素,都顯著低于在培養(yǎng)時添加卵泡抑素的囊胚率,并且與批次對
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