養(yǎng)殖魚鄰苯二甲酸酯含量分析【畢業(yè)論文】

1、<p>　　本科畢業(yè)論文（設(shè)計）</p><p>　　論文題目：養(yǎng)殖魚鄰苯二甲酸酯含量分析</p><p>　　所在學院 生物與環(huán)境學院 </p><p>　　專業(yè)班級 環(huán)境工程 </p><p>　　學生姓名 學號 </p&g

2、t;<p>　　指導教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 日</p><p><b>　　摘 要</b></p><p>　　本實驗采用CO2超臨界萃取法和液液超聲萃取法對養(yǎng)殖魚進行預處理，實驗數(shù)據(jù)顯示液液超聲萃取法數(shù)據(jù)最全面、顯

3、著、操作簡便、費用低以及耗時短，因此本實驗采用液液超聲萃取-氣質(zhì)聯(lián)用法（GC-MS）對寧波市各菜市場的淡水養(yǎng)殖魚類體內(nèi)DMP、DEP、DIPP、DPP、DBP、BBP、DEHP和DOP的含量進行檢測。實驗數(shù)據(jù)顯示魚體主要殘留物質(zhì)是DMP（0.0229-0.134µg/g）、DEP（0.0189-0.248µg/g）、DBP（0.0329-0.249µg/g）、DEHP（0.148-0.831µg/

4、g），DOP（0.182-5.03µg/g），未檢測出DIPP、DPP、BBP。鯽魚體內(nèi)PAEs的PPI平均值最高，為0.612；黑魚體內(nèi)PPI平均值為0.429，PAEs含量普遍比其他魚種低。結(jié)論表明養(yǎng)殖魚類受PAEs的污染狀況隨水體環(huán)境和自身的富集能力不同存在較大差異。</p><p>　　關(guān)鍵詞：魚；鄰苯二甲酸酯；液液超聲萃取；氣相色譜-質(zhì)譜法</p><p><b&

5、gt;　　ABSTRACT</b></p><p>　　The experiment use supercritical fluid extraction and liquid-liquid extraction to pretreatment the fish. Experiment result showed that the liquid-liquid extraction is the mos

6、t comprehensive，significant，easy operation，low cost and short time-consuming. For this reason Phthalic acid esters—DMP，DEP，DIPP，DPP，DBP，BBP，DEHP and DOP amounts in fish were detected by liquid-liquid extraction-GC/MS. Th

7、e samples were collected from Ningbo markets. Experiment result showed that PAEs were detected in all samp</p><p>　　Key Words： Fish；Liquid-liquid extraction；Phthalates；GC-MS</p><p><b>　　目

8、 錄</b></p><p><b>　　1 前言2</b></p><p>　　1.1 PAEs的危害與來源2</p><p>　　1.2 PAEs對水體的影響2</p><p>　　1.3 水生生物中PAEs的研究3</p><p>　　1.4 氣相色譜-質(zhì)譜法在PAEs分

9、析中的應(yīng)用4</p><p>　　1.5 本研究的主要內(nèi)容和意義5</p><p><b>　　2 實驗部分5</b></p><p>　　2.1 材料和試劑5</p><p>　　2.1.1 材料5</p><p>　　2.1.2 試劑5</p><p>&l

10、t;b>　　2.2 儀器5</b></p><p><b>　　2.3實驗方法6</b></p><p>　　2.3.1 樣品提取方法6</p><p>　　2.3.2 鄰苯二甲酸酯標液制備及分析6</p><p>　　2.3.3 GC-MS測定條件7</p><p>

11、;<b>　　3 結(jié)果與討論7</b></p><p>　　3.1 標準溶液的分析7</p><p>　　3.2 不同萃取方法的比較9</p><p>　　3.3 不同萃取劑的比較10</p><p>　　3.4 液液超聲萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測定養(yǎng)殖魚中鄰苯二甲酸酯含量12</p><

12、p>　　3.4.1 各養(yǎng)殖魚中PAEs含量比較13</p><p>　　3.4.2 各養(yǎng)殖魚中PAEs的PPI值比較14</p><p><b>　　4 結(jié)論15</b></p><p><b>　　參考文獻16</b></p><p><b>　　致謝18</b&g

13、t;</p><p><b>　　1 前言</b></p><p>　　1.1 PAEs的危害與來源</p><p>　　PAEs（Phthalic acid esters）是鄰苯二甲酸酯的簡稱，是一類重要的有機化合物，常被用作塑料的增塑劑，主要用于聚氯乙烯材料。常見的PAEs有鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二乙酯（DEP）、鄰苯二甲酸

14、異丙酯（DIPP）、鄰苯二甲酸二丙酯（DPP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸丁芐酯（BBP）、鄰苯二甲酸乙基己基酯（DEHP）和鄰苯二甲酸正辛酯（DOP），這些PAEs在很多化妝品、玩具、食品包裝中都存在，它們在環(huán)境中穩(wěn)定、持久，通常具有生物積累效應(yīng)和放大效應(yīng)，可進入食物鏈危害人類的健康安全。研究表明，PAEs可損害雄性的生育力，干擾雄性生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)，使精子數(shù)量減少、形態(tài)異常[1]。PAEs還可作用于細胞的染色體，使染色體的

15、數(shù)目或結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，從而使一些組織、細胞的生長失控，產(chǎn)生腫瘤。如發(fā)生在生殖細胞，則可造成流產(chǎn)、畸胎或遺傳性疾病[2]。</p><p>　　環(huán)境中PAEs的來源包括天然來源和人工合成。PAEs的天然來源比較廣泛，在一些植物組織中都含有這類物質(zhì)，部分微生物也有合成PAEs的能力。由于PAEs與塑料分子的相容性很好，它們之間由氫鍵或范德華力連接，保留各自相對獨立的化學性質(zhì)，因此隨塑料使用時間的推移，可由其轉(zhuǎn)移到環(huán)境中

16、，造成對空氣、水體以及土壤的污染，并且干擾其它生物的正常生長，成為環(huán)境中無所不在的污染物，從而能在環(huán)境中普遍檢測出[3]。因此，研究養(yǎng)殖魚體鄰苯二甲酸酯的污染現(xiàn)狀，對于鄰苯二甲酸酯的防治工作有著積極意義。</p><p>　　1.2 PAEs對水體的影響</p><p>　　水體中（包括地表水和地下水）的的來源主要有兩大途徑：直接途徑是含有該類化合物工業(yè)廢水的排放，固體廢棄物的堆積和雨水淋

17、洗以及塑料的緩慢釋放；間接途徑是該類化合物首先排入大氣，然后通過干沉降或雨水淋洗而轉(zhuǎn)入水環(huán)境中。由于土層的吸附過濾作用和天然凈化作用，地下水中的含量一般低于地表水[4]。</p><p>　　呂怡兵[5]等在探查海河流域PAEs 污染情況時發(fā)現(xiàn)，PAEs在海河干流中廣泛存在，其中DBP、DEHP濃度較高，共占PAEs的72.7% ~ 96.2%，海河入海口斷面的DBP和DEHP含量分別為5.10µg/L

18、和8.10µg/L；唐曉先[6]等在巢湖水中鄰苯二甲酸酯安全性評價中檢測出DMP的最高質(zhì)量濃度為3.15µg/L、DEP的最高質(zhì)量濃度為1.82µg/L、DBP的最高質(zhì)量濃度為12.95µg/L，鄰苯二甲酸二異辛酯最高為7.21µg/L；魏薇[7]等開展松花江吉林段水體中鄰苯二甲酸酯的分布規(guī)律研究，結(jié)果表明，松花江吉林段水體中主要的鄰苯二甲酸酯類污染物是DBP和DOP，其分布的總體趨勢是

19、更易存在于水相中；楊梅[8]等分別采集了重慶典型巖溶區(qū)5條地下河水體10個樣品，用氣相色譜法對樣品中的PAEs含量進行測定，分析其在重慶典型巖溶區(qū)地下河水體中的分布特征。結(jié)果表明，常見的19種PAEs在重慶典型巖溶區(qū)地下河水體中均有檢出，其濃度范圍為103.29~2268.78µg/L；郭志順[9]等對三峽庫區(qū)重慶段水域中持久性有機污染物的污染狀況進行分析，結(jié)果表明，鄰苯二甲酸酯類檢出率比較高</p><p

20、>　　1.3 水生生物中PAEs的研究</p><p>　　隨著水體中PAEs污染的日益增多，水體有機物污染情況越來越嚴重。許多國家的大氣、水體、動物體內(nèi)和土壤中均含有PAEs，我國的大氣、水體、生物等各種環(huán)境樣品中也廣泛檢出了PAEs。郭冬梅[10]等采用超聲萃取和柱分離技術(shù)，利用氣相色譜法，對棉田環(huán)境激素類污染物質(zhì)鄰苯二甲酸酯進行了表層土壤（0-20cm）分布測定。結(jié)果表明，土壤中PAEs的總含量為1.

21、53µg/g。王立鑫[11]等進行了室內(nèi)空氣中鄰苯二甲酸酯暴露量分析，分析結(jié)果表明：我國室內(nèi)DMP、DEP和DEHP的濃度（氣相、顆粒相和降塵）明顯高于發(fā)達國家。</p><p>　　魚類作為重要蛋白質(zhì)來源之一，其衛(wèi)生安全與人的身體健康緊密聯(lián)系，特別是我國養(yǎng)殖魚類產(chǎn)量遠超過天然捕撈魚類，養(yǎng)殖魚類體內(nèi)PAEs的殘留狀況尤為值得關(guān)注[12]。張?zhí)N暉[13]等采集上海及周邊杭州灣和運河地區(qū)的水樣、土樣、底泥及

22、魚、蝦、蟹等水生生物樣品，采用反相高效液相色譜法測定了其中DEP、DBP和DEHP的含量。結(jié)果表明水生生物含PAEs最高，且魚類和河蚌最易富集。Adeleke A. Adeniyi[14]等用氫火焰離子化-氣相色譜法對魚類中的四種鄰苯二甲酸酯類（DMP、DEP、DBP和DEHP）進行定量測定，分析結(jié)果表明，DMP均未檢測出，魚類中DEP、DBP和DEHP最高變化范圍分別為0.0310-0.0860µg/g、0.400-3.97

23、µg/g和0.030-0.300µg/g；李瀟[12]等調(diào)查珠江三角洲及香港地區(qū)的養(yǎng)殖池塘3種淡水養(yǎng)殖魚類（草魚、鯽魚和羅非魚）體內(nèi)6種PAEs的含量與分布特征，分析結(jié)果表明：珠江三角洲地區(qū)鯽魚、草魚、羅非魚體內(nèi)DEHP含量分別高達16.1、19.8和11.0µg/g；DBP和鄰苯二甲酸丁辛酯（BOP）在3種魚類體內(nèi)的含量在3.00～10.0µg</p><p>　　1.4

24、 氣相色譜-質(zhì)譜法在PAEs分析中的應(yīng)用</p><p>　　氣相色譜-質(zhì)譜法是一種利用氣相色譜沖洗法的色譜分離技術(shù)以及通過質(zhì)譜測定被測樣品離子的質(zhì)荷比（M/e）來進行分析的一種技術(shù)。它既具有色譜法的高分離能力，也具備質(zhì)譜良好的定性、定量性能和高的檢測靈敏度（10-12g），可同時準確、快速地測定環(huán)境中多種有機污染物，尤其適用于易揮發(fā)或易衍生化合物的分析[16]。近年來，GC-MS已成為環(huán)境中有機化合物常規(guī)檢測的

25、必備工具。目前，國外學者對其基礎(chǔ)理論研究還有應(yīng)用開發(fā)研究都有很大的進展。我國在這方面起步比較晚，但發(fā)展較快，相關(guān)研究人員利用其能快速精確地分析出萃取物的結(jié)構(gòu)、濃度和純度的優(yōu)點，解決了許多環(huán)境問題。</p><p>　　陳慧等[17]采用流量采樣器，用超聲波提取，用GC-MS/SIM法對焦化廠及廠區(qū)大氣氣溶膠中EPA制定優(yōu)先監(jiān)測的16種PAHs組成進行了定量分析，該方法的檢出限為0.167pgm-3，PAHs的回收

26、率為85.1%~110.5%，相對標準偏差為4.62%~19.4%，回歸曲線的線性相關(guān)系數(shù)為0.9957~0.9998，檢測靈敏度較高。黃永輝[18]建立了氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）法，采用分段選擇離子監(jiān)測（SIM）模式，同時測定了塑料玩具中22種鄰苯二甲酸酯類（PAEs）增塑劑的含量。結(jié)果表明：該方法具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均大于0.999，檢測限在1.28~128.91 mg/kg之間，平均回收率70.83%~107.95%，

27、相對標準偏差3.61%~9.79%。該方法操作簡單，靈敏度高，重現(xiàn)性好，能滿足塑料玩具中PAEs含量的檢測需求。陳軍[19]等，采用加速溶劑萃?。ˋSE）和GC/MS 聯(lián)用技術(shù)分析5 種PAEs（DMP，DEP，DBP，BBP，DEHP），結(jié)果表明該方法檢出限達到0.1mg/kg，回收率達到95.5%～99.8%；并且具有很好的重現(xiàn)性和精密度。從上述文獻可知，</p><p>　　1.5 本研究的主要內(nèi)容和意義&

28、lt;/p><p>　　近年研究表明鄰苯二甲酸酯類化合物除具有一般毒物所具有的毒性外，還具有內(nèi)分泌干擾毒性和致癌、致畸、致突變等毒性。因此，研究這類污染物在生態(tài)系統(tǒng)的分布特征以及含量具有重要的理論意義。本文通過液液超聲萃取-GC/MS法測定寧波養(yǎng)殖魚體中鄰苯二甲酸酯的含量和分布特征分析。了解寧波周圍淡水魚養(yǎng)殖區(qū)魚體內(nèi)PAEs的污染狀況，這對保護消費者身體健康具有重要意義。</p><p>&l

29、t;b>　　2 實驗部分</b></p><p><b>　　2.1 材料和試劑</b></p><p><b>　　2.1.1 材料</b></p><p>　　于2011年11月份和12月份分別在寧波6個市場購買草魚、鳊魚、花鰱魚、鯽魚和黑魚。將買來的魚，去鱗、臟、腮、頭、尾、皮和鰭于50℃烘箱中烘4

30、8h，再用高速粉碎機將魚肉粉碎成粉狀，裝袋備用。</p><p><b>　　2.1.2 試劑</b></p><p>　　DMP(國藥集團化學試劑有限公司，99%)、DEP(國藥集團化學試劑有限公司，99%）、DIPP（上海晶純試劑有限公司，98%）、DPP(國藥集團化學試劑有限公司，98%）、BBP（梯希愛化成工業(yè)發(fā)展有限公司，98%）、DBP（國藥集團化學試劑有

31、限公司，99.5%）、DEHP（國藥集團化學試劑有限公司，99%）、DOP（國藥集團化學試劑有限公司，99%），正己烷、二氯甲烷均為色譜純（天津市化學試劑研究所）。</p><p><b>　　2.2 儀器</b></p><p>　　Trace DSQⅡ型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國熱電公司）；SFE-2型超臨界儀器（美國ASI公司）；BS224S型電子天平（北京賽多

32、利斯儀器系統(tǒng)有限公司）；SL280A型粉碎機（上海蘇泊爾股份）；DHQ-9203AS型電熱恒溫鼓風干燥箱（寧波江南儀器廠）。SK8200H型超聲波清洗儀（上?？茖С晝x器有限公司）。</p><p><b>　　2.3實驗方法</b></p><p>　　2.3.1 樣品提取方法</p><p><b>　　（1）液液超聲萃取<

33、/b></p><p>　　液液超聲萃取分離過程的原理分別是先是在靜止狀態(tài)下利用兩種不相溶的液相之間物化性質(zhì)的差異來進行物質(zhì)的差別分配，從而使溶質(zhì)從一相轉(zhuǎn)移至另外一相，再利用超聲波輻射壓強產(chǎn)生的強烈空化效應(yīng)、擾動效應(yīng)、高加速度、擊碎和攪拌作用等多級效應(yīng)，增大物質(zhì)分子運動頻率和速度，增加溶劑穿透力，從而加速目標成分進入溶劑，促進提取的進行，萃取待測物質(zhì)。其優(yōu)點是大大縮短了萃取時間，操作簡便。本論文采用正己烷、

34、二氯甲烷和兩者1:1混合液溶解萃取。</p><p>　　實驗步驟：稱取3g左右養(yǎng)殖魚粉于30mL比色管中，加入10mL正己烷、二氯甲烷1:1混合液，振蕩30min，在超聲儀中超聲15min，靜止一會，再次超聲15min，靜止抽取上清液，最后進行有機濾頭過濾操作，存于GC-MS配套的貯液瓶中，放置暗處，用GC-MS檢測分析。</p><p>　?。?）CO2超臨界萃取</p>

35、<p>　　CO2超臨界萃取分離過程的原理是作為溶劑的超臨界流體與被萃取物料接觸，使物料中的某些組分（稱萃取物）被超臨界流體溶解并攜帶，從而與物料中其他組分（萃余物）分離，之后通過降低壓力或調(diào)節(jié)溫度，降低超臨界流體的密度，從而降低其溶解能力，使超臨界流體解析出其所攜帶的萃取物，達到萃取分離的目的。</p><p>　　實驗條件及步驟：萃取壓力為25MPa，萃取溫度為50℃，萃取時間為1小時。取魚樣粉末

36、3.0g裝入料筒中，在CO2超臨界萃取條件下運作1小時，取2mL色譜甲醇將萃取物溶解，再進行有機濾頭過濾，存于GC-MS配套的貯液瓶中，放置暗處，最后進行GC-MC分析。</p><p>　　2.3.2 鄰苯二甲酸酯標液制備及分析</p><p>　　1）PAEs儲備液：取一只10mL容量瓶，在分析天平上稱重去皮，分別用微量移液器取0.005g上述八種標準物質(zhì)，用甲醇定容到10mL，制得5

37、00 µg/mL混合儲備液，于4℃冰箱中避光保存。</p><p>　　2）PAEs標準儲備液：用微量移液器取1mL上述儲備液，用甲醇定容到10mL，制得50µg/mL混合儲備液，于4℃冰箱中避光保存。</p><p>　　3）標準工作液的制備：用微量移液器分別移取不同體積的上述標準儲備液，以甲醇稀釋到所需濃度分別為20.00µg/mL、10.00µ

38、g/mL和5.00µg/mL的標準工作液。制得1.00µg/mL標準工作液方法是用微量移液器移取0.1mL的10.00µg/mL的標準工作液，用甲醇定容到1mL。</p><p>　　2.3.3 GC-MS測定條件</p><p>　　色譜條件：DB-5MS低流毛細管柱(30.0m0.25mm0.25μm)；載氣為He氣，柱流量為1mL/min，不分流進樣；

39、進樣口溫度為250℃，不分流進樣1.00µL；傳輸線溫度為250℃。GC-MS升溫程序如下：柱溫80℃保持2min，以10℃/min升溫至200℃，保持2min；再以5℃/min升溫至300℃，保持5min。</p><p>　　質(zhì)譜條件：電離源EI，電子能量70ev；離子源溫度為250℃；接口溫度280℃；全掃描，掃描速率0.5u/s，掃描質(zhì)量范圍為40-400amu；倍增器電壓1.2KV；特征碎片離

40、子的核質(zhì)比為149。溶劑延遲時間：3.00min。</p><p>　　測定結(jié)果通過NIST庫數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索定性，面積歸一化法定量。</p><p><b>　　3 結(jié)果與討論</b></p><p>　　3.1 標準溶液的分析</p><p>　　將配制好的含有八種鄰苯二甲酸酯混合標液，進GC-MS儀分析，根據(jù)實驗設(shè)定的

41、升溫程序，得出如圖1所示的出峰情況。圖中橫坐標表示保留時間，縱坐標表示峰高。</p><p>　　圖1 標準溶液的氣相色譜-質(zhì)譜圖</p><p>　　1-DMP（10.00µg/mL）、2-DEP（10.00µg/mL）、3-DIPP（10.00µg/mL）、4-DPP（10.00µg/mL）、5-DBP（10.00µg/mL）、6-BB

42、P（10.00µg/mL）、7-DEHP（10.00µg/mL）、8-DOP（10.00µg/mL）</p><p>　　由圖1可知，鄰苯二甲酸酯主要出峰時間在第10min至35min之間。根據(jù)GC-MS檢測所得數(shù)據(jù)，通過標準物質(zhì)對照，并用NIST質(zhì)譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索，分析得標準液中含有的八種有機物出峰時間如表1。其中DMP第一個被檢測出，其出峰時間為11.50min；DEP出峰時間為1

43、3.15min；DIPP出峰時間為13.79min；DPP出峰時間為15.35min；DBP的出峰時間為18.40min；BBP的出峰時間為25.29min；DEHP的出峰時間為27.80min；DOP的出峰時間為30.82min。</p><p>　　表1 鄰苯二甲酸酯的保留時間、定量離子</p><p>　　對溶液濃度做線性回歸曲線。各PAEs的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表2，表中y代表

44、峰面積，x代表鄰苯二甲酸酯的濃度。</p><p>　　表2 各PAEs的線性回歸方程及相關(guān)系數(shù)</p><p>　　從上述數(shù)據(jù)可以看出采用這種方法進行測定，實驗所得方程的相關(guān)系數(shù)都比較高。</p><p>　　3.2 不同萃取方法的比較</p><p>　　萃取養(yǎng)殖魚中PAEs的方法很多，如索式萃取、超聲微波協(xié)同萃取、固相微萃取和CO2超臨

45、界萃取以及液液超聲萃取等。黃衛(wèi)紅[20]等采用超聲微波協(xié)同萃取-氣相色譜測定土壤中的鄰苯二甲酸酯類化合物；劉芃巖[21]等采用固相微萃取-氣相色譜法分析環(huán)境水樣中痕量鄰苯二甲酸酯類化合物的方法，但這些方法操作都比較繁瑣、效率不高、耗時長、溶劑消耗量大以及費用高。本實驗為了確定CO2超臨界萃取和液液超聲萃取存在的萃取效果差別，根據(jù)升溫程序的條件來分析同份養(yǎng)殖魚粉樣品中的鄰苯二甲酸酯的含量，具體數(shù)據(jù)見表3。</p><p

46、>　　表3兩種萃取方法測定同一養(yǎng)殖魚粉樣品各鄰苯二甲酸酯含量（單位：µg/g）</p><p><b>　　接表3</b></p><p>　　注：ND表示未檢出。</p><p>　　分析表3可以看出，用液液超聲萃取法時， DMP、DEP、DIPP、DPP、DBP、BBP、DEHP和DOP八種PAEs均可檢測出；用CO2超臨界

47、萃取法時，DMP、DIPP、DPP和BBP未能檢出。從萃取效率上比較，液液萃取DMP、DEP、DIPP、DPP、DBP、BBP和DOP的效率比超聲萃取高，而超臨界萃取DEHP的效率則遠高于液液萃取。又由于液液超聲萃取在操作時具有儀器簡單、操作簡便等特點；而CO2超臨界萃取法，在操作過程中用時久，操作復雜。綜合考慮，本實驗采用液液超聲萃取法對樣品進行處理。</p><p>　　3.3 不同萃取劑的比較</p&

48、gt;<p>　　不同的萃取劑對萃取鄰苯二甲酸酯的能力不同，所以萃取劑的選擇非常重要。痕量PAEs分析的常用提取劑主要有：正己烷[22]、二氯甲烷[23]、丙酮[24]、三氯甲烷[25]，但三氯甲烷毒性危害性較大，其他三種萃取效果都比較好，本實驗選擇的是正己烷和二氯甲烷。</p><p>　　本實驗為了確定二氯甲烷、正己烷以及兩者的混合溶液存在的萃取效果不同，稱取3g左右魚粉，按照2.3.1的實驗步

49、驟，實驗結(jié)果見表4。</p><p>　　表4三種萃取劑萃取同一養(yǎng)殖魚粉樣品中鄰苯二甲酸酯含量的比較（單位：µg/g）</p><p><b>　　接表4</b></p><p>　　注：ND表示未檢出。</p><p>　　分析表4可以看出，兩者的混合溶液萃取出的PAEs種類最多，且濃度比較大；而以二氯甲烷作

50、為萃取劑時，DMP、DIPP、DPP和BBP均未檢出；以正己烷作為萃取劑時，DMP不能檢出，但檢出的PAEs含量不夠高。</p><p>　　綜上所述可以得出，正己烷、二氯甲烷1:1混合液作為的萃取劑效果最佳，更易提取魚粉中的8種PAEs，故本實驗采用正己烷、二氯甲烷1:1混合液作為下面實驗樣品的萃取劑。</p><p>　　將用正己烷、二氯甲烷1:1混合液作為的萃取劑提取出的樣品，進GC

51、-MS儀分析，根據(jù)實驗設(shè)定的升溫程序，得出如圖2所示的出峰情況。</p><p>　　圖2 正己烷、二氯甲烷1:1混合液萃取出樣品的氣相色譜-質(zhì)譜圖</p><p>　　1-DMP、2-DEP、3-DIPP、4-DPP、5-DBP、6-BBP、7-DEHP、8-DOP</p><p>　　3.4 液液超聲萃取-氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測定養(yǎng)殖魚中鄰苯二甲酸酯含量<

52、/p><p>　　本實驗草魚、鳊魚、花鰱魚、鯽魚、黑魚樣品購買于寧波6個不同菜市場，編號分別為采樣點1，2，3，4，5，6，測定數(shù)據(jù)見表5。</p><p>　　表5養(yǎng)殖魚粉液液超聲萃取檢測所得的鄰苯二甲酸酯成分（單位：µg/g）</p><p><b>　　接表5</b></p><p>　　注：ND表示未檢出。

53、</p><p>　　注：PPI=（Cf1×Cf2 . . . Cfn）1/n</p><p>　　3.4.1 各養(yǎng)殖魚中PAEs含量比較</p><p>　　我國水中優(yōu)先控制污染物名單中有DEP和DEHP，國內(nèi)水質(zhì)中DEHP的衛(wèi)生標準是8µg/L；第2005/84/EC號指令其附件列明以下限制：玩具或兒童護理用品中DEHP、DBP和BBP濃度不

54、的超過0.1%。EPA規(guī)定人每天可接受的安全攝入量1mg/kg（DEHP）。據(jù)國內(nèi)相關(guān)報道指出，60kg成年人每日攝入PAEs量為3.4mg左右，低于每日攝入安全量。</p><p>　　分析表5數(shù)據(jù)可以看出，各個取樣點主要檢測出的物質(zhì)是DMP（0.0229-0.134µg/g）、DEP（0.0189-0.248µg/g）、DBP（0.0329-0.249µg/g）、DEHP（0.1

55、48-0.831µg/g），DOP（0.182-5.03µg/g），未檢測出的是DIPP、DPP、BBP。通過6個取樣點的對比可知6號取樣點各魚種中PAEs種類較少，含量較低（其中鯽魚的DEP含量只有0.0189µg/g），1號取樣點各魚種中PAEs種類最多，含量最高（其中鳊魚的DOP含量高達5.03µg/g）。李瀟[12]分析珠江三角洲和香港地區(qū)養(yǎng)殖魚（草魚、鯽魚和羅非魚）體內(nèi)鄰苯二甲酸酯含量與

56、分布特征時，發(fā)現(xiàn)珠江三角洲3個采樣點均檢出DMP、DEP、DBP、BOP、DEHP和DOP六種PAEs，其中DMP含量為0.12-0.64µg/g；DEP含量為0.75-4.11µg/g；DBP含量為0.05-7.68µg/g；BOP含量為0.42-12.39µg/g；DEHP為0.06-12.46µg/g；DOP含量為0.97-1.66µg/g。其中鯽魚體內(nèi)DBP含量最高為7

57、.68µg/g，草魚體</p><p>　　各文獻測定結(jié)果的比較表明，不同水域魚體PAEs含量不同，這可能與魚種生活的水體環(huán)境有關(guān)。PAEs 可以通過不同途徑（如大氣沉降和雨水淋溶）進入水體中，即使是微量的PAEs，也可能會在不同生物體內(nèi)蓄積，并通過食物鏈逐級放大，最后在較高營養(yǎng)級如魚類體內(nèi)不斷蓄積到較高濃度[27]。</p><p>　　另外，不同魚種PAEs含量也存在差別，上

58、述文獻中表明在各魚種中DBP和DEHP含量普遍比較高；DMP和DEP在魚種的含量比較低。這可能是魚種生活的水體環(huán)境中各PAEs的含量高低有關(guān)；另一種可能是和PAEs本身的理化性質(zhì)有關(guān)，DMP、DBP、DEHP 和DOP 的水生生物富集因子分別為13.7，4.2×105，1.9×109和3.2×109 [28]。因為DBP和DEHP的生物富集因子較高，這兩類PAEs在魚類體內(nèi)含量較高并不一定表明養(yǎng)殖水體DBP

59、和DEHP 含量一定比其他PAEs高，如DMP；反之，DMP的生物富集因子很小，在魚類體內(nèi)含量較少也不代表養(yǎng)殖水體中DMP的含量就低[12]。</p><p>　　3.4.2 各養(yǎng)殖魚中PAEs的PPI值比較</p><p>　　比較單種PAEs在魚體內(nèi)的污染，單靠測定出的濃度值不能很好說明采樣點中各養(yǎng)殖魚的鄰苯二甲酸酯的總體污染情況，本文采用PPI值來說明。PPI指的是鄰苯二甲酸酯的污染

60、指數(shù)，計算方法為：PPI=（Cf1×Cf2 . . . Cfn）1/n，方程中的Cfn是樣品中鄰苯二甲酸鹽的濃度，n表示鄰苯二甲酸酯的總類數(shù)。</p><p>　　從表5數(shù)據(jù)可以看出，1號采樣點PPI平均值最高0.835，說明PAEs總含量最高；4號采樣點PPI平均值最低0.330，說明PAEs的總含量最低。通過不同采樣點同一種養(yǎng)殖魚的對比可知，采樣點1草魚體內(nèi)PAEs的含量最高，其PPI值為1.03，

61、采樣點5草魚體內(nèi)PAEs的含量最低，PPI值為0.220；采樣點1鳊魚體內(nèi)PAEs的含量最高，PPI值為0.941，采樣點5鳊魚體內(nèi)PAEs的含量最低，PPI值只有0.274；采樣點3花鰱魚體內(nèi)PAEs的含量最高，PPI值為0.836，采樣點4花鰱魚體內(nèi)PAEs的含量最低，PPI值只有0.346；采樣點1鯽魚體內(nèi)PAEs的含量最高，PPI值為0.806，采樣點5鯽魚體內(nèi)PAEs的含量最低，PPI值只有0.413；采樣點2黑魚體內(nèi)PAEs

62、的含量最高，PPI值為0.871，采樣點4黑魚體內(nèi)PAEs的含量最低，PPI值為0.259。分析認為這些差異可能是由養(yǎng)殖水體環(huán)境的不同所造成。</p><p>　　通過各養(yǎng)殖魚之間的對比，發(fā)現(xiàn)鯽魚中PAEs的含量普遍比其他魚種高，其PPI平均值為0.612；黑魚中PAEs的含量普遍比其他魚種低，其PPI平均值為0.429。Adeleke A. Adeniyi[14]用氫火焰離子化-氣相色譜法測定尼日利亞-拉各斯-

63、比寧-奧崗州河域表面堆積物、魚類和水中的鄰苯二甲酸酯類，結(jié)果表明，羅非魚體內(nèi)中PAEs含量較小，其PPI值為0.0706，歧須鯰屬體內(nèi)中PAEs含量較大，其PPI值為0.105，這可能是各魚種之間對PAEs的富集能力存在差異所致。</p><p><b>　　4 結(jié)論</b></p><p>　　（1）.通過本次實驗前處理數(shù)據(jù)顯示可知，比較液液超聲萃取法和CO2超臨界

64、萃取法，其中液液超聲萃取法數(shù)據(jù)最全面、顯著、操作簡便、費用低以及耗時短。所以本實驗的萃取方法選定為液液超聲萃取法。</p><p>　?。?）.PAEs在養(yǎng)殖魚體內(nèi)的積累跟水體環(huán)境中PAEs的污染狀況有關(guān)，以及養(yǎng)殖魚自身對PAEs的富集能力存在較大關(guān)系。</p><p>　　（3）.本實驗中檢測的8種PAEs是工業(yè)生產(chǎn)中使用最廣泛也是環(huán)境中最常見的。分析表明，草魚、鳊魚、花鰱魚、鯽魚和黑魚

65、主要受到DEP、DBP 、DEHP 和DOP 的污染，與我國環(huán)境主要受到的DEP、DEHP和DOP等PAEs污染的相關(guān)報道相一致[29]。但是不同采樣點養(yǎng)殖魚類體內(nèi)DMP的含量很低，樣品中均未檢出DIPP、DPP和BBP。由此可以看出養(yǎng)殖水體中幾乎沒有受到DMP、DIPP、DPP和BBP的污染。</p><p><b>　　參考文獻</b></p><p>　　[1]

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79、給予細心的指導，幫助我開拓研究思路，對我的論文進行了認真的審閱，幫我解決寫作中碰到的很多難題。所有這一切都將成為我受益終生的寶貴財富！在此，我謹向?qū)煴硎局孕牡母兄x！</p><p>　　四年的學習生活的順利完成，得到了很多老師和同學的幫忙。我還要真誠地謝謝同一畢業(yè)論文小組的同學。在畢業(yè)論文實驗中你們給予了我很多幫助，給我提出了很多寶貴的建議。 我要特別感謝整個大學期間所有教育過我的生物與環(huán)境學院的老師