2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、<p>  豬超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)酶聯(lián)免疫分析</p><p><b>  試劑盒使用說明書</b></p><p>  本試劑盒僅供研究使用。</p><p>  檢測范圍: 48T</p>&l

2、t;p>  0.3μg/L -8μg/L</p><p><b>  使用目的:</b></p><p>  本試劑盒用于測定豬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)含量。</p><p><b>  實驗原理</b></p><p>  本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中豬

3、超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)水平。用純化的豬超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP),再與HRP標(biāo)記的超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測

4、定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中豬超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)濃度。 </p><p><b>  試劑盒組成 </b></p><p><b>  標(biāo)本要求 </b></p><p>  1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避

5、免反復(fù)凍融</p><p>  2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。</p><p><b>  操作步驟</b></p><p>  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。</p><p>  加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)

6、試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。</p><p>  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 </p><p>  配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用</p>

7、<p>  洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。</p><p>  加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 </p><p><b>  溫育:操作同3。</b></p><p><b>  洗滌:操作同5。</b></p><p

8、>  顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.</p><p>  終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。</p><p>  測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。</p><p><b>  操作程序總結(jié):

9、</b></p><p><b>  計算</b></p><p>  以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。 </p>&l

10、t;p><b>  注意事項</b></p><p>  1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。</p><p>  2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。</p><p>  3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以

11、避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。</p><p>  請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。</p><p>  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。</p>

12、<p>  6.底物請避光保存。</p><p>  7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).</p><p>  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。</p><p>  9.本試劑不同批號組分不得混用。</p><p>  10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。</p>

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