梨果實對炭疽病和輪紋病抗性生理的研究.pdf

1、為進(jìn)一步了解梨果對炭疽病和輪紋病的抗性機(jī)制，本研究主要評價了不同品種梨果對炭疽病菌和輪紋病菌抗的擴(kuò)展能力，并重點探討不同抗性品種梨果接種炭疽病菌和輪紋病菌后生理生化的變化，尤其是酚類物質(zhì)的變化，為進(jìn)一步揭示梨炭疽病和輪紋病抗性機(jī)理提供理論依據(jù)。為順利開展梨果實抗性生理生化研究，本研究首先對梨幼果多酚提取方法進(jìn)行優(yōu)化，同時利用高效液相色譜對梨果實酚類物質(zhì)的成分和含量進(jìn)行了系統(tǒng)的分析，明確酚類物質(zhì)在不同梨品種中分布情況。
　　結(jié)果表明

2、:
　　1、采用正交試驗對梨幼果果肉多酚物質(zhì)提取工藝進(jìn)行優(yōu)化，并利用高效液相色譜法(HPLC)測定其多酚物質(zhì)組成。提取溫度和乙醇濃度對梨幼果多酚得率影響較為顯著，梨幼果多酚最佳提取工藝組合為:乙醇濃度60％，提取溫度70℃，提取時間2h，提取料液比1∶30(g/mL)，依照此工藝提取梨幼果多酚得率可達(dá)到1.47mg/g;從梨幼果中鑒定出熊果苷、表兒茶素、綠原酸、香草醛等9種酚類物質(zhì)，其中熊果苷含量最高，為總含量的74.1％。

3、>　　2、利用高效液相色譜法對12個品種梨果實中酚類物質(zhì)組分及含量進(jìn)行研究，在所測的12個品種中，有3個品種檢測到10種酚類物質(zhì)，3個品種檢測到9種酚類物質(zhì)，剩余6個品種檢測到8種酚類物質(zhì)。同一種酚類物質(zhì)在不同品種中含量變化范圍較大，其中香草醛最高值是最低值的44倍，咖啡酸最高值是最低值的20倍。在測定的酚類物質(zhì)中，綠原酸含量最高，達(dá)到62.2％，是主要的酚類物質(zhì)，其次為兒茶素、表兒茶素，分別為2.87mg/100g、1.52mg/10

4、0g，也是梨果實中重要的酚類物質(zhì)。根皮苷和槲皮素含量最低，分別為0.04mg/100g、0.05mg/100g。對梨果實中各酚類物質(zhì)及其總含量進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果表明，綠原酸與所測酚類物質(zhì)的總含量呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)高達(dá)0.954**，各個酚類物質(zhì)之間也存在一定的相關(guān)性。
　　3、以抗性高的品種‘紅那禾’和抗性低的品種‘色爾克甫’為材料，研究其接種炭疽病菌和輪紋病菌后總酚、過氧化氫含量及四種保護(hù)酶活性的變化。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，‘紅

5、那禾’健康果肉總酚含量是‘色爾克甫’含量的4倍之多，在接種炭疽病菌或輪紋病菌后，‘紅那禾’上升幅度較小，而‘色爾克甫’上升幅度較大，但在發(fā)病期間其含量一直低于‘紅那禾’;接種病菌后，‘色爾克甫’果肉中H2O2含量一直上升，且上升幅度較大，而‘紅那禾’果肉中H2O2含量變化相對穩(wěn)定;接菌后，‘紅那禾’前期SOD活性上升速度比‘色爾克甫’迅速;‘紅那禾’CAT活性受病菌的影響較小，而‘色爾克甫’CAT活性受病菌的影響較大，前期變化緩慢，后期

6、呈現(xiàn)明顯的下降趨勢;接種炭疽病菌，‘紅那禾’和‘色爾克甫’兩個品種POD活性都呈現(xiàn)先上升后下降再上升的變化趨勢，但‘紅那禾’下降時間晚于‘色爾克甫’，接種輪紋病菌，‘色爾克甫’開始呈現(xiàn)下降趨勢，后期才呈現(xiàn)緩慢上升的趨勢，‘紅那禾’呈現(xiàn)先上升后下降再上升的變化趨勢。兩個抗性不同的梨品種在接種炭疽病菌或輪紋病菌后，PPO活性總體低于對照，其中抗性低的品種更甚。由此表明，總酚、H2O2、四種保護(hù)酶在梨果實受病菌侵染過程中，都具有重要作用。

7、r>　　4、以抗性高的品種‘紅那禾’和抗性低的品種‘色爾克甫’為材料，研究其接種炭疽病菌和輪紋病菌后酚類物質(zhì)成分和含量的變化，結(jié)果表明，‘紅那禾’健康果實中酚類物質(zhì)總合量及各個酚類物質(zhì)含量分別比‘色爾克甫’高。其中，咖啡酸、表兒茶素、香草醛、綠原酸分別是‘色爾克甫’的5.54倍、4.71倍、3.79倍、3.65倍?？剐愿叩钠贩N在接種炭疽病菌或輪紋病菌后，多種酚類物質(zhì)在病害發(fā)展過程中下降較多，其與抑制病原菌的生長有密切關(guān)系。研究還發(fā)現(xiàn)，減

8、少的酚類物質(zhì)多數(shù)在后期含量增加，以進(jìn)一步抵抗病原菌的侵害。而抗性低的品種在接種炭疽病菌和輪紋病菌后分別有3種（咖啡酸、表兒茶素、蘆?。┖?種酚類物質(zhì)（咖啡酸、表兒茶素、香草醛、蘆丁、兒茶素、阿魏酸、綠原酸）在病害發(fā)生過程中不斷增加，說明在病害發(fā)生后，這些酚類物質(zhì)能夠在病健交界處、病斑部位積累，對抵御病害有一定作用。所測兩個品種健康果肉中均未檢測到槲皮素，接種炭疽病菌和輪紋病菌后，在病健交界處和病斑部位分別檢測出來。
　　5、對10

9、1個梨品種成熟果實抗炭疽病菌和輪紋病菌擴(kuò)展能力進(jìn)行評價、聚類分析，并對其抗病菌擴(kuò)展能力與生理指標(biāo)作相關(guān)分析。聚類分析結(jié)果表明，101個梨品種果實對兩種病菌抗擴(kuò)展能力均可分為五類即抗擴(kuò)展性強(qiáng)、較強(qiáng)、中等、較弱、弱。其中對炭疽病菌和輪紋病菌抗擴(kuò)展性中等的品種最多，分別占供試品種40.6％和35.6％，而對這兩種病菌抗擴(kuò)展性弱的品種最少，分別占供試品種5.9％和2.0％。相關(guān)分析表明，果肉總酚含量分別與果實抗炭疽病菌和輪紋病菌的擴(kuò)展能力呈極顯