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1、當(dāng)前茶葉農(nóng)藥殘留問題的形勢(shì)嚴(yán)峻,為緩解此問題本研究根據(jù)茶樹病害生物防治的研究現(xiàn)狀,從茶樹體內(nèi)分離出內(nèi)生細(xì)菌,并篩選出對(duì)茶炭疽病等真菌病菌拮抗強(qiáng)的有益內(nèi)生菌株,并對(duì)其防病機(jī)理進(jìn)行研究,以期為茶樹病害的生物防治提供理論依據(jù)。本試驗(yàn)采用福建主要茶樹品種及其有性后代為供試材料,分別探討了茶樹內(nèi)生細(xì)菌的分布規(guī)律、有效菌株的篩選及對(duì)茶炭疽病防病機(jī)制。 1、初步探明了茶樹的根、莖、葉中均存在大量的內(nèi)生細(xì)菌及其分布規(guī)律:側(cè)根>主根>嫩莖>葉片。
2、器官間內(nèi)生細(xì)菌數(shù)量的差異達(dá)到顯著水平,茶樹有性系后代品種器官間內(nèi)生細(xì)菌數(shù)量和無性系的變異系數(shù)分別為70.80%和31.90%,且品種間的變異系數(shù)大于種內(nèi);茶樹有性系后代的側(cè)根和主根的內(nèi)生細(xì)菌數(shù)量多于無性系茶樹品種;無性系茶樹品種的嫩莖和葉片內(nèi)生細(xì)菌數(shù)多于茶樹有性系后代。 2、從黃觀音、茗科1號(hào)、福鼎大毫茶、福鼎大白茶、福安大白茶5個(gè)供試品種中分離、純化出內(nèi)生細(xì)菌菌株共79株,通過平板對(duì)峙法最終篩選出對(duì)茶炭疽病菌具有一定的拮抗能力
3、、防病效果的茶樹內(nèi)生細(xì)菌29株,從黃觀音、福鼎大白茶健葉和茗科1號(hào)、福安大白茶嫩莖中篩選出5株具有較強(qiáng)拮抗能力的目標(biāo)菌株。 3、5株目標(biāo)菌株在室內(nèi)對(duì)茶炭疽病具有明顯的抑制效果,平板對(duì)峙培養(yǎng)出現(xiàn)明顯的抑菌圈,經(jīng)測(cè)定平均抑制率達(dá)到60.09%;目標(biāo)菌株對(duì)茶炭疽病菌分生孢子形成的抑制率均為72.23%。 4、通過普通光學(xué)顯微鏡觀察的結(jié)果表明,目標(biāo)菌株均可抑制茶炭疽病病菌的菌絲生長(zhǎng),造成菌絲分支增多、頂端和中央膨大破裂、畸變,菌
4、絲呈念珠狀或菌絲分支顯著增多,且頂端細(xì)胞變形膨大聚集成簇。掃描電鏡觀察結(jié)果,受抑制的茶炭疽病病菌的菌絲細(xì)胞壁皺縮干癟,菌絲末端膨大破裂消解,內(nèi)含物泄漏,細(xì)胞原生質(zhì)大量溢漏,終使細(xì)胞崩解和消融,茶炭疽病孢子畸變呈干癟形狀且不萌發(fā)。采用凹載玻片培養(yǎng)法,結(jié)果表明目標(biāo)菌株培養(yǎng)液處理茶炭疽病分生孢子,其分生孢子萌發(fā)明顯受到抑制,初步揭示出茶樹內(nèi)生細(xì)菌可能通過分泌多種活性物質(zhì)以阻礙茶炭疽病菌的菌絲生長(zhǎng)和分生孢子形成,并抑制分生孢子的萌發(fā),因此可阻止
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