不結(jié)球白菜雄性不育新種質(zhì)P70-203的研究及雜交種指紋圖譜鑒定.pdf

1、不結(jié)球白菜（Brassica capmestris ssp.chinensis Makino）又稱小白菜、青菜，北方稱油菜，起源于中國(guó)，是十字花科蕓薹種（Brassica capmestris L.）的1個(gè)亞種。近年來(lái)，不僅北方大量引種栽培，東南亞、日本、美國(guó)及歐洲一些國(guó)家也廣泛引種，已逐漸成為世界性的蔬菜。本研究一方面對(duì)不結(jié)球白菜新種質(zhì)細(xì)胞質(zhì)雄性不育系P70-203與其回交父本的植物學(xué)特性進(jìn)行比較分析，另一方面用分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)不結(jié)球白

2、菜雄性不育系P70-203細(xì)胞質(zhì)類型進(jìn)行鑒定，及雜種一代及進(jìn)行了純度鑒定。加快不結(jié)球白菜育種進(jìn)程，為其進(jìn)一步應(yīng)用提供了分子依據(jù)。
　　 1.不結(jié)球白菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系P70-203是本所在育種過程中發(fā)現(xiàn)的半不育株，后經(jīng)回交選育而成。本研究對(duì)其植物學(xué)特性進(jìn)行觀察測(cè)定，結(jié)果表明：不育系P70-203生長(zhǎng)整齊，植株健壯，幼苗生長(zhǎng)正常，不表現(xiàn)黃化，且不育性穩(wěn)定，不育率不育度均為100％；其花朵開放正常、雌蕊功能健全、雄蕊退化、無(wú)花藥；蜜

3、腺發(fā)育良好、花蜜多、正常能吸引蜜蜂等昆蟲正常采蜜傳粉；具有優(yōu)良的植物學(xué)性狀。以上研究為配制更多優(yōu)良雜種一代，推廣不育系P70-203的應(yīng)用范圍奠定基礎(chǔ)。
　　 2.根據(jù)OguraCMS、PolimaCMS的不育性狀相關(guān)的線粒體基因序列設(shè)計(jì)特異引物，對(duì)不結(jié)球白菜雄性不育系新種質(zhì)P70-203及其保持系P60-27-1進(jìn)行PCR分析。研究結(jié)果表明，Polima引物P3/P4，P5/P6在不育系與可育系中均無(wú)擴(kuò)增條帶；Ogura引物P

4、1/P2在不育系中擴(kuò)增出750bp的特異片段，但可育系中無(wú)擴(kuò)增條帶。將擴(kuò)增的特異條帶回收并測(cè)序，將得到的測(cè)序結(jié)果在NCBI中進(jìn)行Blastn同源性比較，結(jié)果與青花菜Ogura細(xì)胞質(zhì)雄性不育同源性等均達(dá)到99％。從分子角度初步推測(cè)：該雄性不育系新種質(zhì)P70-203具有Ogura細(xì)胞質(zhì)。
　　 3.采用RAPD、SRAP、SSR三種標(biāo)記技術(shù)，對(duì)不結(jié)球白菜雜交一代08-1-61及雙親進(jìn)行指紋圖譜鑒定。對(duì)160個(gè)RAPD引物、132對(duì)S

5、RAP引物篩選、87對(duì)SSR引物篩選結(jié)果表明：1條RAPD引物、1對(duì)SRAP引物在雜交種擴(kuò)增雙親的互補(bǔ)特征帶，有效地鑒別雙親和雜種F1；2條RAPD引物、1對(duì)SRAP引物為偏母型；1條RAPD與1對(duì)SRAP引物為偏父型；未篩選出呈多態(tài)性的SSR引物。三種標(biāo)記比較分析，RAPD標(biāo)記擴(kuò)增圖譜條帶較為豐富，其成本低，操作簡(jiǎn)便，但重復(fù)性較差；SSR標(biāo)記重復(fù)性最好，但多態(tài)性最低，成本高；SRAP標(biāo)記擴(kuò)增圖譜條帶最豐富，多態(tài)性高，重復(fù)性好，是種子指