納帕海6種水生植物組培快繁研究.pdf

1、水生態(tài)系統(tǒng)退化失調(diào)是目前世界的一大生態(tài)災難，受損水生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)恢復己成為當今世界環(huán)境科學的一大研究熱點，而在受損水域中進行水生植被的恢復與重建又是水污染生態(tài)學研究的重點領域之一。
　　 在水生植被的恢復過程中，往往從異地采集大量的種苗作為種源。這種方法一方面造成種源地的生態(tài)植被遭到破壞，另一方面也會遇到種源不足等問題。而采用組培快繁技術(shù)來解決這些問題是一種可行的方法。植物組織培養(yǎng)技術(shù)在陸.生植物和觀賞性強或經(jīng)濟價值高的園藝水生

2、植物中都有廣泛的研究，而且技術(shù)較成熟，但關于野生水生植物的研究還較少。本文以采集于高寒湖泊納帕海，具有較高觀賞、藥用價值，經(jīng)濟開發(fā)前景好，生態(tài)功能強的水生植物杉葉藻（Hippurisvulgaris）、荇菜（Nymphoides peltatum）、水葫蘆苗（Halerpestes sarmentosa）、三裂堿毛茛（Halerpestes tricuspis）、劉氏荸薺（Heleocharis liouana）、穗狀狐尾藻（Myrio

3、phyllum spicatum）為試驗材料，探討其在離體培養(yǎng)過程中基本培養(yǎng)條件（溫度、蔗糖濃度、pH值）、基本培養(yǎng)基、植物激素等對外植體生長發(fā)育、增殖和生根的影響，篩選出適合每種植物萌發(fā)、增殖和生根的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)基，進行快速繁殖，建立了6種水生植物的快繁體系，為其它野生水生植物組培快繁技術(shù)的建立打下了基礎。主要研究結(jié)果如下：
　　 （1）采取兩步法對6種水生植物的外植體消毒，取得較好效果。0.05％內(nèi)生菌型抑菌劑可有效防止后

4、續(xù)污染，篩選抗菌性強的組培苗，可避免后續(xù)污染的發(fā)生。
　　 （2）6種水生植物適宜的培養(yǎng)條件為：在室溫為20±2℃，pH值為6.0（僅杉葉藻）或pH6.4，添加30mg/L蔗糖的MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)，效果較好。固體培養(yǎng)效果較液體培養(yǎng)好，誘導率與液體培養(yǎng)差異不大，但長勢較液體培養(yǎng)的好。
　　 （3）基本培養(yǎng)基1/2MS適合于杉葉藻腋芽萌發(fā)，1/3MS適合荇菜增殖前期培養(yǎng)，1/2MS適宜6種水生植物的生根培養(yǎng)，MS適宜供試材料其

5、余組培過程。
　　 （4）誘導叢芽萌發(fā)，杉葉藻以幼嫩莖尖好。劉氏荸薺以地下幼嫩莖好，穗狀狐尾藻則以幼嫩莖段較好。水葫蘆苗、三裂堿毛茛莖尖和帶腋芽莖段都好。荇菜以帶芽嫩莖段誘導叢芽萌發(fā)較好，幼嫩葉片能較好的誘導出愈傷組織，并容易分化出幼苗。
　　 （5）杉葉藻初代培養(yǎng)最佳培養(yǎng)基配方為：1/2MS+TDZ1.0+IBA0.0～0.5mg/L。腋芽萌發(fā)較多，每莖段萌發(fā)芽平均為4.91個。通過該方法誘導的腋芽轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基MS+

6、6-BA3.0+IBA0.5+KT0.05mg/L中進行培養(yǎng)，可以獲得較高的增殖倍數(shù)，月增殖倍數(shù)達11.97倍。增殖培養(yǎng)基中添加0.05mg/L CCC，壯苗效果較好。生根最適培養(yǎng)配方為：1/2MS+IBA2.0mg/L，生根率達100％。
　　 （6）荇菜初代培養(yǎng)最佳培養(yǎng)基配方為：MS+TDZ0.1+ZT1.0+IBA0.5 mg/L，萌發(fā)率高達93.33％。最適宜的增殖配方為：1/3MS+6.BA2.0+IBA0.05+KT

7、0.5mg/L，月增殖倍數(shù)達6.75倍，繼代時間不宜超過20d，否則，葉片變?yōu)殂~紅色之后發(fā)白死亡，影響生長。生根培養(yǎng)基以1/2 MS+NAA2.0 mg/L為最佳，生根率達100％。
　　 （7）三裂堿毛莨初代培養(yǎng)最佳配方為：MS+KT0.1+NAA0.1+6.BA0.1 mg/L，萌發(fā)率達87.78％。增殖最佳培養(yǎng)配方為：MS+KT0.I+NAA0.1+6.BA0.1mg/L，月增殖倍數(shù)6.50倍。生根培養(yǎng)基以1/2 MS+I

8、BA0.1mg/L為最佳，生根率100％。三裂堿毛莨增殖培養(yǎng)過程中容易產(chǎn)生玻璃苗，通過降低6-BA濃度（<0.1mg/L）或在增殖1～2代后停止使用6-BA一段時間，待增殖明顯降低時，再使用低濃度6-BA；用透氣膜代替塑料封口膜，改善培養(yǎng)瓶內(nèi)氧氣供應狀況；降低組培室溫度（<25℃）等措施，能有效防止三裂堿毛莨玻璃化苗的發(fā)生。
　　 （8）水葫蘆苗初代培養(yǎng)最佳培養(yǎng)配方為：MS+KT0.1+6-BA0.05+NAA1.0mg/L，萌

9、發(fā)率達86.67％。增殖較好的配方為：MS+KT0.05+6-BA0.5 mg/L，月增殖倍數(shù)4.89倍。生根最佳培養(yǎng)配方為：1/2MS+IBA0.5 mg/L+0.5g/LAC，生根率100％。水葫蘆苗在整個組培過程中容易產(chǎn)生愈傷組織，但難分化，其原因還有待進一步研究。
　　 （9）劉氏荸薺初代培養(yǎng)最佳培養(yǎng)配方為：MS+6-BA0.5 mg/L，萌發(fā)率高達100％，平均具葉狀莖13.34枚。最適增殖培養(yǎng)配方為：MS+6-BA2

10、.0+IBA0.5mg/L。月增殖倍數(shù)達13.11倍，平均匍匐莖數(shù)為4.03條，葉狀莖數(shù)為36.70枚。劉氏荸薺增殖時，溫度為20±2℃，pH值為6.0，培養(yǎng)基中添加1g/L AC，外植體大小以1葉狀莖帶1芽或2葉狀莖帶1芽時，增殖效果更佳，外植體容易獲取，且苗生長旺盛。生根最佳培養(yǎng)配方為：1/2MS+IBA0.5 mg/L+1.0g/LAC，生根率達100％。
　　 （10）穗狀狐尾藻初代培養(yǎng)最佳配方為：MS+6-BA0.5