液相色譜法測定飼料中三聚氰胺的含量的研究.pdf

1、三聚氰胺是一種化工原料，由于其含氮量高，一般的全氮測定法檢測飼料和食品中的蛋白質(zhì)含量時(shí)無法排除這類偽蛋白氮的干擾，而被一些不法廠商用于降低成本，以提高產(chǎn)品蛋白質(zhì)含量。目前，據(jù)報(bào)道，已有多起寵物信用添加三聚氰胺的飼料死亡事件。因此，本文針對飼料檢驗(yàn)中的三聚氰胺檢測方法進(jìn)行研究，旨在探討快速檢測三聚氰胺的檢測方法。本文主要的研究對象為市售各類飼料及動(dòng)植性原料中的三聚氰胺。
　　 論文主要研究內(nèi)容如下：
　　 (1)利用常用的

2、C18柱進(jìn)行分離，利用檸檬酸-辛烷磺酸鈉離子對溶液與乙腈混合的流動(dòng)相對三聚氰胺實(shí)現(xiàn)了較好的分離，通過對離子對試劑的濃度、pH、有機(jī)相比例的研究，結(jié)果表明：較低的離子對試劑濃度(0.01M)、酸性條件下(pH=3.0)、較低的有機(jī)相比例即可很好實(shí)現(xiàn)三聚氰胺的分離。最終確定流動(dòng)相為：0.01M檸檬酸-辛烷磺酸鈉溶液：乙腈=9:1,pH3.0。
　　 (2)研究不同溶液對于飼料的提取效果，確定了提取溶液配比。三聚氰胺呈弱堿性，在對各種

3、飼料中的三聚氰胺檢測前處理方法進(jìn)行研究時(shí)，通過比較甲醇：水(V/V)=1:1、乙腈：水(V/V)=1:1、乙腈：水(V/V)=7:3、1％三氯乙酸、1％三氯乙酸：乙腈(V/V)=4:1溶液等不同提取液的提取效果，結(jié)果表明：三聚氰胺在1％三氯乙酸：乙腈( V/V)=4:1溶液中可以較好的溶解，且三氯乙酸具有沉淀蛋白質(zhì)的作用，有利于避免雜質(zhì)的混入。最終確定1％三氯乙酸：乙腈(V/V)=4:1溶液作為提取溶液。
　　 (3)研究三聚氰

4、胺最大吸收波長，發(fā)現(xiàn)三聚氰胺在210nm和238nm處有明顯的吸收峰；由于210nm處可能會(huì)有較多的雜質(zhì)干擾，因而最終確定在238nm處進(jìn)行三聚氰胺的檢測。同時(shí)通過光電二極管陣列檢測器(DAD)進(jìn)行光譜比對，增強(qiáng)結(jié)果的可靠性。
　　 (4)將優(yōu)化的方法應(yīng)用于不同的飼料樣品，進(jìn)行添加樣品的回收率實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該法可以很好地應(yīng)用于各類飼料的三聚氰胺提取檢測。在添加水平為2ppm時(shí)，RSD＜5％。在1-10ppm添加水平時(shí)，回收

5、率均達(dá)到90％以上，證明該法是三聚氰胺的檢測的可靠方法，適用于各種飼料樣品。
　　 (5)利用優(yōu)化的提取方法及色譜條件，對市售64種飼料與動(dòng)、植物性原料進(jìn)行了三聚氰胺檢測。結(jié)果表明，目前市場上市售飼料未發(fā)現(xiàn)三聚氰胺檢出，而在植物性原料中發(fā)現(xiàn)極少數(shù)超過標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果表明，目前市售飼料基本為合格安全的。
　　 通過本文的研究結(jié)果將為飼料中三聚氰胺快速檢測提供一種有效可靠的方法。通過該方法對目前市售飼料進(jìn)行檢測，結(jié)果表明市售飼料基