馬郁蘭離體微繁技術(shù)研究.pdf

1、本研究以唇形科芳香植物馬郁蘭為材料，通過(guò)對(duì)滅菌時(shí)間、外源激素種類和煉苗移栽環(huán)境的篩選，觀察馬郁蘭在初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)和煉苗移栽階段的生長(zhǎng)狀況，研究了馬郁蘭繼代培養(yǎng)過(guò)程中內(nèi)源激素（IAA、ZRs、iPAs）和酶活性（POD、PAL、蛋白酶）的變化特征，建立了一套快速、高效、穩(wěn)定的馬郁蘭快速繁殖技術(shù)，試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　 (1)滅菌時(shí)間篩選
　　 0.10％升汞滅菌時(shí)間為6min時(shí)效果最好，污染率為僅為5.76％，

2、褐化率為4.17％。
　　 (2)初代培養(yǎng)基篩選
　　 初代培養(yǎng)基篩選中，不定芽分裂數(shù)和不定芽生長(zhǎng)狀況作為觀察指標(biāo)，以生長(zhǎng)素IBA濃度為0.05mg/L篩選細(xì)胞分裂素(6-BA、TDZ、6-BA+KT)種類和濃度，結(jié)果表明：細(xì)胞分裂素以6-BA最佳，濃度為3.00mg/L時(shí)不定芽分裂數(shù)達(dá)到5.00,并且葉色正常呈灰綠色，節(jié)距短。以6-BA濃度為3.00mg/L篩選生長(zhǎng)素(IBA、NAA、2，4-D、IBA+NAA)種類和

3、濃度，結(jié)果表明：生長(zhǎng)素以IBA誘導(dǎo)不定芽效果最好，當(dāng)濃度為0.10mg/L時(shí)不定芽分裂數(shù)可達(dá)5.55，葉呈灰綠色，節(jié)距長(zhǎng)。
　　 (3)繼代培養(yǎng)基篩選
　　 繼代培養(yǎng)基的選擇根據(jù)初代培養(yǎng)基不定芽分裂數(shù)和生長(zhǎng)狀況，以6-BA作為細(xì)胞分裂素，濃度為3.00mg/L，選擇IBA作為生長(zhǎng)素，結(jié)果表明：當(dāng)IBA濃度為0.10mg/L時(shí)，不定芽分裂數(shù)較其他處理多，可達(dá)5.55，葉色正常呈灰綠色。
　　 (4)生根培養(yǎng)基篩選<

4、br>　　 對(duì)馬郁蘭生根培養(yǎng)研究表明：以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，NAA濃度為0.10mg/L時(shí)生根率可達(dá)97.62％，根系粗壯，根長(zhǎng)較長(zhǎng)。
　　 (5)煉苗移栽階段不同基質(zhì)和遮光度篩選
　　 對(duì)不同基質(zhì)和遮光度研究表明：在遮光度為95％，珍珠巖：蛭石的比例為1：2的條件下存活率可達(dá)92.86％。
　　 (6)馬郁蘭離體微繁技術(shù)流程
　　 最佳0.10％升汞滅菌時(shí)間為6min，最適初代培養(yǎng)基和繼代培

5、養(yǎng)基以6-BA3.00mg/L+IBA0.10mg/L的MS培養(yǎng)基，生根培養(yǎng)基為添加0.10mg/LNAA的1/2MS培養(yǎng)基，移栽煉苗階段以遮光度95％條件下，珍珠巖：蛭石的比例1:2時(shí)存活率最高。
　　 (7)繼代培養(yǎng)過(guò)程中內(nèi)源激素研究
　　 通過(guò)對(duì)繼代培養(yǎng)過(guò)程中IAA、iPAs和ZRs三種內(nèi)源激素的研究，結(jié)果表明：IBA濃度為0.05、0.10、0.15mg/L三個(gè)處理，三種內(nèi)源激素的變化趨勢(shì)是一致的，即呈先增加后減

6、少的趨勢(shì)，IAA和iPAs在7d的時(shí)候達(dá)到峰值，ZRs在14d達(dá)到峰值，而IBA為0.00mg/L的處理變化趨勢(shì)與其余三個(gè)處理不一致。
　　 (8)繼代培養(yǎng)過(guò)程中酶活性研究
　　 通過(guò)對(duì)繼代培養(yǎng)過(guò)程中過(guò)氧化物酶(POD)、苯丙氨酸裂解酶(PAL)和蛋白酶的研究，結(jié)果表明：IBA濃度為0.05mg/L和0.10mg/L兩個(gè)處理POD和PAL都呈先增加后較少的趨勢(shì)，在14d達(dá)到峰值，其余兩個(gè)處理變化趨勢(shì)不一致。蛋白酶活性的變