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文檔簡介
1、仔豬腹瀉是目前嚴重危害我國養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展的主要疾病,引起仔豬腹瀉的病毒源主要是豬傳染性胃腸炎病毒(Poorcine transmissibLe gastroenteritis,TGEV)、豬流行性腹瀉病毒(Poricine epidemic diarrhoea,PEDV)和輪狀病毒(Rotavirus,RV)。通過本實驗制備抗仔豬病毒性腹瀉的高免全蛋粉和明膠.海藻酸-IgY微膠囊發(fā)揮被動免疫作用,對該病進行預(yù)防及治療。
1、采
2、用豬流行性腹瀉、傳染性胃腸炎、輪狀病毒油乳苗(以下簡稱‘三聯(lián)苗’)與不同的佐劑混合免疫雞群的方法。間接ELISA檢測結(jié)果:佐劑中添加胸腺肽免疫組免疫效果明顯優(yōu)于僅用油佐劑免疫組,其產(chǎn)生的IgY效價高且持續(xù)時間長。先用弱毒苗做基礎(chǔ)免疫,再用油佐劑苗加強免疫效果明顯優(yōu)于僅用油佐劑苗免疫組。因此,以弱毒苗進行基礎(chǔ)免疫,再用胸腺肽油佐劑苗進行加強免疫是制備IgY的最佳方法。
2、利用噴霧干燥技術(shù)制備微膠囊及高免全蛋粉,通過對噴霧干
3、燥工藝條件的優(yōu)化,獲得制備微膠囊最佳工藝為:進風溫度170℃、進料速度10 mL/min、干燥速度lOs、出口溫度70℃;制備高免全蛋粉最佳工藝為:進風溫度180℃、進料速度10mL/min、干燥速度5s、出口溫度70℃,在上述條件下制備微膠囊及高免全蛋粉,性狀最好且IgY活性保持較高水平。
為保護IgY口服時不受酸、堿及胃蛋白酶的破壞,本試驗選用天然材料明膠和海藻酸鈉作為壁材,按上述篩選噴霧干燥的最佳工藝,研究制各明膠.
4、海藻酸鈉-IgY微膠囊的成囊條件。經(jīng)篩選優(yōu)化確定微膠囊成囊的最佳條件為:明膠濃度4%,海藻酸鈉0.75%,Tween-801%,成囊溶液pH值4.0。以此條件制備微膠囊的包封率為75%,IgY活性保持在80%以上。通過人工胃腸液的體外釋放試驗表明,微膠囊在人工胃液2h的釋放率不超過10%,人工腸液4h的釋放率達到超過80%。采用間接ELISA方法和SDS-PAGE電泳對微膠囊中IgY結(jié)構(gòu)和活性進行檢測,結(jié)果顯示,微膠囊通過人工胃液再進入
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