長樂文蛤5個殼色花紋群體的分子鑒定【開題報告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報告</b></p><p><b>　　生物工程</b></p><p>　　長樂文蛤5個殼色花紋群體的分子鑒定</p><p>　1．課題研究意義及國內(nèi)外研究現(xiàn)狀研究意義：文蛤主要產(chǎn)于沿海一帶，其經(jīng)濟(jì)價值高、營養(yǎng)豐富、肉質(zhì)鮮美，而且具有很高的食療藥用價值。文蛤的外殼呈扇狀，表面

2、光滑并布有美麗的紅、褐、黑等如釉涂就的五彩花紋，精美細(xì)致。對長樂文蛤5個殼色花紋群體進(jìn)行分子鑒定，分析不同文蛤群體的遺傳差異和系統(tǒng)關(guān)系，首先能從分子水平上對長樂文蛤進(jìn)行有利分類，突破了傳統(tǒng)的分類方法，更有利與物種的鑒定；再者通過構(gòu)建指紋圖譜找出不同文蛤群體的遺傳多樣性，有利于種質(zhì)資源評價。國內(nèi)外研究現(xiàn)狀：AFLP技術(shù)，是1993年由荷蘭科學(xué)家Zebeau和Vos創(chuàng)建的一種新型DNA分子標(biāo)記技術(shù)，它集RFLP（Restriction Fr

3、agment Length Polymorphism，限制性片段長度多態(tài)性）技術(shù)的穩(wěn)定性和RAPD技術(shù)的高效性于一身，具有所需DNA量小、標(biāo)記信息量大、多態(tài)性豐富、靈敏度高、快速高效、所得數(shù)據(jù)穩(wěn)定可靠等諸多優(yōu)點，對于遺傳背景了解不多的海洋貝類，AFLP已經(jīng)成為一種主流的研究技術(shù)。陳省平等（2005）對我國4種主要養(yǎng)殖扇貝——櫛孔扇貝、華貴櫛孔扇貝、蝦夷扇貝、海灣扇貝的群體遺傳多樣性及特異性AFLP標(biāo)記進(jìn)行了研</p>&l

4、t;p>　2．課題研究的主要內(nèi)容、預(yù)期目標(biāo)和研究方案研究內(nèi)容：①建立AFLP技術(shù)體系：確定全基因組DNA適宜的酶切、連接條件；建立穩(wěn)定、高效的PCR擴(kuò)增體系和擴(kuò)增條件；篩選出適合不同文蛤群體的PCR選擇性引物；建立穩(wěn)定的瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠電泳體系；掌握數(shù)據(jù)分析軟件。②通過群體遺傳結(jié)構(gòu)分析，找出不同文蛤群體間的AFLP分子標(biāo)記的遺傳差異和系統(tǒng)關(guān)系，確定文蛤種群分子水平的分類，以及種質(zhì)資源評價。 預(yù)期目標(biāo)：AFLP技術(shù)體系的建立，

5、確定不同文蛤群體間的遺傳差異和系統(tǒng)關(guān)系，為種質(zhì)資源的評定提供有力工具。研究方案：AFLP標(biāo)記技術(shù)體系的快速建立→AFLP引物的篩選→簾文蛤不同殼色花紋品系的AFLP標(biāo)記分析，找出與殼色基因連鎖的分子標(biāo)記，用于選種效果評價和分子標(biāo)記輔助育種。①AFLP標(biāo)記技術(shù)體系的快速建立：初步掌握了實驗流程和分析體系，在短期內(nèi)建立穩(wěn)定的AFLP技術(shù)體系；②AFLP引物的篩選：查閱文獻(xiàn)，參考其他貝類中擴(kuò)增效果較好的引物，先粗略篩選，以縮短篩選時間和降低成

6、本，然后通過反復(fù)試驗篩選最佳引物；③不同文蛤群體的AFLP標(biāo)記分析：采集選育5個群體個體各24枚，活體解剖，用閉殼肌提取DNA，通過AF</p><p>　3．課題進(jìn)度計劃2011年9月—2011年10月 查閱文獻(xiàn)，確定實驗方法，完成實驗設(shè)計，準(zhǔn)備實驗材料；2011年10月—2011年11月 系統(tǒng)收集資料，開始進(jìn)行實驗，提取DNA并編號；2011年12月—2012年1月 進(jìn)行實驗，記錄關(guān)鍵性的實驗步驟和實驗數(shù)

7、據(jù)；2012年2月—2012年3月 數(shù)據(jù)的整理以及完成論文初稿。</p><p>　參考文獻(xiàn)[1] 陳省平,包振民,潘潔,等.4種養(yǎng)殖扇貝的群體遺傳多樣性及特異性AFLP標(biāo)記研究[J].海洋學(xué)報,2005,27(2):160-164.[2] 安麗,劉萍,李健,等."黃海1號"中國對蝦不同世代間的AFLP分析[J].中國海洋大學(xué)學(xué)報,2008,38(6):921-926.[3] 周賀,秦艷杰

8、,周伯文,等.4種扇貝AFLP分析體系的建立[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報,2009,24(S1):56-58.[4] 孟鵬,劉曉敏,王偉繼,等.中國對蝦家系水平遺傳多樣性的AFLP分析[J].海洋水產(chǎn)研究,2008,29(3):21-26.[5] Agresti J J,Seki S,CnaaniA,et al.Breeding new strains of tilap ia:development of an artificial cen