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1、家蠶絲腺是合成、分泌蠶絲蛋白的重要器官，具有作為生物反應(yīng)器的基本特點。為了實現(xiàn)人類胰島素生長因子-I(hIGF-I)在轉(zhuǎn)基因家蠶細胞和絲腺組織中的表達，我們以家蠶絲膠基因啟動子(Ser-1)驅(qū)動人胰島素樣生長因子(hIGF-I)，構(gòu)建了帶有家蠶桿狀病毒極早期基因啟動子(ie-1)控制的新霉素抗性基因(neo)表達盒的轉(zhuǎn)基因載體pigA3GFP-ser-hIGF-ie-neo，在可表達轉(zhuǎn)座酶的輔助質(zhì)粒存在下，轉(zhuǎn)染BmN培養(yǎng)細胞，以700～
2、800μg/mL的G418篩選，獲得了穩(wěn)定轉(zhuǎn)化細胞系；ELISA檢測檢測結(jié)果顯示，5×105個細胞/ml MGF-I的表達水平約7.8×103Pg：轉(zhuǎn)基因載體pigA3GFP-Ser-hIGF-ie-neo通過精子介導導入蠶卵，利用neo、gfp基因的雙重篩選，經(jīng)過PCR和點雜交鑒定，獲得了轉(zhuǎn)基因家蠶，ELISA檢測結(jié)果顯示，在G1代hIGF-I在每克中部絲腺組織中的表達水平為2.44×103 pg。此外，用家蠶絲素Fhx/P25啟動子
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