青藏高原可可西里唐古拉山區(qū)凍土區(qū)的微生物多樣性的研究.pdf

1、地殼運(yùn)動(dòng)引起的高海拔使得青藏高原成為一個(gè)獨(dú)特的高原永久凍土環(huán)境，該環(huán)境在微生物的分類和多樣性上占有重要的地位。青藏高原凍土區(qū)表層的活動(dòng)層并非永久凍土環(huán)境，但是凍土活動(dòng)層卻構(gòu)成了凍土環(huán)境中的一個(gè)重要組成部分。而在溫室效應(yīng)的作用下，全球氣候在不斷的變暖的同時(shí)，青藏高原凍土正在不斷的消融，這也使得青藏高原凍土微生物的的研究變的非常緊迫。
　　本文中選取了青藏高原可可西里-唐古拉山凍土區(qū)的七個(gè)土壤樣品作為材料進(jìn)行研究。在不同的培養(yǎng)基和溫度

2、的環(huán)境培養(yǎng)下得到的分離出的菌株，并將這些菌株進(jìn)行測(cè)序，從而分析該地區(qū)微生物的多樣性。將土壤樣品分別在LB和PYGV培養(yǎng)基上進(jìn)行微生物的培養(yǎng)，總共得127株純培養(yǎng)，并得出在兩種培養(yǎng)基上的CFU在0-6×107/g土壤之間。在這127株被發(fā)現(xiàn)的菌株中，通過(guò)16SrDNA和系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)分析得出，這些菌株屬于：放線菌門(mén)、厚壁菌門(mén)、變形菌門(mén)，其中變形菌門(mén)和放線菌門(mén)占優(yōu)勢(shì)地位，并用基因序列比對(duì)的方法分析了該地區(qū)的微生物的分類和多樣性后得出以下的研究結(jié)

3、果，青藏高原凍土微生物在不同的樣品的分離出的數(shù)目相差很大，由于不同的地點(diǎn)，濕度，海拔，以及取樣深度，造成了樣品的生理生化性質(zhì)很大的差異。但是將所有樣品在分離出微生物以后再比對(duì)以樣品的性質(zhì)，發(fā)現(xiàn)可培養(yǎng)的凍土微生物的數(shù)量依然與取樣地點(diǎn)有很大關(guān)系。淺層凍土，即凍土活動(dòng)層中存活較大數(shù)量的微生物，隨著深度的增加，可培養(yǎng)凍土微生物的數(shù)量在不斷減少。將樣品在不同的培養(yǎng)基以及不同溫度下培養(yǎng)，得到的可培養(yǎng)微生物差異較大。在LB培養(yǎng)基，即富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中培養(yǎng)

4、的到的結(jié)果中，凍土活動(dòng)層中的微生物更容易在此生存。而在PYGV培養(yǎng)基中，即寡營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基中，凍土深層中的微生物，更容易生存。這也反映在長(zhǎng)期的自然選擇下，微生物更傾向于適應(yīng)所在環(huán)境的溫度即生態(tài)環(huán)境。將提取得到的所有微生物的16SrDNA，并將其序列與GENEbank中已知的微生物基因比對(duì)，發(fā)現(xiàn)凍土環(huán)境中存在的微生物有很大的特殊性。
　　首先，凍土區(qū)的微生物基因序列與已知序列差異較大，也表明這些微生物成為新的菌株的可能性非常大。在本文中

5、發(fā)現(xiàn)5條微生物的16SrRNA與已知序列相似度低于96％，因此這些微生物是新種的幾率較大。另外，本文中分離出的微生物屬Proteobacteria,Actinobacteria,Acidobacteria,Firmicutes和Bacteroidetes，其中Proteobacteria和Actinobacteria豐度最大，與普通土壤環(huán)境中微生物構(gòu)成差異較大。本文中采取構(gòu)建系統(tǒng)樹(shù)的方法，將所有分理出的微生物進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析，將所有序列