粗肋草的離體培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)的研究.pdf

1、本論文研究了粗肋草兩個(gè)品種的離體培養(yǎng)和快速繁殖技術(shù)。主要從外植體的選擇與消毒滅菌、愈傷組織的誘導(dǎo)、愈傷組織分化、叢生芽的誘導(dǎo)、叢生芽的增殖、試管苗的生根與移栽等方面進(jìn)行研究，并探討影響各技術(shù)環(huán)節(jié)的相關(guān)因素。主要結(jié)果如下：
　　 1、復(fù)合滅菌劑配合使用的滅菌效果優(yōu)于單一滅菌劑，粗肋草葉片、花苞和葉柄較適宜的滅菌處理為：10％NaClO5min+0.1％HgCl210min；黑美人帶腋芽的莖段較適宜的滅菌處理為：10％NaClO8m

2、in+0.1％HgCl220min，銀皇后帶腋芽莖段較適宜的滅菌處理為：10％NaClO8min+0.1％HgCl222min。
　　 2、以兩個(gè)品種的葉片、花苞和葉柄為外植體，研究不同因素對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響，包括基本培養(yǎng)基類型、光照條件、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和C源等。五種基本培養(yǎng)基對(duì)粗肋草愈傷組織誘導(dǎo)的效果：1/2MS>MS>N6>B5>White。對(duì)接種后的葉片、花苞、葉柄暗培養(yǎng)10d再進(jìn)行光照培養(yǎng)，可提高愈傷組織誘導(dǎo)率。三種不

3、同C源對(duì)愈傷組織的誘導(dǎo)效果：蔗糖>葡萄糖>麥芽糖。愈傷組織誘導(dǎo)適宜培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L，在此培養(yǎng)基中兩個(gè)品種三個(gè)不同部位的外植體愈傷組織誘導(dǎo)率均達(dá)到最高。三個(gè)不同部位的誘導(dǎo)率存在差異，葉柄>花苞>葉片。
　　 3、粗肋草葉片、花苞誘導(dǎo)出的愈傷組織未分化出不定芽，葉柄誘導(dǎo)的愈傷組織在1/2MS+6-BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.1mg/L培養(yǎng)基上能分化出不定芽，但誘導(dǎo)

4、分化率卻極低。
　　 4、采用水平放置的接種方式較適宜帶側(cè)芽的莖段叢生芽的誘導(dǎo)：黑美人莖段叢生芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.1mg/L，在此處理中誘導(dǎo)率為91.24％，平均生成芽數(shù)7.65個(gè)。銀皇后莖段叢生芽誘導(dǎo)最佳培養(yǎng)基為：MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.15mg/L，此處理中的誘導(dǎo)率為88.84％，平均生成芽數(shù)6.69個(gè)。兩品種葉片、花苞和葉柄誘導(dǎo)出的愈傷組織較難分化成苗，帶側(cè)芽的莖段在

5、誘導(dǎo)培養(yǎng)基上較易誘導(dǎo)出叢生芽，這說(shuō)明粗肋草的增殖方式是以帶側(cè)芽的莖段萌發(fā)形成不定芽然后誘導(dǎo)形成叢生芽為主。
　　 5、三種基本培養(yǎng)基對(duì)粗肋草叢生芽的增殖效果以MS最佳，Miller次之，White最差。黑美人的芽增殖倍數(shù)在這三類培養(yǎng)基中依次為：4.68、2.27、2.02；銀皇后的芽增殖倍數(shù)依次為：3.86、2.19、1.90。
　　 6、黑美人叢生芽增殖的適宜培養(yǎng)基為：MS+6-BA3.0mg/L+KT2.0mg/L+

6、NAA0.05mg/L，增殖倍數(shù)為5.87；銀皇后叢生芽增殖適宜的培養(yǎng)基為：MS+6-BA3.5mg/L+KT1.5mg/L+NAA0.05mg/L，增殖倍數(shù)為4.65。
　　 7、不同細(xì)胞分裂素種類對(duì)粗肋草芽增殖和壯苗的效果不同。KT在壯苗方面起主要作用；6-BA在芽增殖方面起主要作用。
　　 8、黑美人在第五代達(dá)到最大增殖倍數(shù)6.43倍，銀皇后在第四代達(dá)到最大增殖倍數(shù)5.36倍。芽增殖倍數(shù)比較：黑美人>銀皇后。

7、>　　 9、基本培養(yǎng)基1/2MS比MS更利于粗肋草的生根。
　　 10、生長(zhǎng)激素NAA、IBA濃度均以0.2mg/L時(shí)，適宜黑美人的生根培養(yǎng)；生長(zhǎng)激素NAA、IBA濃度均以0.3mg/L時(shí)，適宜銀皇后的生根培養(yǎng)。兩種生長(zhǎng)激素比較，在相同濃度條件下NAA的生根效果優(yōu)于IBA。
　　 11、單一基質(zhì)比較：泥炭>木屑>菜園土>細(xì)沙>黃泥，黑美人品種在泥炭中的成活率為92.57％，銀皇后為90.02％。復(fù)合基質(zhì)效果優(yōu)于單一基質(zhì)