大吳風(fēng)草不同器官黃酮含量的季節(jié)變化研究【畢業(yè)論文】

1、<p>　　本科畢業(yè)論文(設(shè)計)</p><p>　題 目：大吳風(fēng)草不同器官黃酮含量的季節(jié)變化研究</p><p>　學(xué) 院：</p><p>　學(xué)生姓名：</p><p>　專 業(yè)：生物科學(xué)</p><p>　班 級：</p><p>　指導(dǎo)教師：</p

2、><p>　起止日期：</p><p><b>　　目錄</b></p><p><b>　　摘要I</b></p><p>　　AbstractII</p><p><b>　　引言1</b></p><p><b>

3、;　　1材料與方法3</b></p><p><b>　　1.1材料3</b></p><p>　　1.1.1植物材料3</p><p><b>　　1.1.2試劑3</b></p><p><b>　　1.1.3儀器3</b></p>

4、<p><b>　　1.2方法3</b></p><p>　　1.2.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制3</p><p>　　1.2.2大吳風(fēng)草黃酮類物質(zhì)含量測定3</p><p>　　2實驗結(jié)果及分析5</p><p>　　2.1蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線及方程5</p><p>　　2.2

5、大吳風(fēng)草器官黃酮類化合物含量5</p><p>　　2.2.1大吳風(fēng)草不同器官黃酮類化合物含量5</p><p>　　2.2.2大吳風(fēng)草葉片黃酮類化合物含量的季節(jié)變化動態(tài)6</p><p>　　2.2.3大吳風(fēng)草葉柄黃酮類化合物含量的季節(jié)變化動態(tài)7</p><p>　　2.2.4大吳風(fēng)草根狀莖黃酮類化合物含量的季節(jié)變化動態(tài)

6、8</p><p><b>　　3討論9</b></p><p><b>　　結(jié)論11</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn)12</b></p><p><b>　　致謝15</b></p><p><b&g

7、t;　　摘要</b></p><p>　　[摘要]：植物中的黃酮化合物具有重要的生態(tài)意義和經(jīng)濟(jì)價值。本文對不同季節(jié)大吳風(fēng)草（Farfugium japnicum Kitam.）不同器官中總黃酮含量及其動態(tài)變化進(jìn)行了研究，采用95%乙醇超聲提取法測定舟山群島長崗山地區(qū)大吳風(fēng)草葉片、葉柄、根狀莖等不同器官黃酮類化合物含量，結(jié)果顯示：不同器官中黃酮類化合物含量，葉片最高、葉柄次之、根狀莖最低；而且不同器官中

8、的黃酮含量具有明顯的季節(jié)性差異。葉片中總黃酮含量隨季節(jié)變化逐漸升高，12月達(dá)到最高峰；葉柄中黃酮含量最低峰在4月，最高峰則出現(xiàn)在10月，其它月份含量變化不大；地下根狀莖黃酮含量最低峰在6月，最高峰也在10月 。這主要源于環(huán)境因子的變化影響了黃酮類化合物的合成和積累，如紫外線輻射、高溫等。地上部分（葉片和葉柄）黃酮含量高于地下部分（根狀莖），受紫外線輻射更強(qiáng)的葉片黃酮含量明顯高于葉柄，這一結(jié)果表明紫外線輻射有益于器官中黃酮類化合物累積。通

9、過對大吳風(fēng)草不同器官中 黃酮含量及其動態(tài)變化進(jìn)行研究，確定其最佳采收器官及采收季節(jié)，為優(yōu)化大吳風(fēng)草的種植、資源保護(hù)及其黃酮類化合物的提取提供理論依據(jù)。</p><p>　　[關(guān)鍵詞]：大吳風(fēng)草；總黃酮；動態(tài)變化</p><p><b>　　Abstract</b></p><p>　　[Abstract]：Flavonoids in the p

10、lant has important ecological significance and economic value. In this paper, flavonoids content and its dynamics in different organs of Farfugium japnicum Kitam in different seasons were studied. Using ultrasonic extrac

11、tion in 95% ethanol to determine the flavonoids content of Farfugium japnicum Kitam’s leaves , petioles and rhizomes . The results showed that: the content of flavonoids in different organs,leaves> petioles> rhizom

12、es, has significant seasonal differe</p><p>　　[Key words]：Farfugium japnicum Kitam ；flavonoids ；dynamics</p><p><b>　　引言</b></p><p>　　大吳風(fēng)草（Farfugium japnicum）別名八角鳥、活血蓮、荷葉

13、三七、橐吾等，屬菊科（Asteraceae）大吳風(fēng)草屬（Farfugium）多年生葶狀草本植物，葉基生，有長柄，基部鞘狀抱莖，葉片腎形，長9～15厘米，寬11～30厘米，邊緣有小齒。葉濃綠色，上密布黃色斑點。頭狀花序排成傘房狀，舌狀花黃色，花期8～11月[1]。原產(chǎn)中國東部一些省份及日本和朝鮮，喜半陰和濕潤環(huán)境，常生于林下或林邊陰濕地、溪溝邊、石崖下，在江南地區(qū)能露地越冬，怕陽光直射，對土壤適應(yīng)度較好，以肥沃疏松、排水好的壤土為宜[2]

14、。廣泛分布于我國浙江、福建、廣東和臺灣等省份[3]。據(jù)《浙江民間常用草藥》記載：“性涼，味苦?！痹诿耖g長期作為中草藥材食用，據(jù) 《質(zhì)問本草》、《浙江民間常用草藥》、《福建民間草藥》等記載：清熱、解毒、活血；治風(fēng)熱感冒、咽喉腫痛、癰腫、疔瘡、瘰疬、跌打損傷等病癥，是一種尚未規(guī)模開發(fā)利用的藥膳同源新資源。</p><p>　　黃酮類物質(zhì)是泛指具有C6-C3-C6骨架的一類化合物，包括黃酮、黃酮醇、異黃酮、查爾酮等幾種

15、，以蕓香科、菊科、玄參科、傘形科、苦苣苔科及豆科植物中存在較多[4~7]，幾乎遍布植物體的各組織和器官，如葉、根、木質(zhì)部、樹皮、花粉、花、漿果和種子等。黃酮作為一類重要的次生代謝物質(zhì)對高等植物來說具有多種功能，對植物生長、發(fā)育、開花、結(jié)果以及抗紫外線灼傷、抵抗病菌入侵、吸引昆蟲授粉等起著重要的作用[8]。植物體中黃酮類化合物多以游離態(tài)或苷的形式存在，主要經(jīng)由葡萄糖分別經(jīng)過莽草酸途徑和乙酸-丙二酸途徑生成羥基桂皮酸和三個分子的乙酸，然后合

16、成查爾酮，再衍變?yōu)楦黝慄S酮類化合物。其合成過程受到苯丙氨酸解氨酶（PLA）、查爾酮合成酶(CHS)、查爾酮異構(gòu)酶(CHI)、黃烷酮醇還原酶(DFR)、異黃酮合成酶(IFS)等系列酶的調(diào)控，而光照強(qiáng)度、光質(zhì)、溫度、水分等環(huán)境因子均能影響這些酶的活性及其分子合成水平[9]。</p><p>　　除遺傳和生物因素外, 影響植物中黃酮類成分合成的主要因素有光照、溫度、濃度、礦質(zhì)營養(yǎng)和土壤水分等[9]。因此，植物器官中黃酮

17、含量存在季節(jié)性差異和空間性差異，如劉常金等[10]對不同產(chǎn)地香椿黃酮含量研究結(jié)果表明：北方香椿的黃酮含量明顯高于南方；冷平生等[11]對銀杏葉的研究顯示：遮蔭處理顯著降低銀杏黃酮苷含量，具體表現(xiàn)為：①陽生植物夏秋季節(jié)黃酮含量高于冬春季節(jié)，陰生植物含量最高峰一般在秋末冬初②同一器官向陽面黃酮含量高于陰面③樹冠頂層黃酮含量高于底層④地上部分黃酮含量高于地下部分⑤不同器官黃酮含量高低順序一般為：花＞葉片＞莖＞根等[12-14]。近年來，有關(guān)環(huán)

18、境對黃酮類成分的影響及分子機(jī)制方面的研究有了較大進(jìn)展，已經(jīng)明確紫外輻射、強(qiáng)光強(qiáng)、低溫、高CO2濃度、適度干旱以及合理的施肥等因素均可以促進(jìn)此類成分的合成。其中，光照和溫度是兩大關(guān)鍵影響因素，可以直接影響到合成途徑中關(guān)鍵酶的活性，對植株中黃酮的含量有明顯的調(diào)節(jié)作用。</p><p>　　黃酮類化合物的藥用功效顯著，主要在心血管、抗腫瘤、抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛以及消化系統(tǒng)等方面：①改善血糖和血脂代謝[15]②保護(hù)心腦血管

19、系統(tǒng)[16]③促進(jìn)消化、提高吸收功能[17]④保護(hù)肝腎組織[18]⑤鎮(zhèn)痛、消炎[19]⑥抗氧化和延緩衰老[20]⑦提高免疫力、抗腫瘤[21]等。隨著研究的深入黃酮類化合物在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用取得了良好的社會效益和經(jīng)濟(jì)效益，如銀杏黃酮、杜仲黃酮在醫(yī)藥領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用[22,23]。由于大吳風(fēng)草“高貴不貴”，適應(yīng)能力很強(qiáng)，對土壤、溫度、濕度等生長環(huán)境要求低，在江南地區(qū)一帶多作為地被花卉，資源極其豐富。因此從大吳風(fēng)草中提取黃酮是增加其經(jīng)濟(jì)附加值的重

20、要途徑，具有重要現(xiàn)實意義。黃酮類物質(zhì)在植物體不同器官的分布差異極其隨季節(jié)的動態(tài)變化直接影響提取得率，目前國內(nèi)外對大吳風(fēng)草的研究主要集中在生理生態(tài)、分類鑒定等方面，然而對其器官中黃酮類物質(zhì)含量隨季節(jié)性變化動態(tài)的研究，迄今國內(nèi)外尚未見報道。為此本實驗采用乙醇超生提取法對大吳風(fēng)草不同器官的黃酮含量及其動態(tài)變化進(jìn)行研究，明確其不同器官中黃酮類化合物含量與季節(jié)變化的關(guān)系，確定其最佳采收期，為大吳風(fēng)草的種植、資源保護(hù)及其黃酮類化合物的提取</

21、p><p><b>　　材料與方法</b></p><p><b>　　材料</b></p><p><b>　　1.1.1植物材料</b></p><p>　　大吳風(fēng)草分別于2011年4、6、8、10、12月初采集于舟山市定海區(qū)長崗山森林公園，經(jīng)浙江海洋學(xué)院生物系植物學(xué)教授馬玉心

22、鑒定為Farfugium japnicum Kitam。分別將大吳風(fēng)草葉片、葉柄、根狀莖低溫烘干、粉碎，過100目篩，放入干燥儀器備用。</p><p><b>　　1.1.2試劑</b></p><p>　　蘆丁標(biāo)準(zhǔn)樣、95%乙醇、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、硝酸鋁等均為國產(chǎn)分析純、去離子水 。</p><p><b>　　1.1.3儀器&

23、lt;/b></p><p>　　紫外分光光度計、超聲波振蕩儀、電子分析天平、恒溫干燥箱、粉碎機(jī)、100目篩、移液管（1ml、2ml、5ml）、50ml容量瓶、燒杯等。</p><p><b>　　方法</b></p><p><b>　　蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制</b></p><p>　　準(zhǔn)確稱

24、取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品125mg, 用95%乙醇溶解, 最后用乙醇定容至25ml, 裝人棕色瓶中置4℃冰箱保存?zhèn)溆?。分別精密吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液0.0,2.5 ,5.0 ,7.5 ,10.0 ,12.5ml于25ml容量瓶,加水至12.5ml，加5%亞硝酸鈉1.0ml，搖勻放置6min，加入10%的硝酸鋁1.0ml, 搖勻放置5min, 加入5%氫氧化鈉10.0ml,混勻后用水定容至刻度, 搖勻,放置15min以上后以未加蘆丁標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液的待測液為參比溶

25、液，在510nm比色測定吸光度, 以蘆丁濃度為橫坐標(biāo), 以吸光度作為縱坐標(biāo)制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。</p><p>　　大吳風(fēng)草黃酮類物質(zhì)含量測定</p><p>　　精確稱定樣品粉末0.5g左右，至于50ml容量瓶中，加95%乙醇40ml，在超聲波發(fā)生器提取45min，靜置冷卻，加95%乙醇至刻度，搖勻，靜止3-4h吸取樣液2.0ml，分別置25ml容量瓶中，加水至5ml，加5%亞硝酸鈉1.0ml

26、，搖勻放置6min，加入10%的硝酸鋁1.0ml, 搖勻放置5min, 加入5%氫氧化鈉10.0ml,混勻后用水定容至刻 度, 搖勻,放置15min以上，以相應(yīng)試劑做空白，于510nm處測定吸光度。從標(biāo)準(zhǔn)曲線中得到提取液黃酮的含量。</p><p><b>　　實驗結(jié)果及分析</b></p><p>　　蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線及方程 </p><p>　

27、　在510nm比色測定吸光度, 以蘆丁濃度為橫坐標(biāo), 以吸光度作為縱坐標(biāo)制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)比色測定結(jié)果，用Excel軟件處理得到以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)樣的黃酮測定標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖2.1。</p><p>　　圖2.1 蘆丁對照品標(biāo)準(zhǔn)曲線 </p><p>　　Fig.2.1The standard curve of lutin</p><p>　　大吳風(fēng)草器官黃酮類化合物含量&l

28、t;/p><p>　　大吳風(fēng)草不同器官黃酮類化合物含量</p><p>　　總體而言，大吳風(fēng)草的不同器官中黃酮含量差異較大（圖2.2所示），葉片中黃酮類物質(zhì)含量最高，葉柄次之，根狀莖最低，葉片黃酮含量為根狀莖2~3倍，葉柄較根狀莖略高但相差不大。這與李繼泉[13]報道的植物此生代謝物質(zhì)酚類的含量與植物受到的光照強(qiáng)度（葉片最高，葉柄次之，地下根狀莖最低）呈正相關(guān)相吻合，冷平生[12]、王華田[1

29、1]等也有類似的相關(guān)報道。大吳風(fēng)草葉片較大，對葉柄起到了“保護(hù)傘”的作用，大大降低了葉柄所受紫外線和強(qiáng)光輻射；根狀莖位于地下，所受紫外線和強(qiáng)光輻射更弱。黃酮類化合物是UV-B和強(qiáng)光的有效“過濾器”，具有較強(qiáng)清除由于輻射導(dǎo)致植物體細(xì)胞產(chǎn)生的自由基的能力，所以強(qiáng)光和紫外線輻射對植物體器官黃酮的積累有益[24]。因此，黃酮類化合物含量高低順序為：葉片＞葉柄＞根狀莖，且地上部分高于地下部分。</p><p>　　圖2.2

30、 大吳風(fēng)草不同器官中黃酮類化合物含量</p><p>　　Fig.2.2 The content of flavonoids in different organs of Farfugium japnicum Kitam</p><p>　　大吳風(fēng)草葉片黃酮類化合物含量的季節(jié)變化動態(tài)</p><p>　　圖2.3大吳風(fēng)草葉片黃酮類化合物含量的動態(tài)變化</p&g

31、t;<p>　　Fig.2.3　Dynamics of total flavonoid in Farfugium japnicum Kitam leaf </p><p>　　由圖2.3可知，大吳風(fēng)草葉片中黃酮類化合物含量隨季節(jié)變化逐漸上升，4月份（春季）最低，含量僅為2.06%；隨著生長季節(jié)到來，黃酮含量緩慢上升，6月份比4月份增加15.57%；從6月份至10月份（夏季初至秋季末）變化不顯著，含

32、量在2.5%左右，從10月至12月（冬季）呈明顯上升態(tài)勢，12月份黃酮含量達(dá)到最高為3.73%。</p><p>　　黃酮類化合物對植物生長發(fā)育及抵御侵害等起到重要的作用，光照和溫度可以直接影響到合成途徑中關(guān)鍵酶的活性，是影響黃酮類化合物積累的主要環(huán)境因子，對植株中黃酮的含量有明顯的調(diào)節(jié)作用[9]。從春末到夏初氣溫回升降水增多，大吳風(fēng)草由休眠期進(jìn)入生長期階段，有利于黃酮等次生代謝物質(zhì)累積。黃酮類化合物是UV-B和

33、強(qiáng)光的有效“過濾器”， 所以強(qiáng)光和紫外線輻射對植物體器官黃酮的積累有益[24]。雖然夏季UV-B和強(qiáng)光輻射最大，但大吳風(fēng)草葉片中黃酮含量增加并不明顯，而進(jìn)入冬季UV-B和光照強(qiáng)度均降低，葉片中黃酮含量卻達(dá)到最高峰。這主要是大吳風(fēng)草為陰生植物，生活環(huán)境主要為林下，夏季林間分閉郁度最大，大吳風(fēng)草受到的直接輻射并不強(qiáng)，舟山群島地區(qū)以落葉林為主冬季喬木、灌木樹葉脫落，林分閉郁度最小，大吳風(fēng)草受到的直接輻射卻增強(qiáng)，有利于黃酮類化合物的累積，這有別

34、于這有別于銀杏、落葉松等喬木（喬木夏季受到輻射最強(qiáng)，黃酮含量最高）[12,14] 。 </p><p>　　大吳風(fēng)草葉柄黃酮類化合物含量的季節(jié)變化動態(tài)</p><p>　　圖2.4大吳風(fēng)草葉柄黃酮類化合物的動態(tài)變化 </p><p>　　Fig.2.4　Dynamics of total flavonoid in Farfugium japnicum Kitam p

35、etiole</p><p>　　由圖2.4可知，大吳風(fēng)草葉柄黃酮類化合物含量隨季節(jié)變化先上升后下降趨勢，4月份（春季）含量最低， 6月份比4月份 （春季至夏季初）增加64.58%，6月至8月變化不顯著，8月至10月迅速增加，含量增加68.55%，進(jìn)入冬季后隨之下降，12月較10月份含量降低44.77%。</p><p>　　葉柄中黃酮類化合物含量季節(jié)動態(tài)變化規(guī)律與葉片相似，主要是受到溫度

36、、光照、UV-B等環(huán)境因子的影響。葉柄黃酮類化合物在秋末冬初（10月份）達(dá)到最高峰，這是由于秋末氣溫下降，較低的平均溫度有利于黃酮類物質(zhì)的積累，低溫可以使黃酮類化合物合成途徑中相關(guān)酶的活性大幅度增加[9,25]，這表明黃酮類化合物能夠抵御植物體所受低溫脅迫傷害。冬季葉柄中黃酮類化合物含量降低，這主要是雖然冬季林閉郁度小，UV-B輻射增強(qiáng)，但葉片對葉柄具有“保護(hù)傘”的作用，葉柄受到的直接輻射較弱，同時冬季溫度太低直接影響到合成途徑中關(guān)鍵酶

37、的活性[9]，不利于植物體內(nèi)黃酮類化合物的積累。</p><p>　　大吳風(fēng)草根狀莖黃酮類化合物含量的季節(jié)變化動態(tài)</p><p>　　圖2.5大吳風(fēng)草根狀莖黃酮類化合物含量的動態(tài)變化</p><p>　　Fig.2.5　Dynamics of total flavonoid in Farfugium japnicum Kitam rhizome</p>

38、<p>　　如圖2.5所示，大吳風(fēng)草根狀莖中總黃酮含量隨季節(jié)的變化較之葉片和葉柄波動小，4月份含量最低，僅為1.05%，隨后小幅度升高，6月份比4月份增加33.02%，但8月份相比6月份下降23.94%，8月過后上升勢態(tài)顯著，10月份達(dá)到最高峰，12月份相對于10月又下降19.25%。</p><p>　　大吳風(fēng)草根狀莖中黃酮類化合物含量最低，僅為葉片的30%-50%。這主要是根狀莖位于地下，強(qiáng)光輻

39、射和UV-B輻射對其黃酮類化合物的合成和積累的促進(jìn)作用很弱，而且地下溫差小，高溫及低溫等環(huán)境因子的促進(jìn)作用也有限。10月份含量達(dá)到最高峰，主要源于較低的平均溫度有利于黃酮類物質(zhì)的積累，機(jī)制與葉柄基本一致，10-12月份，可能是冬季溫度太低直接影響到合成途徑中關(guān)鍵酶的活性[9]，不利于植物體內(nèi)黃酮類化合物的積累。</p><p><b>　　討論</b></p><p>

40、;　　植物體內(nèi)黃酮類化合物是以出生代謝物質(zhì)葡萄糖分別經(jīng)過莽草酸途徑和乙酸-丙二酸途徑生成羥基桂皮酸和三個分子的乙酸，然后合成查爾酮，再衍變而成的酚類此生代謝物質(zhì)[9]。其對植物生長、發(fā)育、開花、結(jié)果以及抗紫外線灼傷、抵抗病菌入侵、吸引昆蟲授粉等起著重要的作用[6]，合成過程受到苯丙氨酸解氨酶（PLA）、查爾酮合成酶(CHS)、查爾酮異構(gòu)酶(CHI)、黃烷酮醇還原酶(DFR)、異黃酮合成酶(IFS)等系列酶的調(diào)控[9]，除遺傳和生物因素外

41、，光照、溫度、濃度、礦質(zhì)營養(yǎng)和土壤水分等環(huán)境因素均影響植物體黃酮類化合物的合成和積累[9,24,25]。其中光照和溫度的調(diào)節(jié)作用最明顯，W. Wen-jie等[14]對興安落葉松不同器官中黃酮含量的動態(tài)變化研究結(jié)果表明：太陽輻射可提高葉片中黃酮類化合物合成（R2= 0.76）；J.Peter Christie等[26]報道：將玉米幼苗置于10℃的低溫環(huán)境中，查爾酮異構(gòu)酶(CHI) 的基因轉(zhuǎn)錄水平在前6h大幅度增加，黃酮合成量明顯增加。&

42、lt;/p><p>　　本文研究結(jié)果表明：大吳風(fēng)草不同器官黃酮含量存在季節(jié)差異和空間差異，不同器官之間差異顯著，同一器官季節(jié)性差異也很明顯。光照差異是造成器官之間黃酮類化合物含量差異的主要原因，大吳風(fēng)草葉片覆蓋面積大，對葉柄有遮光作用，根狀莖在地下所受強(qiáng)光和UV-B輻射更弱，因此大吳風(fēng)草器官黃酮類化合物含量高低順序為葉片＞葉柄＞根狀莖，這一結(jié)果表明黃酮類化合物含量與太陽輻射呈正相關(guān)，與W. Wen-jie[14]、楊

43、蓓芬[27]等學(xué)者的研究結(jié)果相似。呂兆林等[28]對毛竹、苦竹、綠竹及黃甜竹竹葉黃酮類化合物一年四季變化規(guī)律的研究表明：從秋季、冬季、春季至夏季，4 種竹葉總黃酮含量呈上升的趨勢，即夏季器官中黃酮類化合物含量最高；唐春風(fēng)等[29]研究生長季節(jié)朝鮮淫草藿中黃酮類化合物含量的影響發(fā)現(xiàn)：朝鮮淫草藿在夏初（5月份）黃酮含量最高。這主要是由于黃酮類化合物是UV-B和強(qiáng)光的有效“過濾器”，夏季太陽輻射最強(qiáng)，有益于黃酮合成和積累。但大吳風(fēng)草屬于陰生植

44、物，夏季林閉郁度大，太陽輻射對黃酮類化合物合成和積累的促進(jìn)作用微弱，效果不明顯，而秋季林郁閉度減小后，器官中黃酮類化合物含量均明顯增加，特別是葉片在林郁閉度最小的1</p><p>　　近年來，黃酮類化合物在醫(yī)藥、防腐保鮮、抗氧化等領(lǐng)域的功能已得到廣泛報道，特別是其抗癌、防癌作用[31,32]使掀起了生物類黃酮的研究、開發(fā)利用熱潮。大吳風(fēng)草是一種尚未規(guī)模開發(fā)利用的藥膳同源新資源，在醫(yī)藥、食品領(lǐng)域前景廣闊。本文研究

45、結(jié)果表明，大吳風(fēng)草器官黃酮類化合物含量較高，葉片、葉柄中黃酮類物質(zhì)高于地下根狀莖，并且大吳風(fēng)草為多年生常綠植物，采摘部分葉片、葉柄不影響植株的繼續(xù)生長繁殖，而挖掘地下根狀莖會傷及其生命，影響資源的可持續(xù)利用和保護(hù)，綜上而言大吳風(fēng)草的葉片、葉柄在藥用黃酮類物質(zhì)提取方面的利用價值優(yōu)于地下根狀莖；葉片和葉柄中的黃酮類物質(zhì)含量從春末到冬初均呈現(xiàn)不同程度的增長趨勢，葉柄和葉片的黃酮類物質(zhì)含量高峰期分別出現(xiàn)在10月份和十12月份，因此在最合適的采收

46、季節(jié)應(yīng)該選擇為冬季，如果以采收葉片為主則選擇冬末時節(jié)，若以葉柄為主則選擇初冬時節(jié)。另外，黃酮類化合物合成過程受到笨丙氛故解氛醉、查爾酮合成酶、查爾酮異構(gòu)騰、黃烷酮醉還原酶、異黃酮合成酶等系列酶的調(diào)控, 而這些酶的活性及其分子合成水平又受到光照、溫度、水分、礦物質(zhì)等環(huán)境因素的影響[9-14]，強(qiáng)光照和低溫對黃酮類化合物合成和積累的</p><p><b>　　結(jié)論</b></p>

47、<p>　　大吳風(fēng)草不同器官黃酮含量存在季節(jié)差異和空間差異，不同器官之間差異顯著，同一器官季節(jié)性差異也很明顯。具體如下：</p><p>　?。?）大吳風(fēng)草的不同器官中黃酮含量差異較大，葉片中黃酮類物質(zhì)含量最高，葉柄次之，根狀莖最低，葉片黃酮含量為根狀莖2~3倍，葉柄較根狀莖略高但相差不大。</p><p>　　（2）大吳風(fēng)草葉片中黃酮類化合物含量隨季節(jié)變化逐漸上升，4月份（春

48、季）最低，從6月份至10月份變化不顯著，12月份達(dá)到最高峰；葉柄黃酮類化合物含量變化動態(tài)為隨季節(jié)變化先上升后下降，4月份含量最低，之后逐漸增加，10月份達(dá)到含量最高峰；根狀莖中總黃酮含量隨季節(jié)的變化較之葉片和葉柄波動小，4月份含量最低，10月份含量最高，其它月份差異不大。</p><p>　　合理開發(fā)大吳風(fēng)草資源在優(yōu)化大吳風(fēng)草的種植、資源保護(hù)及其黃酮類化合物的高效提取等方面意義重大，建議如下：</p>

49、<p>　?。?）以大吳風(fēng)草為材料提取黃酮時，如果以采收葉片為主則選擇冬末時節(jié)，若以葉柄為主則選擇初冬時節(jié)，不宜選擇地下根狀莖為對象提取黃酮。</p><p>　?。?）強(qiáng)光照和低溫對黃酮類化合物合成和積累的促進(jìn)作用顯著，建議藥農(nóng)在合理程度內(nèi)增加光照強(qiáng)度和溫度脅迫從而促進(jìn)其體內(nèi)黃酮類化合物的積累，提高黃酮提取得率，增加其藥用附加值。</p><p><b>　　參考

50、文獻(xiàn)</b></p><p>　　[1] 中國科學(xué)院中國植物志編輯委員會.中國植物志（77卷第二分冊）[M].北京：科學(xué)出版社，1989，1-4.</p><p>　　[2] 劉健全.大吳風(fēng)草（菊科：千里光族）的核形態(tài)及其系統(tǒng)學(xué)意義[J].西北植物學(xué)報，2001，21（1）159-163.</p><p>　　[3] 汪正祥，劉勝祥，雷耘，等. 后河自然

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65、d T echno l. , 1994( 48) : 121～124</p><p><b>　　致謝</b></p><p>　　本課題設(shè)計、執(zhí)行過程均在馬、崔老師悉心指導(dǎo)下完成，特向二位導(dǎo)師致以衷心的感謝；同時感謝同學(xué)共同參與本課題的研究及實驗過程中對本人的幫助。</p><p>　　謹(jǐn)向參與本文評閱和答辯的各位老師致以誠摯的謝意！<