外源氨基酸對人工瘤胃中微生物生長及氨基酸組成的影響.pdf

1、本研究以4頭安裝永久性瘤胃瘺管的徐淮山羊羯羊?yàn)榱鑫敢汗w，采用人工模擬山羊瘤胃發(fā)酵裝置：研究了蛋氨酸和支鏈氨基酸對山羊瘤胃微生物生長以及發(fā)酵的影響；通過特定AA缺省底物的方法，研究了AA對瘤胃微生物生長的限制性以及發(fā)酵的影響；通過對EAA的不同配比模式，研究了AA模式對瘤胃微生物發(fā)酵參數(shù)以及瘤胃微生物的影響。研究結(jié)果表明： 1.蛋氨酸和支鏈氨基酸對瘤胃微生物生長及發(fā)酵的影響： 培養(yǎng)液pH值均在6.16～6.56之間變化，

2、pH均值以蛋氨酸組最高為6.38，纈氨酸組最低為6.31；氨氮濃度變化范圍為6.04～10.87mg/100ml，均值以亮氨酸組最高為9.78mg/100ml，纈氨酸組最低為7.33mg/100ml；培養(yǎng)液的TVFA摩爾濃度以亮氨酸組最高為41.52mmol/L，空白組最低為36.01mmol/L，各組分的VFA以及各組分的VFA所占TVFA的百分比存在顯著差異(P<0.05)。乙丙比略高于3:1，A組顯著高于B組(P<0.05)，其它

3、各組間差異不顯著(P>0.05)；原蟲蛋白、細(xì)菌蛋白以及微生物蛋白皆以C組(Leu)最高；培養(yǎng)液尿素氮隨培養(yǎng)時間的變化各組均有所降低，蛋氨酸和支鏈氨基酸的添加不顯著影響培養(yǎng)液中尿素氮的含量(P>0.05)，培養(yǎng)時間和蛋氨酸與支鏈氨基酸的添加對谷草轉(zhuǎn)氨酶的影響不顯著(P>0.05)，隨著培養(yǎng)時間的延長，谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性有所增強(qiáng)，蛋氨酸與支鏈氨基酸的添加對谷丙轉(zhuǎn)氨酶的影響在培養(yǎng)8h后有所差異：原蟲與細(xì)菌比值以C組最高為183.79％，B組最

4、低為137.71％，微生物AA-N以C組最高，A組最低，細(xì)菌AA-N以D組最高，E組最低，原蟲AA-N以E組最高，A組最低；蛋氨酸和支鏈氨基酸影響瘤胃微生物AA組成：谷氨酸(Glu)、組氨酸(His)、精氨酸(Arg)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、異亮氨酸(Ile)產(chǎn)生了顯著的變化(P<0.05)，而其它氨基酸差異不顯著(P>0.05)。 2.AA對瘤胃微生物生長的限制性和發(fā)酵的影響： 培養(yǎng)液pH值均在6.01～

5、6.45之間變化，均值以C組(-Lys)最高為6.23；氨氮濃度變化范圍為7.98～29.05mg/100ml，均值以A組(全量從)最高為18.16mg/100ml；培養(yǎng)液的TVFA摩爾濃度以A組(全量AA)最高為73.96mmol/L，D(-BCAA)組最低為70.27mmol/L，各組分的VFA以及各組分的VFA所占TVFA的百分比存在顯著差異(P<0.05)，乙丙比接近3：1，乙酸和丙酸處于相對平衡的狀態(tài)，各組間差異不顯著(P>0

6、.05)；四組特定AA的缺省對瘤胃微生物(細(xì)菌和原蟲)的限制性作用(相對于全量AA組)排序?yàn)?由大到小)：BCAA>芳香族AA>蛋氨酸>賴氨酸；P/B比值以B組最高為101.37％，D組最低為88.22％，微生物AA-N、細(xì)菌AA-N和原蟲AA-N分別以E組、D組和E組最高，均以C組最低；特定AA缺省底物的培養(yǎng)使得瘤胃微生物氨基酸組成中的絲氨酸(Ser)、丙氨酸(Ala)、半胱氨酸(Cys)、亮氨酸(Leu)和賴氨酸(Lys)產(chǎn)生了顯著

7、的變化(P<0.05)，而其它氨基酸差異不顯著(P>0.05)：微生物的遺傳指紋圖譜表明細(xì)菌和原蟲內(nèi)部菌群結(jié)構(gòu)因特定AA缺省底物而發(fā)生了相應(yīng)的變化，瘤胃微生物(細(xì)菌和原蟲)多樣性均以A組最高；AA對瘤胃蛋白質(zhì)降解菌(嗜淀粉瘤胃桿菌(R.amylophilus)、溶纖維丁酸弧菌(B.fibrisolvens)和棲瘤胃普雷沃氏菌(p.ruminicola))的生長限制性作用有所差異。 3.AA模式對瘤胃微生物生長及其發(fā)酵特征的影響：

8、 培養(yǎng)液pH值均在6.12～6.57之間變化，pH均值C組最低為6.25，A組最高為6.29；培養(yǎng)液NH3-N濃度變化的范圍為3.45～30.07mg/100ml，均值以A組最低為12.06mg/100ml，D組最高為12.88mg/100ml；培養(yǎng)液中TVFA以C組最高，其次是D組、B組，A組最低。B、C、D組與A組相比差異顯著(P<0.05)，而B、C、D組之間差異不顯著(P>0.05)。從乙酸/丙酸值來看，乙丙比接近3:1

9、，乙酸和丙酸處于相對平衡的狀態(tài)，各組間差異不顯著(P>0.05)；不同氨基酸模式對瘤胃微生物的生長是有一定影響的。各組的微生物蛋白產(chǎn)量(由大到小)順序可列為B組(0.4614 mg/ml)>A組(0.4393 mg/ml)>C組(0.4331 mg/ml)>D組(0.4096 mg/ml)；P/B值以及AA-N各組之間差異顯著(P<0.05)；不同氨基酸模式底物的培養(yǎng)使得瘤胃微生物氨基酸組成中的組氨酸(His)、脯氨酸(Pro)、亮氨酸