多花水仙離體快繁技術研究及WD40基因表達分析.pdf

1、多花水仙為石蒜科(Amaryllidaceae)水仙屬（Narcissus L.）多年生球根類花卉，具有較高的經(jīng)濟和觀賞價值。長期的無性繁殖，大大限制了其繁殖速度且容易造成病毒積累，致使品種退化，抗性減弱。因此，提高多花水仙的抗性，加快其優(yōu)質脫毒種苗的生產(chǎn)和優(yōu)質新品種的推廣，對于多花水仙持續(xù)發(fā)展至關重要。本研究以‘云香水仙’和白花Ⅱ水仙鱗莖為材料，研究了不同培養(yǎng)基對兩個水仙品種離體培養(yǎng)的影響，篩選出適宜的培養(yǎng)基，為水仙脫毒種苗的生產(chǎn)、種

2、質資源的保存和新品種的推廣應用提供理論支持和技術指導，也為水仙品種改良充實基礎資料。同時，本研究從福建農(nóng)林大學園藝學院遺傳育種研究所獲得的‘云香水仙’轉錄組中篩選了與抗性有關的WD40基因片段，克隆了開放閱讀框，并分析了該基因在非生物脅迫下的表達，以期為水仙品種改良提供參考。主要研究結果如下：
　　1.本試驗探索了‘云香水仙’和白花Ⅱ水仙的外植體消毒方法和較適培養(yǎng)基，‘云香水仙’和白花Ⅱ水仙鱗莖盤消毒處理分別以25％的次氯酸鈉溶液

3、浸泡30 min和25 min為好；‘云香水仙’小鱗莖誘導最佳培養(yǎng)基：MS+1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L2,4-D，白花Ⅱ水仙不定芽誘導最佳培養(yǎng)基：MS+0.5 mg/L6-BA+0.1 mg/L2,4-D；‘云香水仙’和白花Ⅱ水仙愈傷組織分化的最佳培養(yǎng)基分別為MS+5.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA和MS+3.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA；‘云香水仙’和白花Ⅱ水仙繼代的最佳培養(yǎng)基：MS+

4、1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L2,4-D；‘云香水仙’和白花Ⅱ水仙最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.05 mg/L IBA+0.1mg/L NAA?！葡闼伞桶谆á蛩呻x體再生體系的建立為轉基因育種、原種保存、種質資源保存及新品種推廣提供技術支持。
　　2.通過RT-PCR技術獲得了‘云香水仙’WD40基因（GenBank登錄號：KU193745），并通過生物信息學手段及軟件，對其結構特征進行了分析，并進行了功能預