林蔭銀蓮花離體快繁體系的優(yōu)化及其有效成分的研究.pdf

1、林蔭銀蓮花(Anemone flaccida Fr.Schmidt)屬銀蓮花屬(Anemone)植物,其干燥根莖名地烏,可入藥,具有祛風濕、助筋骨、消腫止痛等功效。本研究通過分析林蔭銀蓮花組培各環(huán)節(jié)如不定芽增殖、擬球莖誘導、生根及煉苗移栽的影響因素,從而得到最佳的培養(yǎng)條件,優(yōu)化了林蔭銀蓮花離體快繁體系。并采用分光光度法、FTIR和HPLC法,對地烏的栽培品、野生品和組培品中的可溶性糖、可溶性蛋白、總皂苷、化學組分和有效成分進行了定量或定

2、性的分析比較。研究結果為林蔭銀蓮花種苗的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)和人工栽培提供了一定的理論基礎和技術支持,主要結果如下:
　　 (1)繼代培養(yǎng)中不定芽增殖的最適培養(yǎng)基為:1/2 MS(220 mg/L CaCl2·2H2O)+6-BA1.0 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA0.4 mg/L+750 mg/L CH,增殖系數(shù)為4.11,芽苗整齊健壯。
　　 (2)繼代培養(yǎng)中擬球莖誘導的適宜培養(yǎng)基為:MS(440 mg/L CaCl

3、2·2H2O)+6-BA1.0 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA0.4mg/L+500 mg/L CH,CLS的誘導率為80％左右,球莖基部直徑較大,芽苗健壯。
　　 (3)適當?shù)拿苤?4～5株/瓶)和繼代周期(30 d)有利于外植體的繼代增殖；繼代培養(yǎng)基可用食用白糖和自來水分別代替蔗糖和蒸餾水來配制,研究結果可大大降低成本。
　　 (4)加入100 mg/L Vc能有效抑制外植體的褐變,培養(yǎng)40 d后褐變率為58

4、％,較不添加處理低27個百分點,且褐變程度均較輕。
　　 (5)生根培養(yǎng)以1/2 MS4+NAA0.5 mg/L+IBA0.5 mg/L+1.0 g/LAC最優(yōu),培養(yǎng)55 d后,生根率為93.9％,平均根條數(shù)為10.5,根最長達1.73 cm,根較粗且褐變輕微。
　　 (6)生根苗以放入滅菌后的潮土基質(zhì),在5～6℃環(huán)境中煉苗7～10 d最佳:移栽時選擇潮土和河沙混合基質(zhì)(8:2體積比),成活率達96％,出苗率為86％；組

5、培苗就地栽培或移至原產(chǎn)地均可,成活率均高于95％,出苗率大于92％。
　　 (7)紫外分光光度法測定可溶性糖、可溶性蛋白、總皂苷的含量,結果如下:可溶性糖含量為:栽培品>組培品>野生品；可溶性蛋白含量為:組培品>野生品>栽培品；總皂苷含量以栽培品的最高,野生品與組培品的差異不明顯。
　　 (8)地烏組培品、栽培品和野生品原粉的紅外圖譜的峰型、峰位基本一致,由此推斷它們所含的化學成分種類相同。
　　 (9)地烏組培