紫外輻射對青藏高原植物內生細菌多樣性的影響.pdf

1、本研究以人工模擬UV-B輻射增強和正常生長條件下的植物為研究對象。通過對植物表面消毒來分離內生細菌進而培養(yǎng)，利用經(jīng)典的分離培養(yǎng)的方法和分子生物學技術即PCR-RFLP和16S rRNA基因序列分析。對來自13種植物的內生細菌的形態(tài)和生理特性以及遺傳多樣性進行了研究。并對植物、內生細菌及環(huán)境之間的關系進行了初步討論。其主要研究結果如下： 1.由于宿主植物的形態(tài)結構的不同，會導致紫外輻射對內生細菌的影響不同。其中7種植物UV-B處理

2、條件下的內生細菌菌群密度，明顯低于正常條件。UV-B輻射和正常生長條件下，同種植物中的內生細菌的菌群密度有明顯的差異。這7種植物的可培養(yǎng)內生細菌種類在不同處理條件下有所不同。說明UV-B對植物內生細菌產(chǎn)生直接的作用。而剩余6種植物剛好相反。UV-B處理條件下的內生細菌菌群密度，明顯高于正常條件。 2.選用兩種限制性內切酶Hin6I和BsuRI對菌株的16S rRNA擴增產(chǎn)物進行PCR-RFLP分析，并對譜帶差異明顯的菌株進行測序

3、。結果表明：分離鑒定的22種內生細菌，共形成a-proteobacteria、γ-proteobacteria、高G+C含量的革蘭氏陽性細菌(HGC)、低G+C含量的革蘭氏陽性細菌(LGC)、CFB類群，其種屬類型較為豐富，共有17個屬的分布。其中HGC和LGC類群的細菌，占總分離物的29.4％。種群多樣性最豐富，各有5個屬的細菌分布。 3.已鑒定出的22種內生細菌在13種植物中分布存在差異。其中魯氏不動桿菌(Acinetoba

4、cter lwoffii)，廣泛分布12種植物中。革蘭氏陰性菌，廣泛分布于外界環(huán)境，主要是水和土壤中。它對于干燥、H2O2、γ-射線以及紫外輻射具有較強的抵抗能力。進一步揭示內生細菌與宿主之間是一種相互選擇、相互適應的多元交互協(xié)同作用。 4.恢復培養(yǎng)的內生細菌中，大部分都能夠產(chǎn)生黃色、橘紅或粉紅色的色素。已鑒定的細菌中革蘭氏陽性占的比例較高(58.8％)。這與其它冷環(huán)境如凍土和冰川微生物的特性相一致，而與溫和環(huán)境中植物內生細菌的