梅山豬繁殖性狀相關(guān)基因的研究.pdf

1、梅山豬以繁殖力高聞名于世。為了提高養(yǎng)豬業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益、確保養(yǎng)豬業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，保存進(jìn)而利用好這一寶貴的遺傳資源，勢(shì)在必行。為此，兩件事情尤為迫切：一是探明梅山豬保種群在現(xiàn)有保種方法之下，經(jīng)過(guò)多年之后，一些已知有利基因的狀態(tài)；二是進(jìn)一步在分子水平上探究梅山豬高繁殖力的成因。有鑒于此，本文以上海市嘉定區(qū)梅山豬育種中心的梅山豬保種群為特定研究對(duì)象，開(kāi)展了一系列的研究工作，并取得了許多具指導(dǎo)意義的成果。具體而言，研究?jī)?nèi)容及其結(jié)果如下： （

2、1）核受體輔激活因子-1（NCOA-1）基因的克隆 鑒于NCOA-1能夠調(diào)節(jié)核受體基因的轉(zhuǎn)錄，而ESR基因?qū)俸耸荏w基因家族，因此也有可能參與繁殖過(guò)程，本文利用電子克隆與同源克隆相結(jié)合的方法克隆得到了豬NCOA-1基因全長(zhǎng)編碼序列（CDS）。該CDS序列已提交到NCBI的GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中，并申報(bào)了國(guó)家專利一項(xiàng)。 （2）梅山豬保種群中三個(gè)基因多態(tài)性的檢測(cè) 將新克隆得到的NCOA-1基因和經(jīng)大量試驗(yàn)證明對(duì)豬繁殖性

3、能影響較大的雌激素受體（ESR）基因和促卵泡素β亞基（FSHβ）基因作為候選基因，運(yùn)用PCR-RFLP的方法，研究了這些基因在梅山豬保種群中的多態(tài)性及分布： 其一，對(duì)ESR基因的 PvuII、AvaI和MspA1I三個(gè)多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：PvuII位點(diǎn)三種基因型AA、AB、BB的頻率分別為0.30、0.54、0.16，等位基因A、B的頻率分別為0.57、0.43；AvaI酶切位點(diǎn)只有兩種基因型AB、BB，其頻率分別為0.

4、33、0.67，等位基因A、B的頻率分別為0.17、0.83；而MspA1I位點(diǎn)表現(xiàn)純合，只有一種BB基因型。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，PvuII位點(diǎn)的B等位基因?yàn)橛欣?，由此可?jiàn)，梅山豬保種群在現(xiàn)有保種方法下，該有利等位基因可能已發(fā)生流失。MspA1I位點(diǎn)因無(wú)相關(guān)文獻(xiàn)，無(wú)法作出判斷。 其二，對(duì) FSHβ基因的aTaqI位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)三種基因型AA、AB、BB，基因型頻率分別為0.75、0.23、0.02，兩個(gè)等位基因A、B的頻

5、率分別為0.86、0.14。 其三，對(duì)NCOA-1基因的的Rsa1I位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)只有兩種基因型AB、BB，其頻率分別為0.12 和 0.88，兩個(gè)等位基因A、B的頻率分別為0.06、0.94。 （3）基因多態(tài)性與繁殖性狀間的相關(guān)分析 分別采用單位點(diǎn)和合并位點(diǎn)法，分析了檢測(cè)到的基因多態(tài)位點(diǎn)與梅山豬保種群的初產(chǎn)總仔數(shù)、初產(chǎn)活仔數(shù)、經(jīng)產(chǎn)總仔數(shù)、經(jīng)產(chǎn)活仔數(shù)、初生窩重和40天斷奶窩重等6個(gè)性狀間的相關(guān)。結(jié)果如

6、下： 其一，對(duì)單位點(diǎn)進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)：ESR基因的 PvuII位點(diǎn)的不同基因型對(duì)梅山豬的繁殖性能沒(méi)有顯著影響（p>0.05）；而AvaI位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)梅山豬繁殖性狀影響顯著（p<0.05），且AB為優(yōu)勢(shì)基因型；FSHβ基因的aTaqI位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)梅山豬的繁殖性狀影響不顯著（p>0.05）；NCOA-1基因Rsa1I位點(diǎn)的多態(tài)性對(duì)梅山豬繁殖性能有顯著影響（p<0.05），且AB為優(yōu)勢(shì)基因型。結(jié)合基因與基因型頻率的分析結(jié)果，可進(jìn)一步得

7、出梅山豬保種群在現(xiàn)有保種方法之下有利基因可能在不斷流失的結(jié)論。 其二，對(duì)兩兩多態(tài)位點(diǎn)的合并基因型進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，只有PvuII/Rsa1I兩位點(diǎn)的合并基因型以及AvaI/Rsa1I兩位點(diǎn)的合并基因型對(duì)梅山豬的繁殖性能有顯著影響（p<0.05）；對(duì)三個(gè)基因四個(gè)多態(tài)位點(diǎn)的合并基因型進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，其對(duì)所有研究性狀的影響均達(dá)到顯著程度。 通過(guò)上述研究，可以初步得出如下幾個(gè)結(jié)論：一是豬的繁殖性能可能受很多基因影響，因此有必要進(jìn)一步