水稻?;D移酶基因的克隆、功能分析及轉AtMYB12基因番茄的獲得.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、?;D移酶是一個多功能蛋白質大家族,其功能具有多樣性。其中一個主要功能就是催化蛋白質的?;腿ヵ;?N-乙酰基轉移酶(N-acetyltransferase,NAT)可催化乙?;鶑囊阴oA上轉移到異煙肼的氮原子上;組蛋白乙酰轉移酶(HAT)和組蛋白脫乙酰基酶(histone deacetylase,HDAC)分別催化組蛋白N-端殘基上的乙?;腿ヒ阴;?而?;腿ヵ;质钦婧松锏鞍踪|翻譯后修飾中最普遍的方式,所以在某種意義上

2、講,?;D移酶又有調節(jié)蛋白質生物活性、基因表達等多種功能。但是在機體內,有著多種?;D移酶,除了催化蛋白質的?;腿ヵ;?還發(fā)揮著其他重要的功能,例如脂酰輔酶A:膽固醇?;D移酶(ACAT)所催化的膽固醇的酯化反應無論在細胞還是個體水平的膽固醇代謝平衡中都發(fā)揮了極其重要的作用。
   本研究的目的是分離克隆通過同源序列法鑒定的水稻中的BAHD酰基轉移酶基因,并運用超量表達技術,RNA干涉(RNAi)技術,研究這些基因在水稻

3、次生代謝、生物脅迫和非生物脅迫中的功能,對涉及到這些基因參與的水稻抗病抗逆機理進行初步探索。
   具體結果如下:
   1.分別克隆了Os02g39850全長cDNA、Os04g42250全長cDNA、Os06g08640全長cDNA、Os09g25460全長cDNA和Os10g3950全長cDNA。構建了植物表達載體ds1301:Os02g39850、pU1301:Os04g42250、ds1301:Os04g422

4、50和ds1301:Os06g08640。將所構建的重組植物表達載體利用凍融法直接導入農桿菌EHA105。
   2.用農桿菌侵染的方法,將植物表達載體ds1301:Os02g39850、pU1301:Os04g42250、ds1301:Os04g42250和ds1301:Os06g08640轉入水稻中。目前獲得Os04g42250超量表達植株6株,Os04g42250抑制表達植株17株,超量表達載體轉化水稻陽性率為75%,抑制

5、表達載體轉化水稻陽性率為44.7%。
   3.Os04g42250超量表達植株和抑制表達植株接種白葉枯病菌PX099,10天后,觀察癥狀。其中7株抑制表達載體轉基因植株的平均病斑長度為9.0±1.2 cm,而對照野生型中花11的平均病斑長度為5.0±0.6cm,4株超量表達載體轉基因植株的平均病斑長度為1.3±0.3cm。這些結果說明,Os04g42250基因沉默后,植株更容易感病,發(fā)病癥狀更加明顯,而Os04g42250基因

6、在水稻中超量表達后,提高了植株的抗性。
   生物類黃酮具有多種生物活性,可用于延緩衰老,治療和預防癌癥、心血管病等疾病,具有很大的開發(fā)應用價值。當前滿足市場需求的途徑主要是通過化學方法從天然材料如銀杏、水果中提取,其成本高,含量少。本研究擬通過。AtMYB12基因,果實特異性表達啟動子E8和無選擇標記載體PX6-GFP,構建植物表達載體pX6-AtMYB12-E8,來對小果型番茄進行基因工程改造,特異性調控表達基因AtMYB1

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