甘藍型油菜新型黃籽種質資源創(chuàng)新與鑒定.pdf

1、甘藍型油菜是我國油菜主要栽培品種，但其作為異源雙二倍體種起源發(fā)生的歷史較短，遺傳背景也較狹窄，加之我國甘藍型油菜引自國外，遺傳基礎更為單一，開展甘藍型油菜種質資源創(chuàng)新工作顯得十分必要。
　　 甘藍型油菜沒有天然的黃籽種質資源，目前培育出的黃籽甘藍型油菜均來自蕓苔屬內種間雜交，還未見通過屬間雜交獲得黃籽甘藍型油菜的報道，且現(xiàn)有的甘藍型油菜黃籽性狀有一個共同特點，它們的種皮色澤既不象白菜型油菜那樣呈鮮黃色，也不象芥菜型油菜那樣呈橙黃

2、色，而是姜黃或土黃色，并且種皮上有黑色的斑點、斑塊和褐色的環(huán)狀帶紋。同時種皮色澤的遺傳不穩(wěn)定，長期自交不能純合，仍有少數(shù)單株出現(xiàn)黑籽，育種上應用較為困難。因此，開展甘藍型油菜黃籽種質資源創(chuàng)新工作，對拓寬甘藍型油菜黃籽性狀遺傳基礎，豐富黃籽遺傳資源，具有非常重要的意義。
　　 遠緣雜交可以把不同種間、屬間甚至親緣關系更遠的物種進行雜交，突破種屬界限，擴大遺傳變異，從而創(chuàng)造新的變異類型或新物種，是種質資源創(chuàng)新的重要手段；同時所獲得的

3、雜種不存在生物安全性問題，可直接應用于育種和生產(chǎn)。本研究以白芥和甘藍型油菜屬間雜種為基礎材料，通過不斷回交獲得包括黃籽性狀在內的大量甘藍型油菜新種質，并對新型黃籽新種質進行較為深入的研究和鑒定工作，為在育種中的應用奠定基礎。本研究取得的主要研究結果如下：
　　 1、通過對白芥和甘藍型油菜原生質體融合后代不斷回交，獲得多個具有白芥優(yōu)良性狀和變異類型的后代，如結角密度高、黃籽和抗病等優(yōu)良性狀，同時部分后代也表現(xiàn)出長角果、多籽粒等變異

4、類型。這些后代的獲得，為豐富油菜種質資源提供了可能，并為培育高產(chǎn)、優(yōu)質和抗病油菜新品種提供豐富的育種材料。同時，本試驗首次通過屬間雜交，獲得新的黃籽甘藍型油菜新種質，為研究黃籽性狀的分子機理以及獲得色澤穩(wěn)定、純合的黃籽性狀提供了可能。
　　 2、通過對獲得的黃籽新種質種子解剖學比較觀察發(fā)現(xiàn)，所獲的回交后代黃籽株系的種子解剖結構基本上與甘藍型油菜相似，但也表現(xiàn)出黃籽親本(白芥)的部分特征。如種皮色澤主要分布在柵欄層，甘藍型油菜和部

5、分后代株系中有色澤分布，而白芥和部分黃籽后代株系中沒有色澤分布。柵欄層在甘藍型油菜中最厚，在白芥中最薄，而后代株系介于兩者之間。回交后代株系和甘藍型油菜種皮表面紋飾為網(wǎng)-穴狀，白芥為溝槽狀或水皰狀?；亟缓蟠晗蹬咦尤~細胞面積和蛋白體面積指數(shù)介于兩親本之間，油體有大、小兩種，其大小在親本和后代間存在差異。說明白芥外源染色體或染色體片段的導入，改變了回交后代株系種子結構性狀。
　　 3、用白芥基因組作探針，對回交后代減數(shù)分裂進行GI

6、SH分析，結果發(fā)現(xiàn)，甘藍型油菜的染色體在回交各個世代中均能正常配對和分離，而白芥染色體多以單價體形式存在，部分白芥染色體會與甘藍型油菜染色體形成三價體，在雜種后代減數(shù)分裂過程中可能會發(fā)生白芥與甘藍型油菜的染色體重組，為易位系的產(chǎn)生奠定了基礎。BC3F1黃籽材料根尖細胞和減數(shù)分裂細胞進行GISH結果顯示，獲得的黃籽材料染色體數(shù)目與正常甘藍型油菜相同，且未獲得雜交信號，排除獲得的黃籽材料是異附加系或置換系的可能性。微衛(wèi)星核心序列引物33.6

7、擴增結果證明，在黃籽后代的基因組中存在與白芥相同的特異序列。TT2-2引物及根據(jù)TT2-2擴增特異產(chǎn)物測序結果設計的引物Sal在白芥和黃籽后代中擴增的特異產(chǎn)物一致性，進一步確定了黃籽后代中具有白芥的DNA序列，結合細胞學鑒定結果，可以確認獲得的黃籽回交后代株系是帶有白芥DNA序列的易位系。同時獲得黃籽特異性分子標記Sal，為分子標記輔助育種奠定了基礎。
　　 4、通過對6個黃籽回交后代株系的農藝性狀、產(chǎn)量性狀、品質性狀及抗病性分