益母草野生品和栽培品中水蘇堿的含量比較研究

1、<p>　　益母草野生品和栽培品中水蘇堿的含量比較研究</p><p>　　作者：高言明，賈憲生，楊玉琴，李健，張麗艷，何平，李榮宇</p><p>　　【摘要】 目的考察益母草野生品和栽培品中水蘇堿的含量，為人工種植益母草提供依據(jù)。方法采用薄層掃描法進(jìn)行測定。結(jié)果栽培品中水蘇堿含量普遍比野生品中的水蘇堿含量高。結(jié)論益母草栽培品比野生品質(zhì)量好。 </p><

2、p>　　【關(guān)鍵詞】 益母草；鹽酸水蘇堿；薄層掃描</p><p>　　益母草來源于唇形科植物益母草Leonurus japonicus Houtt.的新鮮或干燥的地上部分，為婦科經(jīng)產(chǎn)要藥［1，2］。為考察黔產(chǎn)益母草野生品和栽培品的質(zhì)量，本實驗通過測定益母草中主要有效成分鹽酸水蘇堿的含量對益母草野生品和栽培品的質(zhì)量進(jìn)行比較，為人工種植益母草提供依據(jù)，達(dá)到提高益母草藥材質(zhì)量的目的。</p>&l

3、t;p><b>　　1 儀器與試藥</b></p><p>　　CS-9301PC雙波長飛點層析掃描儀（日本島津公司）；CAMAG LINOMAT V半自動點樣儀（瑞士卡馬公司）；定量毛細(xì)管（美國MICROCAPS公司）；XS205雙量程電子分析天平， 量程：萬分之一和十萬分之一兩檔（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）；硅膠G板（青島海洋化工廠）。鹽酸水蘇堿對照品購自中國藥品生物制品檢

4、定所，批號：110712-200407；其他化學(xué)試劑均為分析純；藥材紅花益母草Leonurus japonicus Houtt. 和白花益母草Leonurus sibiricus分別采自貴州省惠水、大方縣和貴陽市郊烏當(dāng)，藥材樣品均經(jīng)貴陽中醫(yī)學(xué)院魏升華講師鑒定。</p><p><b>　　2 方法與結(jié)果</b></p><p>　　2.1 供試品溶液和對照品溶液的制

5、備 </p><p>　　精密稱取干燥益母草樣品粉末約1 g，置圓底燒瓶中，加入乙醇約50 ml，加熱回流1.5 h，放冷，濾過，濾渣及回流容器用乙醇50 ml分次洗滌，合并濾液和洗液，蒸干，殘渣用乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至10 ml容量瓶中，加乙醇稀釋至刻度，搖勻，離心（5000 r/min，5 min），取上清液作為供試品溶液。精密稱取在105°干燥3 h的鹽酸水蘇堿對照品適量，加乙醇制成每毫升含2.030

6、mg的溶液，作為對照品溶液。</p><p>　　2.2 薄層色譜分析條件［3,4］</p><p>　　用硅膠G薄層板，點狀點樣，點樣量10 μl。以正丁醇-鹽酸-醋酸乙酯(8∶3∶1)為展開劑，展開，取出晾干后，在 105℃加熱15 min，放冷，噴以稀碘化鉍鉀試液-1％三氯化鐵乙醇溶液(10∶1)混合溶液至斑點顯色清晰，晾干，立即在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布密封。反射法

7、單波長鋸齒形掃描。波長λS=510 nm，狹縫0.4 mm×0.4 mm。在上述分析條件下對薄層色譜進(jìn)行掃描分析。結(jié)果見圖1～2。</p><p>　　2.3 線性關(guān)系的考察 </p><p>　　用半自動點樣儀在同一硅膠G薄層板上點鹽酸水蘇堿對照溶液2，4，6，8，10，12，14 μl，用上述條件展開顯色后進(jìn)行薄層掃描測定，以點樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)，求出

8、回歸方程為：Y= 185.75X - 411.09，r=0.996，表明鹽酸水蘇堿在4.06～28.42 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。由于直線不通過原點，因此用外標(biāo)兩點法計算含量。</p><p>　　2.4 穩(wěn)定性考察 </p><p>　　在同一塊薄層板上分別點8 μl樣品溶液和10 μl對照品溶液，依上述色譜條件和掃描條件操作，分別在0，0.5，1，1.5，2 h掃描測定鹽酸水蘇堿峰面

9、積，結(jié)果峰面積的RSD為0.38%，表明鹽酸水蘇堿在本實驗條件下2 h內(nèi)穩(wěn)定。</p><p>　　2.5 同板精密度實驗在同一薄層板上點供試品溶液5個點，每個點10μl，并以鹽酸水蘇堿對照品溶液3，8 μl作為隨行標(biāo)準(zhǔn)，按上述分析條件對每個斑點分析測定，以峰面積計算，RSD為1.00%，表明同板精密度良好。</p><p>　　2.6 異板精密度實驗</p><p

10、>　　在5塊薄層板上，分別點供試品溶液5個點，每個點10 μl，并以鹽酸水蘇堿對照品溶液3μl和8μl作為隨行標(biāo)準(zhǔn)，分別掃描測定其峰面積，按上述分析條件測定，以峰面積計算，RSD為1.90%，表明異板精密度良好。</p><p>　　2.7 重復(fù)性實驗</p><p>　　分別稱取同一批益母草藥材5份，按“2.1”和“2.2”項操作，按上述條件分析測定鹽酸水蘇堿，得平均含量為1.0

11、9%，RSD為2.52%。</p><p>　　2.8 加樣回收率實驗 </p><p>　　精密稱取鹽酸水蘇堿平均含量為1.09%的益母草藥材5份，每份約0.5 g，精密加入鹽酸水蘇堿對照品5.00 mg，同時加入約50 ml乙醇回流提取，按“2.1”項方法進(jìn)行供試品溶液的制備，按“2.2”項進(jìn)行展開和掃描測定，計算回收率。結(jié)果見表1。表1 回收率實驗（略）</p>

12、<p>　　2.9 樣品測定 </p><p>　　按上述分析條件對不同品種和不同生長條件的益母草中鹽酸水蘇堿的含量進(jìn)行分析。結(jié)果見表2。表2 不同品種和不同生長條件的益母草中鹽酸水蘇堿的含量</p><p><b>　?。裕?lt;/b></p><p><b>　　3 討論</b></p>&

13、lt;p>　　表2中益母草開花前后其主要有效成分鹽酸水蘇堿含量相差較大，這也驗證了童子益母草的質(zhì)量高于非童子益母草的說法，同時也說明益母草的采收應(yīng)在開花前較好。</p><p>　　益母草分白花和紅花兩個種，開花前兩者不易分辨，如采收野生童子益母草往往是兩者的混品，而兩者的內(nèi)在質(zhì)量是否相同是值得研究的一個問題。如果采用人工栽培，可根據(jù)需要進(jìn)行分別種植，質(zhì)量也就可以得到控制。</p><p

14、>　　本實驗人工種植的益母草采用在多年栽種蔬菜的農(nóng)田中進(jìn)行栽種，土壤肥力往往比荒野土壤好，所以其中鹽酸水蘇堿的含量也相對較高。表2中編號為050724的白花益母草是在野外環(huán)境較濕潤的腐質(zhì)土上播撒白花益母草種子后任其生長，其中鹽酸水蘇堿的含量也較高，說明益母草中主要有效成分鹽酸水蘇堿的含量主要與其生長環(huán)境的土壤肥力有很大關(guān)系，如果采用人工種植，應(yīng)選用肥力較好的土壤或注意施肥，益母草的質(zhì)量才能得到保證。</p><

15、p>　　在實驗過程中，發(fā)現(xiàn)對展開后的薄層板于噴顯色劑前在105℃溫度下烘烤時間控制較重要，當(dāng)烘烤時間大于或小于15 min時，噴顯色劑后斑點顯色均不及15 min清晰，因此建議使用本實驗采用的方法時，要注意掌握烘烤時間。</p><p>　　經(jīng)實驗證明，本文采用的展開系統(tǒng)分離度好，斑點清晰，方法簡便，且含量測定結(jié)果穩(wěn)定可靠。</p><p><b>　　【參考文獻(xiàn)】<

16、/b></p><p>　　1］范美華，王健鑫，李 鵬，等.益母草的研究進(jìn)展［J］.中藥藥物與臨床，2006，6（7）：528. </p><p>　?。?］張嫻，彭國平.益母草屬化學(xué)成分研究進(jìn)展［J］.天然產(chǎn)物研究與開發(fā)，2003，15（2）：162.</p><p>　?。?］金陽. TLCS法測定復(fù)方益母草顆粒中鹽酸水蘇堿的含量［J］.現(xiàn)代中藥研究與實踐