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文檔簡介
1、隨著人工授精技術(shù)的快速發(fā)展,精液冷凍保存技術(shù)也不斷得以完善。但是在冷凍保存及解凍過程中,由于諸多因素的存在,解凍后的牛精子的活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率與鮮精相比仍然會大幅度降低,精子受精能力也會大幅度減弱。導(dǎo)致這一問題的原因不僅僅與諸如溫度、滲透壓和氧化應(yīng)激等因素有關(guān),而且可能與精子本身結(jié)構(gòu)及功能的改變有關(guān)。白藜蘆醇是一種天然的非黃酮類多酚類復(fù)合物,在抗炎、抗病毒、抗腫瘤和調(diào)節(jié)氧化還原信號等方面發(fā)揮重要作用,并且能夠與多種細(xì)胞內(nèi)信號通
2、路的靶分子相互作用。目前,關(guān)于不同濃度白藜蘆醇對牛精液冷凍保存效果的影響未見相關(guān)報道。本研究擬在牛精液冷凍稀釋液中添加不同濃度的白藜蘆醇,測定冷凍后牛精子的活率、頂體完整率、質(zhì)膜完整率及抗氧化指標(biāo)包括總抗氧化能力、丙二醛含量和谷胱甘肽過氧化物酶活力,最后篩選適用于牛精液冷凍保存的白藜蘆醇的最佳添加濃度。本研究主要獲得以下結(jié)果:
1.在一定濃度范圍內(nèi)(15~150μM),隨著白藜蘆醇濃度的升高,凍融精子的活率、頂體完整率和質(zhì)膜完
3、整率也隨之升高。但是,當(dāng)白藜蘆醇濃度超過一定水平時,冷凍精子質(zhì)量顯著下降。當(dāng)白藜蘆醇濃度為150μM時,凍融精子的活率、項體完整率和質(zhì)膜完整率均顯著高于對照組和其他組,分別為55.7%、72.5%和53.5%;當(dāng)白藜蘆醇濃度達(dá)到200μM時,精子活率、頂體完整率和質(zhì)膜完整率相對于150μM處理組均有所下降,精子活率顯著低于對照組,但質(zhì)膜完整率與對照組相比差異不顯著;200μM處理組的頂體完整率與100μM處理組的頂體完整率差異不顯著。表
4、明150μM白藜蘆醇為最適添加濃度。
2.在牛精液冷凍保存的過程中,隨著白藜蘆醇添加濃度的升高(15~150μM),精子的T-AOC和GSH-Px活力逐漸增強(qiáng),MDA含量逐漸降低,說明精子的抗氧化能力與白藜蘆醇濃度有一定的劑量依賴性。稀釋液中添加150μM白藜蘆醇,精子的GSH-Px活力最強(qiáng),MDA含量最低,分別達(dá)到113.3μmol/L和96.14 nmol/mL,與對照組差異顯著;100μM組精子的T-AOC最高,但與15
5、0μM組差異不顯著;當(dāng)白藜蘆醇濃度達(dá)到200μM時,其總抗氧化能力(T-AOC)及MDA含量顯著低于對照組,GSH-Px活力低于對照組,但差異不顯著。因此,添加150μM白藜蘆醇時,凍融精子的抗氧化能力最高。
3.相關(guān)性分析結(jié)果表明,精子活率與T-AOC、MDA含量之間為顯著相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.85和-0.76;頂體完整率、MDA含量與T-AOC、GSH-Px的相關(guān)性均不顯著;GSH-Px活力與精子活率、質(zhì)膜完整率的相關(guān)性
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