試析蝴蝶蘭組織培養(yǎng)研究

1、<p>　　試析蝴蝶蘭組織培養(yǎng)研究</p><p>　　摘要：通過采用組織培養(yǎng)的快速繁殖方式對(duì)蝴蝶蘭進(jìn)行繁殖培育，并且對(duì)蝴蝶蘭的快速培育繁殖技術(shù)的研究進(jìn)行了分析和研究，明確了蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的優(yōu)勢以及其相應(yīng)的影響因素，同時(shí)闡述了蝴蝶蘭組織培養(yǎng)技術(shù)以及其影響因素，為減少蝴蝶蘭組織培育當(dāng)中的問題提供了可供參考的經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)也為蝴蝶蘭的廣泛種植以及生產(chǎn)奠定了良好的基礎(chǔ)。 </p><p>

2、　　關(guān)鍵字：蝴蝶蘭；組織培養(yǎng)；研究 </p><p>　　中圖分類號(hào)： J522.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： A </p><p>　　引言：蝴蝶蘭，屬于蘭科蝴蝶蘭屬植物，屬于熱帶以及亞熱帶氣生蘭。蝴蝶蘭的原本產(chǎn)地在菲律賓、馬拉西亞以及印度尼西亞等地，植株美觀，形狀似碟，枝葉繁茂且花色鮮艷持久，具有極高的觀賞價(jià)值以及經(jīng)濟(jì)價(jià)值，然而由于蝴蝶蘭屬于單莖性氣生蘭，植株較少發(fā)育為側(cè)枝，蝴蝶蘭的種子也由于并不

3、包含胚乳或者其他類型的組織，由此蝴蝶蘭在自然條件下萌發(fā)率十分低，常規(guī)的無性繁殖方式根本無法采用。而組織培養(yǎng)方式進(jìn)行的種苗繁殖是當(dāng)前蝴蝶蘭大規(guī)模生產(chǎn)以及種植的唯一的途徑。蝴蝶蘭主要是通過無菌播種以及使用其他類型的外植體誘導(dǎo)類原球莖進(jìn)行快速繁殖。 </p><p>　　一、蝴蝶蘭組織培養(yǎng)快速繁殖及其影響因素 </p><p>　　1、叢生芽誘導(dǎo)繁殖 </p><p>　

4、　當(dāng)前，蝴蝶蘭組織培養(yǎng)的快速繁殖有原球莖以及叢生芽繁殖途徑。相對(duì)而言，原球莖的繁殖途徑是研究相對(duì)較多的一種類型，而叢生芽快速繁殖途徑則在很大程度上是一種芽生芽的繁殖途徑。其培植的技術(shù)含量相對(duì)較低且容易操作，并不對(duì)母株造成影響和傷害，同時(shí)能在一定程度上保證其遺傳的穩(wěn)定性。同時(shí)也能在一定程度上避免植株的大量變異。并且叢生芽誘導(dǎo)的繁殖途徑所需要的時(shí)間較短，誘導(dǎo)的成功率也相對(duì)較高。 </p><p>　　2、誘導(dǎo)以及其繁

5、殖的影響因素 </p><p>　　根據(jù)相應(yīng)的研究以及實(shí)驗(yàn)表明，6-BA對(duì)蝴蝶蘭叢生芽誘導(dǎo)產(chǎn)生了重要的影響。濃度一定的6-BA能在一定程度上破壞腋芽的休眠，隨著6-BA濃度的持續(xù)提高，叢生芽的增長率也隨之提高。6-BA濃度的提高能有效提高叢生芽的增長率，然而濃度過高的6-BA也將對(duì)叢生芽的生長以及發(fā)育產(chǎn)生影響，導(dǎo)致其芽的長勢變?nèi)?，同時(shí)也將導(dǎo)致蝴蝶蘭的褐化率明顯增加。除此之外，NAA同時(shí)也將對(duì)叢生芽的增殖率產(chǎn)生影響

6、。適當(dāng)濃度的NAA能有效提高蝴蝶蘭叢生芽的生長以及增殖，然而濃度過高將導(dǎo)致叢生芽的生長以及增殖緩慢、長勢較弱，并且開始生根。由此在工廠化的育苗過程中，當(dāng)叢生芽誘導(dǎo)數(shù)量階段，可使用9.0mg/L以及0．5mgNAA能獲得較好的增殖率。這與相關(guān)研究者的研究結(jié)論相一致。 </p><p><b>　　二、蝴蝶蘭的培養(yǎng) </b></p><p><b>　　1、培養(yǎng)

7、的部位 </b></p><p>　　就大部分植物而言，其根、莖、葉以及花器等各個(gè)部位都能成功培養(yǎng)，然而蘭科植物能培養(yǎng)的主要部位為頂芽以及側(cè)芽，部分種類的蝴蝶蘭也可采用隱芽等休眠芽進(jìn)行培育，部分可從葉片培養(yǎng)得出植株，不同屬的蝴蝶蘭所培養(yǎng)出的部位也并不相同。 </p><p><b>　?。?）莖尖 </b></p><p>　　莖尖

8、處于細(xì)胞分裂的最為旺盛的部位，同時(shí)也是培育成功率最高的部位，然而其所需要的分離技術(shù)要求較高。 </p><p><b>　?。?）休眠芽 </b></p><p>　　休眠芽能在頂芽失去發(fā)芽能力后進(jìn)行發(fā)芽。休眠芽裸露在外，由此對(duì)其分離較為簡單，但其容易受到病菌的污染，由此應(yīng)注意滅菌。 </p><p><b>　　（3）隱芽 <

9、/b></p><p>　　較難分離，其成活率與休眠芽不相上下。 </p><p><b>　　（4）花梗 </b></p><p>　　當(dāng)蘭花開花一個(gè)月之后，剪下其花梗頂端以及數(shù)個(gè)花梗腋芽，將其切成2-3cm長度的切段，每段帶著一腋芽，并將基部向下插入培養(yǎng)基當(dāng)中。 </p><p><b>　　2、選擇

10、外植體 </b></p><p>　　蝴蝶蘭不同外植體的成活率都各不相同，其中，蝴蝶蘭花梗側(cè)芽的成活率最高，成活率有75%，其次為花梗，為62.5%。葉片和根尖的成活率最低，為12.5%以及7.5%。 </p><p>　　不同的外植體將采取不同的取材方法。最為理想的培養(yǎng)物為正在生長中的芽。一般可取2-6厘米長度切取，使之上面包含多個(gè)隱芽以及生長芽。生長芽的成活率最高，休眠芽難

11、以分離并且成長也相對(duì)較慢。 </p><p>　　3、選擇基本培養(yǎng)基 </p><p>　　蝴蝶蘭組織培養(yǎng)所使用的基本培養(yǎng)基包括MS、VM、KC以及花寶等等，然而對(duì)于最適宜的培養(yǎng)基則各有不同的選擇，其主要由于蝴蝶蘭品種差異較大，并且由于不同的外植體來源所導(dǎo)致的。相關(guān)學(xué)者以紅花品種為研究的基礎(chǔ)，分析比較了MS、1/2MS以及改良的KC培養(yǎng)基進(jìn)行了研究，分析出改良KC培養(yǎng)基效果最佳，其次為1/

12、2MS、MS；王靜等研究者一紅花以及白花系未研究的基礎(chǔ)，將其作為實(shí)驗(yàn)的材料，研究出了大量對(duì)于蝴蝶蘭原球莖增殖以及分化影響的大量影響元素，表明對(duì)于原球莖而言也存在較多的增值影響因素。1/2MS對(duì)于原球莖增殖最為有益。魯雪華等在對(duì)蝴蝶蘭花梗節(jié)位置切段的誘導(dǎo)原球莖的試驗(yàn)中篩選培養(yǎng)基，也明確了1/2MS或者改良MS比MS的效果要好。適當(dāng)減少M(fèi)S培養(yǎng)基當(dāng)中的元素以及減少部分微量元素以及相關(guān)的有機(jī)部分，同時(shí)適時(shí)增加少量的葉酸以及生物素能在一定程度上

13、對(duì)原球莖的增殖生長有益。陳勇等學(xué)者研究表明，1/2MS培養(yǎng)基對(duì)于原球莖的增殖效果以及分化效果均比MS培養(yǎng)基要好。MS培養(yǎng)基當(dāng)中所包含的濃度較高的無機(jī)鹽對(duì)原球莖的增殖和分化并不利。楊美純等研究表明，MS培養(yǎng)基在對(duì)蝴蝶蘭種子的萌發(fā)十分有益。 </p><p>　　4、培養(yǎng)基添加物的影響 </p><p>　　部分氨基酸類型的添加物也可作為培養(yǎng)基當(dāng)中的有機(jī)氮源，甘氨酸能有效推動(dòng)蝴蝶蘭離體根的生長

14、，而絲氨酸等能對(duì)蝴蝶蘭當(dāng)中的花藥、胚狀體以及不定芽的分化產(chǎn)生一定的影響。水解乳蛋白能對(duì)蝴蝶蘭的胚狀體或者不定芽提供相應(yīng)的營養(yǎng)成分，提供相應(yīng)的生理活性物質(zhì)以及生長所需要的激素等等，例如通過加入100-200mg/L香蕉泥，從而緩沖pH，從而促進(jìn)幼苗的生長發(fā)育。 </p><p>　　根據(jù)相應(yīng)的研究可了解到，營養(yǎng)基當(dāng)中的不同添加物能對(duì)蝴蝶蘭原球莖的增殖以及分化將產(chǎn)生影響，水解酪蛋白能有效促進(jìn)蝴蝶蘭原球莖的增殖，而水解

15、酪蛋白若是與香蕉泥均勻混合則將對(duì)原球莖產(chǎn)生一定的抑制作用，有機(jī)添加物之間的相互作用以及有機(jī)添加物與培養(yǎng)基之間的作用也能對(duì)蝴蝶蘭原球莖的增殖產(chǎn)生一定的影響。部分研究表明，在培養(yǎng)基中添加適當(dāng)?shù)南憬赌唷⒁榛蛘甙z質(zhì)的果汁或者菜汁等等都將在一定程度上促進(jìn)蝴蝶蘭原球莖的增殖。若是在培養(yǎng)基當(dāng)中添加活性炭，在添加低濃度的活性炭例如0.5-1.0g/L之時(shí)并不對(duì)原球莖的增殖產(chǎn)生影響。而在濃度約為2.0-3.0g/L之時(shí)將對(duì)原球莖的增殖產(chǎn)生一定的促進(jìn)

16、作用。而蔗糖是培養(yǎng)基的能源物質(zhì)以及滲透調(diào)節(jié)劑，能在很大程度上對(duì)原球莖的增殖產(chǎn)生影響。相應(yīng)的試驗(yàn)研究表明，在蔗糖濃度為2%時(shí)能有益于原球莖的生長，而在濃度為2-3%時(shí)能促進(jìn)蝴蝶蘭芽的生長形成，濃度為5%的蔗糖能促進(jìn)根的分化以及生長，由此可了解到，蔗糖的濃度對(duì)原球莖的分化具有明顯的影響，當(dāng)分化培養(yǎng)基包含1-2%的蔗糖之時(shí)，原球莖將達(dá)到100%的分化，而當(dāng)蔗糖的濃度為2%時(shí)，其分化速度達(dá)到最高，當(dāng)濃度為3-5%之時(shí)，則將在一定程</p&

17、gt;<p><b>　　作者簡介: </b></p><p>　　張海波，男，（1980.2 —），內(nèi)蒙古赤峰市人，工程師，從事三峽珍稀、瀕危植物繁育與保護(hù)研究工作。 </p><p><b>　　參考文獻(xiàn)： </b></p><p>　　[1] 龔明霞,何鐵光,黃如葵,方峰.觀賞鳳梨組培快繁技術(shù)研究進(jìn)展[

18、J]. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(05) . </p><p>　　[2] 譚巍.蝴蝶蘭組培苗瓶內(nèi)生根的研究[J]. 中國林副特產(chǎn). 2011(02). </p><p>　　[3] 朱懿,嚴(yán)紅.蝴蝶蘭組織培養(yǎng)研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(05) . </p><p>　　[4] 李曉青,張曉申,王慧瑜.蝴蝶蘭組培快繁技術(shù)研究[J]. 陜西農(nóng)業(yè)科學(xué).