南川百合組織培養(yǎng)與快繁技術(shù)研究.pdf

1、為了加快南川百合的繁殖速度,縮短其生育周期,從而保存南川百合優(yōu)良的種質(zhì)和性狀,保護(hù)百合科生物多樣性,本試驗(yàn)以南川百合(Lilium rosthornii Diels)的鱗片、葉片、莖段、花器官、不定芽葉片和再生小鱗莖的鱗片為外植體,接種在附加不同濃度及組合的6-BA、NAA的培養(yǎng)基中進(jìn)行離體組織培養(yǎng),研究了影響南川百合組培快繁的主要因子,重點(diǎn)探索了南川百合組織培養(yǎng)的最佳外植體材料、培養(yǎng)基種類和培養(yǎng)方法,以期獲得南川百合組織培養(yǎng)的一套較為

2、完整的再生體系。結(jié)果表明:
　　 1.以南川百合的鱗片、葉片、莖段、花器官、不定芽葉片和再生小鱗莖的鱗片作為外植體,結(jié)果表明:鱗片、葉片和莖段的污染率較高,出愈率低;花器官的子房和花托分生能力強(qiáng),誘導(dǎo)分化率高,出芽數(shù)量多,誘導(dǎo)效果花托好于子房,花器官其它部位死亡率較高;不定芽的葉片和再生小鱗莖的鱗片沒有被污染,數(shù)量多,基數(shù)較大,增殖速度快。因此花托、不定芽葉片和再生小鱗莖的鱗片為南川百合的最佳組織培養(yǎng)外植體。
　　 2.

3、初代培養(yǎng)中,以實(shí)生苗鱗片為外植體,最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.5mg/L(培養(yǎng)基中附加白砂糖30g/L,瓊脂7g/L,下同)此時(shí)分化率為82.33%,分化系數(shù)為3.33;以實(shí)生苗莖段為外植體,最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L斗.NAA1.0mg/L,此時(shí)分化率為58.67%,分化系數(shù)為3.19;以花托為外植體,最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.2mg/L,此時(shí)分化率為93.3

4、3%,分化系數(shù)為3.4:以再生苗葉片為外植體,最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,此時(shí)分化率為54.33%,芽分化系數(shù)為2.9;以再生小鱗莖的鱗片為外植體,最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,此時(shí)分化率為100.00%,芽分化系數(shù)2.5。3.在增殖培養(yǎng)階段,細(xì)胞分裂素對增殖系數(shù)作用明顯,生長素對葉片的生長與分化有重要影響。增殖培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+

5、NAA0.05mg/L,此時(shí)的增殖系數(shù)達(dá)到3.1,產(chǎn)生的愈傷組織比較多,且繼續(xù)分化出不定芽的潛力大,形成的不定芽苗高均勻,球莖膨大也顯著。
　　 4.低濃度的無機(jī)鹽離子有利于南川百合的生根,本試驗(yàn)選用1/2MS培養(yǎng)基。NAA對南川百合生根的誘導(dǎo)效果要比IAA好,其應(yīng)用的最佳濃度為0.5mg/L;最適宜南川百合生根的糖濃度為40g/L;對南川百合生根最佳的活性炭濃度為1.0g/L;10.0mg/L的多效唑可起到矮化壯苗的作用,生根

6、率為86.67%,平均根數(shù)5.2,此時(shí)根系發(fā)達(dá),葉片濃綠肥厚,為下一步不定芽移栽成活打下了基礎(chǔ)。綜合考慮影響生根的各項(xiàng)因素,得到南川百合生根的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.5mg/L+10.0mg/LPP333+40g/L糖。
　　 5.培養(yǎng)基中糖濃度對南川百合球莖的膨大有一定的影響。本試驗(yàn)的研究結(jié)果表明,30～80g/L的糖濃度對小鱗莖的膨大有較好的作用,在此范圍內(nèi)小鱗莖的直徑、重量會(huì)隨著糖濃度的增大而增大。培養(yǎng)基中糖濃度