馬鈴薯晚疫病菌的表現(xiàn)型與基因型的研究.pdf

1、2006-2008年在黑龍江省和吉林省共分離獲得130株馬鈴薯晚疫病菌，并測(cè)定了晚疫病菌的交配型分布和對(duì)瑞毒霉、烯酰嗎啉、韓樂威和氟啶胺的敏感性。交配型測(cè)定結(jié)果顯示在吉林省和黑龍江省分離的所有菌株均為A1交配型。瑞毒霉測(cè)定結(jié)果顯示2006年分離的菌株中抗性菌株占94.4％，中抗菌株占5.6％；2007年分離的菌株中抗性菌株占45.9％，中抗菌株占33.3％，敏感性菌株占20.8％；2008年分離的菌株中抗性菌株占81.4％，中抗菌株占2

2、.9％，敏感性菌株占15.7％。這說明吉林省和黑龍江省發(fā)生的晚疫病菌已對(duì)瑞毒霉產(chǎn)生抗藥性。對(duì)于烯酰嗎啉，大多數(shù)菌株能在0.5μg/mL培養(yǎng)基上生長，但在1.0μg/mL上生長的只有2個(gè)菌株，表明烯酰嗎啉的最低抑制濃度是0.5-1.0μg/mL。這說明在黑龍江省和吉林省馬鈴薯田間還未產(chǎn)生烯酰嗎啉的抗藥性。對(duì)于韓樂威未發(fā)現(xiàn)能在1.0μg/mL的濃度生長的菌株，只有1株菌株能在0.5μg/mL上生長，表明韓樂威的最低抑制濃度是0.2-0.5μ

3、g/mL。
　　 氟啶胺敏感性測(cè)定結(jié)果表明，不同地區(qū)、不同年份分離的馬鈴薯晚疫病菌對(duì)氟啶胺的敏感性無顯著差異，其敏感性呈連續(xù)的單峰曲線分布，EC50值在0.2033～0.7837μg/mL之間，最不敏感菌株的EC50是最敏感菌株的3.85倍，平均值為0.4781±0.0163μg/mL，未出現(xiàn)敏感性下降的抗藥性群體，因此可作為馬鈴薯晚疫病菌對(duì)氟啶胺的敏感性基線。測(cè)定殺菌劑對(duì)馬鈴薯晚疫病的盆栽防治試驗(yàn)結(jié)果表明，氟啶胺WP、氟啶胺S

4、C和烯酰嗎啉能很好地控制晚疫病，防治效果分別為85.7％、87.1％、82.2％，而瑞毒霉的為23.9％。測(cè)定殺菌劑對(duì)馬鈴薯晚疫病的田間防治試驗(yàn)結(jié)果表明，氟啶胺WP、氟啶胺SC和烯酰嗎啉能很好地控制晚疫病，防治效果分別為75.9％、79.9％、74.6％，而瑞毒霉的為41.0％。這說明瑞毒霉與其他三種殺菌劑之間沒有產(chǎn)生交互抗性。
　　 本研究利用同工酶基因型、線粒體DNA單倍型和RAPD標(biāo)記測(cè)定了馬鈴薯晚疫病菌的遺傳多樣性。對(duì)于

5、馬鈴薯晚疫病菌的同工酶基因型分析，發(fā)現(xiàn)Gpi和Pep同工酶基因型為100/100、96/96，100/100、96/100和100/100、100/100三種類型，分別占被測(cè)菌株的2.4％、0.8％和96.8％，其中100/100、100/100同工酶基因型是吉林省和黑龍江省發(fā)生的主導(dǎo)同工酶基因型。對(duì)于線粒體DNA單倍型，除3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌株（DN3085菌系：Ⅰb）外，黑龍江省和吉林省分離的菌株被測(cè)定為兩種線粒體DNA基因型（Ⅰ a和Ⅱa）

6、。其中，Ⅰ a基因型占8.1％（8）和Ⅱa基因型占91.9％（91）。
　　 利用17個(gè)不同表現(xiàn)型菌株基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，篩選出6個(gè)引物，共擴(kuò)增出129個(gè)條帶，其中90個(gè)條帶是差異性片段。在被測(cè)定的104個(gè)馬鈴薯晚疫病菌中由OPD-20引物擴(kuò)增后產(chǎn)生的各個(gè)組群間相似性系數(shù)分布在0.74～1.00。RAPD分析結(jié)果顯示在90.8％相似性水平上可劃分為2個(gè)主要RAPD組群和8個(gè)次要RAPD組群。RAPD分析結(jié)果顯示RAPD組