氨氮對(duì)泥鰍成魚及混合選育F2代的脅迫作用.pdf

1、泥鰍是近年來(lái)國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)需求量不斷增加的淡水魚類之一,因其適應(yīng)能力強(qiáng)、疾病少、運(yùn)輸方便等優(yōu)點(diǎn),已成為重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖對(duì)象。隨著集約化養(yǎng)殖模式的推廣,氨氮已經(jīng)成為泥鰍養(yǎng)殖過(guò)程中一種主要的環(huán)境脅迫因子,本研究對(duì)泥鰍成魚進(jìn)行了氨氮脅迫試驗(yàn),揭示在養(yǎng)殖過(guò)程中氨氮污染對(duì)泥鰍的毒理機(jī)制。同時(shí),比較了泥鰍F2代混合選育群體與對(duì)照群體的抗氨氮脅迫的能力。主要結(jié)果如下:
　　 1泥鰍的氨氮脅迫毒性研究
　　 1.1泥鰍的氨氮脅迫急性毒理試驗(yàn)<

2、br>　　 以泥鰍為研究對(duì)象,研究了氨氮脅迫對(duì)泥鰍成魚死亡率的影響。結(jié)果表明:在水溫29℃,pH8.2±0.1,溶氧6.5±0.5 mg·L-1時(shí),水中氨氮濃度越高,泥鰍的死亡率越高,其96h的半致死總氨濃度(TAN)為164.4 mg·L-1,非離子氨(NH3-N)濃度為2.22 mg·L-1。
　　 1.2氨氮脅迫對(duì)泥鰍三種組織SOD及GSH-Px酶活力的影響
　　 采用生態(tài)毒理學(xué)方法,在淡水中分別添加NH4Cl0

3、 mg·L-1、50 mg·L-1、150mg·L-1、250 mg·L-1、450 mg·L-1,研究了21d內(nèi)氨氮脅迫對(duì)泥鰍肌肉、肝臟、鰓組織中超氧化物歧化酶(SOD)與谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)活性的影響。結(jié)果表明:低濃度組(50和150 mg·L-1)在脅迫的2d和7d對(duì)泥鰍鰓和肝臟SOD和GSH-Px酶活性存在誘導(dǎo)作用,且隨著脅迫濃度的升高和脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)兩種酶活性逐漸升高,14d和21d時(shí)氨氮對(duì)兩種酶活性表現(xiàn)出抑制作

4、用,且隨脅迫濃度的升高和時(shí)間的延長(zhǎng)酶活力逐漸降低。但250 mg·L-1組和450 mg·L-1組在脅迫21d內(nèi),SOD和GSH-Px抗氧化酶活性隨濃度升高一直呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。與鰓和肝臟組織相比,肌肉組織內(nèi)SOD和GSH-Px對(duì)氨氮脅迫的反應(yīng)比較滯后,僅在氨氮脅迫14d后出現(xiàn)低濃度組SOD酶活性升高,高濃度組SOD酶活性降低的趨勢(shì),而GSH-Px的變化趨勢(shì)與SOD相反。氨氮脅迫時(shí)間越長(zhǎng)、濃度越高,對(duì)泥鰍抗氧化能力的抑制作用越顯著。

5、>　　 1.3氨氮脅迫對(duì)泥鰍鰓及肝臟組織超微結(jié)構(gòu)的影響
　　 采用生態(tài)毒理學(xué)方法,研究了NH4Cl對(duì)泥鰍鰓和肝臟細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響。將試驗(yàn)魚暴露于50、150、250、450 mg·L-1NH4Cl中,21d后取鰓和肝臟制備電鏡樣品,觀察鰓上皮和肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果表明,隨著氨氮濃度的變化,試驗(yàn)組泥鰍鰓組織在21d后出現(xiàn)不同程度的變化:其中,50和150 mg·L-1濃度組鰓絲表面出現(xiàn)大量分泌物,細(xì)胞水腫；250 mg·L-1

6、濃度組鰓小片聚攏,上皮細(xì)胞水腫加??；450 mg·L-1濃度組鰓上皮壞死。泥鰍肝臟細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)在不同氨氮濃度下也出現(xiàn)不同程度的損傷:低濃度組肝細(xì)胞線粒體扭曲變形,細(xì)胞核變形,核膜腫脹；250mg·L-1濃度組肝臟細(xì)胞結(jié)構(gòu)遭到嚴(yán)重破壞,肝細(xì)胞胞漿空泡化,殘存細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)不完整；450 mg·L-1濃度組出現(xiàn)大量細(xì)胞凋亡。隨著氨氮脅迫濃度的不斷升高,鰓組織和肝細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的受損程度逐漸加深,且損傷不可逆轉(zhuǎn)。
　　 2氨氮對(duì)泥鰍F2代

7、混合選育群體與對(duì)照群體幼魚的急性及遺傳毒理
　　 采用常規(guī)生物急性毒性試驗(yàn)法,研究了氨氮對(duì)泥鰍混合選育F2代群體和對(duì)照群體的急性毒性和遺傳毒性。結(jié)果表明:在pH8.0、水溫25℃條件下,混合選育群體泥鰍的24、48、72、96h的總氨(TAN)半致死濃度分別為681.29mg·L-1、239.50 mg·L-1、179.57 mg·L-1、148.74 mg·L-1；對(duì)照群體泥鰍在24、48、72、96h的總氨半致死濃度為599

8、.48mg·L-1、240.18 mg·L-1、166.0 mg·L-1、108.57 mg·L-1。利用血液紅細(xì)胞微核試驗(yàn)方法,研究了96h內(nèi)氨氮對(duì)泥鰍混合選育群體和對(duì)照群體幼魚紅細(xì)胞微核率、核異常率的影響。結(jié)果表明:氨氮可引起泥鰍幼魚血液紅細(xì)胞微核率和核異常率指標(biāo)發(fā)生顯著變化,隨著氨氮濃度的增加,泥鰍紅細(xì)胞微核和核異常率呈現(xiàn)先上升后下降的變化；混合選育群體在紅細(xì)胞微核率和核異常率指標(biāo)上普遍低于對(duì)照群體,表現(xiàn)出對(duì)氨氮較強(qiáng)的抗逆性。

9、r>　　 3泥鰍混合選育F2代生長(zhǎng)性能分析
　　 以人工繁殖產(chǎn)生的F1代泥鰍為基礎(chǔ)群體,采用混合選育方法進(jìn)行了人工選育,對(duì)產(chǎn)生的混合選育群體F2代進(jìn)行生長(zhǎng)性能分析,結(jié)果表明:F2代混合選育群體泥鰍的日增重率和日增長(zhǎng)率分別分別達(dá)到0.022g／d和0.036cm／d,比對(duì)照群體提高了4.7％和2.9％。,混合選育群體體重變異系數(shù)和體長(zhǎng)變異系數(shù)分別比對(duì)照群體降低了9.8％和8.1％,經(jīng)過(guò)一代人工選育,泥鰍生長(zhǎng)性能進(jìn)一步提高,且群體