稻瘟病菌對三個水稻品種無毒性的遺傳分析及分子標記.pdf

1、建立良好的稻瘟病菌的有性雜交體系和優(yōu)化培養(yǎng)條件是進行無毒性遺傳分析的前提.該研究首先選用自然成熟的番茄榨汁和燕麥片作為培養(yǎng)基的主要組分,通過調節(jié)培養(yǎng)基pH值在5.5左右并添加0.1﹪CaCO<,3>途徑優(yōu)化了稻瘟病菌有性世代形成的條件,顯著增加了稻瘟病菌子囊殼形成的數(shù)量和子囊孢子的成活率.觀察發(fā)現(xiàn),雖然不同雜交組合間有一定差異,分離稻瘟病菌子囊孢子的適宜時期,一般在子囊殼開始出現(xiàn)后7~18天之間;在此期間分離出的子囊孢子成活率最高可達8

2、5.5﹪.此外,還建立了一種分離單子囊孢子的簡便易行方法.該研究組建了稻瘟病菌的9個有性雜交組合,從中共分離出500多個子囊孢子菌株,分別測定了它們在相應水稻品種梅雨明、石狩白毛和愛知旭上的無毒性分離情況.為了獲得與稻瘟病菌無毒基因AVR-Pii和AVR-Pia連鎖的分子標記,從近500個隨機引物中篩選出2個引物OPI07和OPM10,可以擴增出與無毒基因AVR-Pii連鎖的標記,分別定名為OPI07<,700>和OPM10<,1314