甜、糯玉米品種標準DNA指紋技術的研究及應用.pdf

1、本文以165個甜、糯玉米雜交品種為材料，以普通玉米DNA指紋技術為基礎，探討了不同方法提取的甜、糯玉米DNA對指紋圖譜的影響，篩選出10對核心引物，構(gòu)建了甜、糯玉米品種標準DNA指紋數(shù)據(jù)庫，并首次對甜、糯玉米品種進行了純度和真實性鑒定。主要結(jié)果如下： 1.建立了適合甜、糯玉米品種DNA分析的SSR技術體系。包括DNA提取(種子DNA、葉片DNA)，PCR擴增體系(20μL反應液中包括：11.4μLddH2O，2μL1×Buffe

2、r，2μL2.5 mmol/L MgCl2，0.4μL0.15 mmol/L dNTP，2μL0.25μmol/L SSR引物，0.2μL1U Taq DNA聚合酶，2μL DNA模板)，變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、改進的銀染顯色等。 2.引物篩選：從普通玉米的40對SSR核心引物中篩選出多態(tài)性豐富，帶型清晰，重復性好的核心引物，綜合考慮擴增帶型統(tǒng)計的難易及引物的重復性高低，確定bnlg439、bnlg125、umc2105、phi

3、072、umc1705、bnlg161、bnlg1792、phi080、phi065、bnlg1450共10個引物對作為甜、糯玉米品種鑒定和指紋庫構(gòu)建的核心引物。 3.構(gòu)建我國甜、糯玉米品種的DNA指紋庫。按照甜、糯玉米的SSR技術體系，構(gòu)建了通過一致性和真實性檢測的甜、糯玉米共62個品種的DNA指紋庫。 4.利用SSR分子標記技術進行甜、糯玉米品種的純度檢測是可行的。純度檢測結(jié)果：2006年一致性差、較差的甜、糯玉米共