山慈姑(獨蒜蘭)種子無菌萌發(fā)與植株再生.pdf

1、蘭科植物獨蒜蘭[Pleione bulbocodioides(Franch.)Rolfe]是生藥山慈姑的基原植物，為常用中藥，其假鱗莖具有清熱化痰、解毒、消癰散結的作用。由于資源有限，加之近年來的過度開采，野生資源已臨枯竭而成瀕危物種。山慈姑(獨蒜蘭)種子數目眾多，且種子是一團未分化的胚細胞，由于種子難透水、難透氣、胚乳發(fā)育不完全等原因，在自然條件下幾乎不萌發(fā)。本實驗以山慈姑(獨蒜蘭)種子作為外植體，通過設計不同培養(yǎng)基組合來誘導種子高頻

2、率萌發(fā)，獲得大量種子苗。在此基礎上，利用組織培養(yǎng)方法對種子萌發(fā)出的原始球莖進行切割、擴繁，誘導產生愈傷組織和不定芽，以期獲得大量試管苗。
　　 通過設計不同基本培養(yǎng)基、不同蔗糖濃度、不同活性炭濃度以及不同激素濃度等196種培養(yǎng)基處理對山慈姑種子無菌萌發(fā)的影響發(fā)現(xiàn)，MS基本培養(yǎng)基、1.0％的蔗糖、0.5％的活性炭這3種處理中萌發(fā)率較高，說明它們是山慈姑種子萌發(fā)較適的基本培養(yǎng)條件。激素實驗中，只添加1.5mg/ⅡAA的萌發(fā)效果最好，

3、萌發(fā)率為6.5％，且ⅠAA單激素處理的種子萌發(fā)率整體較高，不僅誘導出原始球莖數量多，而且較大。添加了激素NAA的培養(yǎng)基較適宜山慈姑種子苗的生根。通過形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn)，山慈姑種胚從突破種皮到形成原始球莖，最終發(fā)育成為完整植株這一過程具有一定的規(guī)律性。
　　 本實驗還對種子萌發(fā)得到的原始球莖進行愈傷組織與不定芽的誘導。通過對激素濃度、生長素種類、分裂素種類、活性炭濃度、蔗糖濃度等5種因素進行正交設計，得到8種不同成分培養(yǎng)基。通過對出愈