李離體繁殖及再生體系的建立.pdf

1、本文以中國(guó)李品種大石早生李(Prunus salicina Lindl.‘Oshiwase’)、小黃李(Prunussalicina Lindl.‘Xiaohuangli’)和歐洲李品種大玫瑰(Prunus domesticaL.‘Grand Rose’)為試材，建立了穩(wěn)定高效的李離體快繁技術(shù)體系，并在此基礎(chǔ)上，研究了不同因子對(duì)小黃李再生不定芽的影響，以期建立高效的李再生技術(shù)體系，為李遺傳轉(zhuǎn)化研究和創(chuàng)新種質(zhì)資源奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下：

2、 1.以中國(guó)李品種大石早生李為試材，通過外植體消毒試驗(yàn)，結(jié)果表明4—5月為最佳取材時(shí)期，此時(shí)外植體正處于春季萌發(fā)生長(zhǎng)階段，帶菌較少，成活率高，易誘導(dǎo)成苗。此時(shí)期外植體采用70％酒精30s+(0.5％NaClO+吐溫-202—3滴)12min消毒效果較好。其較適合的繼代增殖培養(yǎng)基配方為：F14+0.6～0.8 mg.L-16-BA+0.1～0.2mg.L-1NAA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1瓊脂，增殖倍數(shù)達(dá)6.0；較適合生

3、根的培養(yǎng)基為：1/2MS+0.2 mg.L-1NAA+0.1 mg.L-1IBA，生根率66.7％；馴化基質(zhì)：石：珍珠巖：泥炭(1:1：1)，成活率皆在65％以上。 2.以小黃李的單芽莖段為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)，研究不同培養(yǎng)基，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類及其濃度、pH值對(duì)小黃李增殖與生根的影響。結(jié)果表明：較合適的增殖培養(yǎng)基為F14+0.8 mg.L-16-BA+0.2 mg.L-1NAA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1瓊脂，pH值

4、5.4-5.8之間；較合適的生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.1 mg.L-INAA+0.2 mg.L.1IBA+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1瓊脂，生根率達(dá)100％，單株平均根數(shù)3～4根，且植株生長(zhǎng)健壯；以蛭石：珍珠巖：泥炭(1:1：1)移栽生根苗，成活率80％以上，為工廠化育苗生產(chǎn)奠定了基礎(chǔ)。 3.以歐洲李品種大玫瑰為試材，篩選出其較適合的繼代增殖培養(yǎng)基配方：1/2MS+0.5 mg.L-16-BA+0.1 mg.L-1NA

5、A+0.5 mg.L-1 GA3+30 g.L-1蔗糖+6 g.L-1瓊脂，增殖倍數(shù)達(dá)6.5；較適合生根的培養(yǎng)基：1/2MS+0.2 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IBA，生根率達(dá)79.8％。 4.以中國(guó)李品種小黃李為試材，研究不同基本培養(yǎng)基種類，植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的種類及濃度、暗處理時(shí)間對(duì)其不定芽再生率的影響.試驗(yàn)結(jié)果表明：葉片、普通莖段、白化莖段三種外植體的最適合再生的基本培養(yǎng)基均為WPM培養(yǎng)基，最佳濃度配比為WPM+

6、1.5 mg.L-16-BA+0.8 mg.L-1 IBA+30 g.L-1蔗糖+6.0 g.L-1瓊脂；6-BA的誘導(dǎo)葉片再生效果優(yōu)于TDZ，其再生的最佳暗處理時(shí)間為21d。 5.三種外植體中，葉片再生率最高，達(dá)66.35％，但再生芽苗不能存活，主要表現(xiàn)為褐化致死，且不同抗氧化劑處理改善褐化現(xiàn)象不明顯；其次為白化莖段，普通莖段最差，最高再生頻率分別為30.42％，18.57％。但以白化莖段為外植體的再生芽苗生長(zhǎng)正常，存活率10