口腔鱗癌中ets-2、mmp-9表達(dá)及其意義

1、<p>　　口腔鱗癌中Ets-2、MMP-9表達(dá)及其意義</p><p>　　【摘要】 目的 探討Ets-2、MMP-9在口腔鱗癌中的表達(dá)。方法 應(yīng)用PV-9000兩步免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)Ets-2、MMP-9在68例口腔鱗癌組織、19例口腔粘膜上皮異常增生組織和15例正?？谇徽衬そM織的表達(dá)情況，分析其在口腔粘膜癌變過(guò)程中的變化趨勢(shì)及在各組間表達(dá)的差異。結(jié)果 1.Ets-2三組總體及組間比較均有顯著性

2、差異(P＜0.05)；在OSCC患者按年齡、性別、瘤體大小等分組間比較Ets-2的表達(dá)無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；在按有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等分組間比較Ets-2的表達(dá)差異有顯著性差異(P＜0.05)。2. MMP-9的表達(dá)三組總體差異及組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。在OSCC患者按年齡、性別、瘤體大小等分組間比較MMP-9表達(dá)無(wú)顯著性差異(P＞0.05)；在按有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期等分組間比較MMP-9的表達(dá)差異有顯著

3、性差異(P＜0.05)。3.在口腔鱗癌組織中，Ets-2與MMP-9的表達(dá)存在正相關(guān)關(guān)系(r=0.153，P＜0.05)。結(jié)論 Ets-2、MMP-9的異常表達(dá)可能在口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展中起重要的作用。</p><p>　　【關(guān)鍵詞】 口腔鱗狀細(xì)胞癌 Ets-2 MMP-9 免疫組織化學(xué)</p><p>　　【Abstract】 Aim To investigate the expressi

4、on of Ets-2、MMP-9 in oral squamous cell carcinorma.Methods The two-step immunohistochemistry technique (PV-9000), was used to discover the expression of Ets-2 and MMP-9 in 68 OSCC tissues, 19 DOM tissues and 15 NOM tissu

5、es, and to analyze their expressions in different tissues. Results 1 As to the expression of Ets-2,statistical significance was observed between the highly and moderately as well as poorly groups (P＜0.05),but not between

6、 moderately and po</p><p>　　【Keywords】 Oral squamous cell carcinoma Ets-2;MMP-9 immunohisto- chemistry</p><p>　　Ets-2（人紅血細(xì)胞增多癥病毒致癌基因同源體2）是Ets家族轉(zhuǎn)錄因子的一員，它在腫瘤、骨發(fā)育和免疫應(yīng)答中扮演重要角色[1]。它在膀胱癌、肝癌、乳腺癌等中高表達(dá)，故

7、而有學(xué)者把它列為一種致癌基因。MMP-9則屬于Ⅳ型膠原酶或明膠酶。在正常的生理情況下，基質(zhì)金屬蛋白酶和基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子(Tissue Inhibitors of Metalloproteinases，TIMPs)保持在一定的平衡狀態(tài)，從而維持機(jī)體的正常狀，使組織屏障的完整性得以維護(hù)[2]。在腫瘤發(fā)展的過(guò)程中，MMP-9通過(guò)降解細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular Matrix, ECM)中的型膠原使癌細(xì)胞突破原發(fā)部位正常的基

8、底膜(Basement Membrane, BM)而發(fā)生浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移。</p><p><b>　　1 資料與方法</b></p><p>　　1.1 臨床資料選取鄭州大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院、河南省腫瘤醫(yī)院、鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2005-2008年手術(shù)切除的，且術(shù)后經(jīng)病理檢查確診的原發(fā)口腔鱗狀細(xì)胞癌(Oral Squamous Cell Carcinoma，OSCC )石蠟包埋

9、標(biāo)本68例。其中患者年齡35-79歲，男性40例，女性28例；所有患者均為首次治療，且手術(shù)前未行放療或化療。全部標(biāo)本均經(jīng)常規(guī)福爾馬林固定，石蠟包埋，4μm連續(xù)切片，分別用HE染色及免疫組化染色。腫瘤直徑小于4cm者44例，不小于4cm者24例；有淋巴轉(zhuǎn)移38例，無(wú)頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例；按鱗癌病理分級(jí)法，其中高分化鱗癌29例、中分化鱗癌25例、低分化鱗癌14例；腫瘤分期根據(jù)UICC2002標(biāo)準(zhǔn)，按TNM分期，Ⅰ期-Ⅱ期38例、Ⅲ期-Ⅳ期30

10、例。</p><p>　　1.2 主要試劑 鼠抗人Ets-2單克隆抗體（即用型），鼠抗人MMP-9單克隆抗體濃縮液，PV-9000通用型兩步法免疫組化染色試劑盒，均購(gòu)自北京中山生物技術(shù)有限公司。</p><p>　　1.3 免疫組化檢測(cè) 采用PV-9000兩步免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)，用已知陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，均以PBS液代替一抗作為陰性對(duì)照。</p><p>　　

11、1.4 結(jié)果判定Ets-2:陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞漿；MMP-9陽(yáng)性染色于細(xì)胞胞膜或胞漿。于顯微鏡下隨機(jī)記數(shù)4個(gè)視野(10×40倍)，至少計(jì)數(shù)共400個(gè)細(xì)胞，計(jì)算平均每個(gè)視野下的陽(yáng)性染色細(xì)胞數(shù)。用LI評(píng)價(jià)其表達(dá)水平。以陽(yáng)性細(xì)胞比率＜5%為(-)，陽(yáng)性細(xì)胞比率5-20%為(+)，陽(yáng)性細(xì)胞比率＞20%為 (++)[3]。</p><p>　　1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件，兩組間比較、多組間的兩

12、兩比較采用秩和檢驗(yàn)(Wilcoxon兩樣本比較法)，x2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。取α=0.05為顯著性檢驗(yàn)水準(zhǔn)。</p><p><b>　　2 結(jié)果</b></p><p>　　2.1 Ets-2在正常組織、上皮異常增生和口腔鱗癌組織的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=49.575，P＜0.05）。MMP-9在正常組織、上皮異常增生和口腔鱗癌組

13、織的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=59.346，P＜0.05）。</p><p>　　2.2 OSCC中Ets-2、MMP-9的表達(dá)呈正相關(guān)。</p><p>　　表1. Ets-2在正常黏膜、上皮異常增生黏膜、口腔鱗癌中的表達(dá)</p><p>　　圖1Ets-2在OSCC中的表達(dá) （400×） 圖2MMP-9在OSCC中的表達(dá) （400×）&l

14、t;/p><p>　　Fig.1 Expression of Ets-2 in OSCC Fig.2 Expression of MMP-9 in OSCC </p><p><b>　　3討論</b></p><p>　　目前己明確Ets家族具有諸多的生物學(xué)功能，其中有參與細(xì)胞的生長(zhǎng)分化、血管生成、腫瘤發(fā)生以及細(xì)胞遷移等過(guò)程[4]。Ets-2基因

15、定位與21號(hào)染色體，是原癌基因家族中的一員，能夠抑制細(xì)胞凋亡[5]。諸多研究表明，在多種腫瘤中組織中，Ets-2有異常的表達(dá)[6,7]。本研究結(jié)果顯示， 在OSCC中Ets-2的表達(dá)與分化程度和臨床分期有關(guān)。提示Ets-2在OSCC的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵的作用。因此，提示Ets-2有可能作為一個(gè)評(píng)價(jià)OSCC生物學(xué)行為的指標(biāo)，檢測(cè)Ets-2有助于口腔鱗癌的早期診斷及預(yù)后評(píng)定，指導(dǎo)臨床治療。</p><p>　　MMP

16、-9屬于Ⅳ型膠原酶，相對(duì)分子量較大，達(dá)到92KD；其人類(lèi)基因定位于20q12-q13。研究表明[8]MMP-9與人體許多疾病有關(guān)，包括心血管疾病及癌癥。Chen等[9]等研究表明MMP-9可以作為一個(gè)有效的指標(biāo)作為判定口腔扁平苔蘚潛在癌變的可能性。李珊昌等[10]認(rèn)為MMP-9可以作為舌鱗癌早期診斷的指標(biāo)。本研究驗(yàn)證了MMP-9在OSCC的高表達(dá)，能夠反映腫瘤組織的侵襲力，能夠評(píng)定腫瘤惡性程度及預(yù)測(cè)預(yù)后等?？谇击[癌中Ets-2、MMP-

17、9的表達(dá)呈正相關(guān)關(guān)系，提示MMP-9作為蛋白水解酶，能夠降解ECM及BM，促進(jìn)癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，而Ets-2可能通過(guò)某種機(jī)制調(diào)控MMP-9的表達(dá)來(lái)影響腫瘤的生物學(xué)特性。</p><p>　　總之,Ets-2和MMP-9在口腔鱗癌的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用，探討兩者者在OSCC發(fā)生發(fā)展中所發(fā)揮的作用，能夠?yàn)镺SCC的早期診斷、治療以及及評(píng)估預(yù)后提供重要的參考價(jià)值。</p><p><b&

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