七株鹽藻的親緣關(guān)系鑒定和生長特性比較.pdf

1、本論文選用中國海洋大學(xué)微藻種質(zhì)庫保存的7株鹽藻為研究材料，對其進行了鹽度、溫度以及光照等生態(tài)因子的適應(yīng)性評價，結(jié)合傳統(tǒng)細胞學(xué)形態(tài)分類和分子生物學(xué)手段進行了分類地位和親緣關(guān)系的探討，為進一步研究和開發(fā)這一藻類資源提供依據(jù)。本研究還初步研究了鹽藻的耐鹽蛋白，并應(yīng)用流式細胞術(shù)這一新技術(shù)進行了鹽藻耐鹽機理研究方法的初步嘗試。研究結(jié)果如下： 1.在本實驗條件下，這7株鹽藻對溫度和光照強度的適應(yīng)性相似，最佳生長條件分別為25℃，60001x

2、。鹽度適應(yīng)實驗結(jié)果表明7株鹽藻均為耐鹽品系，但其耐鹽性存在顯著差異，相對最適鹽度為50～150不等，其中以A57對高鹽度的耐受性最強。在優(yōu)化的鹽度、溫度及光照條件下，A85增殖能力較強，具有一定的開發(fā)潛力。 2.PCR擴增7株鹽藻的5.8S rDNA和ITS序列，并完成序列測定，將從Genbank搜索的7條已定種鹽藻的相應(yīng)序列與7條擴增序列同時進行分析，構(gòu)建進化樹，得出7株鹽藻均與綠色杜氏藻(D.viridis)親緣關(guān)系最為密切

3、，結(jié)合細胞形態(tài)學(xué)及生理生化分析的鑒定結(jié)果，可以確定這7株鹽藻均為綠色杜氏藻的不同株系，其中A85、A57和A83親緣關(guān)系最近，A121和A124關(guān)系最為密切。篩選的12個隨機引物進行7株鹽藻RAPD分析的結(jié)果與采用5.8SrDNA和ITS序列分析的結(jié)果基本一致。 3.測定高鹽脅迫下鹽藻A57的胞內(nèi)甘油含量并提取總蛋白進行SDS-PAGE分析，發(fā)現(xiàn)其細胞胞內(nèi)甘油含量的調(diào)整在高鹽脅迫6h內(nèi)即可完成，但蛋白合成在脅迫初期受到顯著抑制，