枯草芽孢桿菌混合發(fā)酵制備豆粕飼料的研究.pdf

1、豆粕是大豆提取豆油后所得的一種副產(chǎn)品,是一種營養(yǎng)豐富、營養(yǎng)成分種類齊全、營養(yǎng)物質(zhì)含量均衡的植物性蛋白飼料源。豆粕蛋白質(zhì)含量高,特別是水溶性蛋白質(zhì)占了豆粕中蛋白質(zhì)的大部分,但由于這些水溶性蛋白質(zhì)分子量大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜,如果直接將豆粕用于飼養(yǎng)動(dòng)物,豆粕中的蛋白質(zhì)被吸收利用的百分率不高,這樣就造成豆粕資源的大量浪費(fèi),從而提高了飼養(yǎng)成本。
　　 根據(jù)多年來利用酶解法制備豆粕飼料的實(shí)際生產(chǎn)情況可知酶解法存在的限制因素也很多,主要是用于酶解法的

2、酶的種類少,這樣就大大限制了豆粕飼料業(yè)的發(fā)展；另外,由于用于水解反應(yīng)的蛋白酶的種類少,這樣就不能很好的降解大豆蛋白,使制取的大豆肽苦味不能根本脫除,從而影響飼料口感,進(jìn)行動(dòng)物飼養(yǎng)時(shí)導(dǎo)致被飼養(yǎng)動(dòng)物攝食量大大降低。與酶解法相比,微生物發(fā)酵法具有縮短發(fā)酵周期,降低豆粕飼料的生產(chǎn)成本等優(yōu)點(diǎn),具有廣闊的發(fā)展前景。固態(tài)發(fā)酵法可以實(shí)現(xiàn)更大規(guī)模生產(chǎn),制備豆粕飼料的生產(chǎn)成本明顯降低；固態(tài)發(fā)酵過程中基本無對(duì)環(huán)境造成污染的廢物產(chǎn)生。因此,固態(tài)發(fā)酵法在飼料加工

3、業(yè)中將占據(jù)越來越重要的位置。
　　 枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵豆粕已從蛋白酶活角度進(jìn)行過研究,未見既從蛋白酶活又從肽轉(zhuǎn)化率角度利用枯草芽孢桿菌固態(tài)發(fā)酵豆粕的更深層次研究。根據(jù)枯草芽孢桿菌及曲霉在發(fā)酵過程中分泌蛋白酶的情況,為從更多位點(diǎn)將大豆蛋白更好的水解,進(jìn)一步提高豆粕飼料的肽轉(zhuǎn)化率,本文對(duì)枯草芽孢桿菌與黑曲霉或米曲霉混合發(fā)酵豆粕制備豆粕飼料從蛋白酶活及肽轉(zhuǎn)化率兩個(gè)角度進(jìn)行了深入探討,以期得到肽轉(zhuǎn)化率更高、營養(yǎng)更豐富的豆粕飼料。主要進(jìn)

4、行了以下三方面的研究:
　　 (1)枯草芽孢桿菌1389、米曲霉3.042、黑曲霉3.350以及枯草芽孢桿菌1389分別與米曲霉3.042、黑曲霉3.350混合固態(tài)發(fā)酵制備豆粕飼料的動(dòng)態(tài)發(fā)酵過程中蛋白酶酶活和大豆肽轉(zhuǎn)化率等指標(biāo)的測(cè)定。
　　 (2)通過對(duì)動(dòng)態(tài)發(fā)酵結(jié)果的分析確定單因素條件,進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。
　　 (3)進(jìn)行正交試驗(yàn)對(duì)發(fā)酵條件進(jìn)行優(yōu)化。
　　 動(dòng)態(tài)發(fā)酵過程中蛋白酶活及大豆肽轉(zhuǎn)化率的變化如下:<

5、br>　　 ①枯草芽孢桿菌1389與米曲霉3.042混合發(fā)酵的蛋白酶酶活:48-72h蛋白酶酶活逐漸上升,并在72h達(dá)到最大值,以后蛋白酶酶活開始下降,最大值大約在690U/g?？莶菅挎邨U菌1389與黑曲霉3.350混合發(fā)酵的蛋白酶酶活:48-84h蛋白酶酶活逐漸上升,并在84h達(dá)到最大值,以后蛋白酶酶活開始下降,最大值大約在400U/g。
　　 ②枯草芽孢桿菌1389與米曲霉3.042混合發(fā)酵的肽轉(zhuǎn)化率:48-72h肽轉(zhuǎn)化率

6、逐漸上升,并在72h達(dá)到最大值,以后肽轉(zhuǎn)化率開始下降,并趨于平衡?？莶菅挎邨U菌1389與黑曲霉3.350混合發(fā)酵的肽轉(zhuǎn)化率:48h-86h肽轉(zhuǎn)化率逐漸上升,并在86h達(dá)到最大值,以后肽轉(zhuǎn)化率開始下降。
　　 在動(dòng)態(tài)研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn),再通過正交試驗(yàn),并以肽轉(zhuǎn)化率和蛋白酶酶活為指標(biāo)確定最佳發(fā)酵工藝條件,即:
　　 ①枯草芽孢桿菌1389與米曲霉3.042混合發(fā)酵制備豆粕飼料的最佳發(fā)酵條件:接種時(shí)間差6h、發(fā)酵溫度3

7、0℃、培養(yǎng)基含水量64％、菌種混合比例1:1,發(fā)酵時(shí)間72h。在此條件下測(cè)得發(fā)酵豆粕的蛋白酶酶活值在980U/g左右,大豆肽轉(zhuǎn)化率在50％左右。比單菌種發(fā)酵的要好。
　　 ②枯草芽孢桿菌1389與黑曲霉3.350混合發(fā)酵豆粕制備豆粕飼料的最佳發(fā)酵條件:接種時(shí)間差6h、發(fā)酵溫度30℃、培養(yǎng)基含水量64％、菌種混合比例為1:2,發(fā)酵時(shí)間86h。在此條件下測(cè)得發(fā)酵豆粕的蛋白酶酶活值為390U/g左右,大豆肽轉(zhuǎn)化率為45％左右。比單菌種