臨床病理生物學(xué)之病毒基本形態(tài)與結(jié)構(gòu)

1、病毒學(xué)總論,3000BC，埃及孟非思壁畫中長老患小兒麻痹癥,病 毒 概 述病毒的發(fā)現(xiàn)1892年發(fā)現(xiàn)第一個病毒即煙草花葉病毒1898年發(fā)現(xiàn)動物口蹄疫病毒首先被證實對人類有致病性的是——黃熱病毒（1901年發(fā)現(xiàn)）,體積微小，電子顯微鏡觀察；可通過濾菌器 結(jié)構(gòu)簡單：非細(xì)胞結(jié)構(gòu) 基因組：只有一種核酸（RNA或DNA）嚴(yán)格活細(xì)胞內(nèi)寄生以復(fù)制方式繁殖對抗生素不敏感，耐冷不耐熱,病毒的特點,體積微小，結(jié)構(gòu)簡單，只含有一種類型的核

2、酸，只能在活的、敏感細(xì)胞內(nèi)以復(fù)制方式增殖的非細(xì)胞型微生物,病毒概念,病毒引起疾病的特點,涉及面廣：75%由病毒引起傳染性強、傳播迅速：如流感病毒病死率高：如狂犬病病毒后遺癥嚴(yán)重：如脊灰病毒持續(xù)感染：如乙肝病毒引起腫瘤：如愛滋病毒致畸性：如風(fēng)疹病毒特效藥少，對抗生素不敏感預(yù)防是重點,病毒的基本性狀,一、病毒的大小與形態(tài),病毒體（virion）完整的成熟病毒顆粒，具有典型的形態(tài)結(jié)構(gòu)，并有感染性病毒的大小測量單位

3、：納米（nm） <50 nm 小型病毒 50 nm -150 nm 中等大小病毒（大多數(shù)） 150nm 大型病毒（最大300 nm）,微生物的大小比較,,,,,,,,,,,,,,,葡萄球菌(1000nm）,,,,,,,,,牛痘病毒300×250nm,A,B,C,D,E,F,G,立克次體450nm,,,衣原體390nm

4、,A、大腸桿菌噬菌體 ( 65 ×95nm ),B、腺病毒 (70nm ),C、脊髓灰質(zhì)炎病毒 (30nm ),D、乙腦病毒 ( 40nm ),E、蛋白分子 (10nm ),F、流感病毒 ( 100nm ),G、煙草花葉病毒,球形病毒,天花病毒,病毒的形態(tài)多數(shù)病毒呈球形或近似球形，桿狀，絲狀， 少數(shù)可為子彈狀、磚塊狀，噬菌體可呈蝌蚪狀,

5、桿狀病毒,噬菌體,狂犬病毒,二、病毒的結(jié)構(gòu)與功能,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,,病毒體結(jié)構(gòu)模式,包膜子粒,包膜,核心,衣殼,殼粒,核衣殼,,,,,,,,病毒的結(jié)構(gòu),核心：核酸、酶類衣殼：由殼粒（多肽）組成包膜：由宿主細(xì)胞膜或核膜組成 鑲嵌有包膜子粒（刺突）,,,螺旋對稱型（Helical Symmetry）二十面

6、體立體對稱型（ Icosahedral Symmetry ） 復(fù)合對稱型（Complex Symmetry ）,衣殼類型,螺旋對稱型（helical symmetry),20面體立體對稱型(icosahedral symmetry)：大多數(shù)球狀病毒屬之,（3）復(fù)合對稱型(complex symmetry),病毒的組成成分,一、核酸 種類：DNA、RNA 存在形式：單鏈與雙鏈

7、；正鏈與負(fù)鏈，分節(jié) 作用：ORF可重疊，具有感染性二、蛋白質(zhì) 種類：結(jié)構(gòu)蛋白攜帶全部遺傳信息 特點：有內(nèi)含子、非結(jié)構(gòu)蛋白 作用：衣殼、基質(zhì)、包膜蛋白（結(jié)構(gòu)蛋白） 酶、反式作用因子（非結(jié)構(gòu)蛋白）,三、病毒的分類 （Class

8、ification of Viruses）,一、生物學(xué)分類二、臨床分類,生物學(xué)分類——DNA病毒,類型 分類特點 病毒科名DNA病毒 雙鏈DNA、有包膜 痘病毒科 皰疹病毒科

9、 雙鏈DNA、無包膜 腺病毒科 乳多空病毒科 單鏈DNA、無包膜 細(xì)小病毒科,,,,類型 分類特點

10、 病毒科名RNA病毒 雙鏈RNA、分節(jié)、無包膜 呼腸病毒科 雙RNA病毒科 負(fù)單鏈RNA、不分節(jié)、有包膜

11、 副粘病毒科 彈狀病毒科 負(fù)單鏈RNA、分節(jié)、有包膜 正粘病毒科

12、 布尼亞病毒科 沙粒病毒科 正單鏈RNA、不分節(jié)、無包膜 小RNA病毒科

13、 杯狀病毒科 星狀病毒科 正單鏈RNA、不分節(jié)、有包膜 冠狀病毒科

14、 黃病毒科 披膜病毒科,生物學(xué)分類——RNA病毒,,,,類型

15、 分類特點 病毒科名 逆轉(zhuǎn)錄病毒 雙鏈DNA、不分節(jié)、有包膜 嗜肝DNA病毒科 單鏈RNA、不分節(jié)、有包膜 逆轉(zhuǎn)

16、錄病毒科,生物學(xué)分類——逆轉(zhuǎn)錄病毒,,,,病毒的增殖（ Replication of Viruses）,一、病毒的增殖過程二、病毒的異常增殖形式,吸附 adsorption穿入 penetration脫殼 uncoating生物合成 biosynthesis組裝與釋放 assembly and release,病毒的增殖周期,,,,,,,,,,,,,,,,,,吸附,,,病毒的增殖過程,,,,穿入,脫殼

17、,,,,,,早期蛋白,,,,,,,,,晚期蛋白,裝配,DNA復(fù)制,核酸游離,成熟,釋放,,,,,,,,,,,,,,吸附 病毒表面蛋白質(zhì)與細(xì)胞接觸→結(jié)合→特異性吸附 （病毒配體位點與細(xì)胞膜特異受體結(jié)合） ——決定病毒的嗜組織性穿入,融合---有包膜病毒胞飲---無包膜病毒,,CD21（EBV受體） CD4（HIV受體） CD46（麻疹病毒受體）

18、 CD54（鼻病毒受體）,病毒受體,胞飲方式穿入,脫殼 uncoating穿入胞質(zhì)中的核衣殼脫去蛋白質(zhì)，使基因組核酸裸露的過程依賴于脫殼酶,病毒核酸,,病毒核酸,,生物合成 Biosynthesis利用宿主細(xì)胞提供的小分子物質(zhì)合成病毒核酸和蛋白質(zhì),——病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄——復(fù)制子代病毒核酸——特異性mRNA轉(zhuǎn)錄、翻譯子代病毒 結(jié)構(gòu)蛋白和功能蛋白,隱蔽期,早 期： 基因組在細(xì)胞內(nèi)

19、合成非結(jié)構(gòu)蛋白（病毒復(fù)制酶及抑制細(xì)胞正常生物合成的抑制酶）,晚 期： 根據(jù)基因組的指令在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制病毒核酸，合成結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白,1、DNA病毒（雙鏈）： 細(xì)胞核內(nèi)合成DNA，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)合成病毒蛋白,,依賴DNA的RNA多聚酶,早期mRNA,,轉(zhuǎn) 譯,早期蛋白,藥物作用的靶,,晚期：,,解鏈,正鏈DNA負(fù)鏈DNA,,DNA多聚酶,子代DNA,,轉(zhuǎn)錄,晚期mRNA,,晚期蛋白,病毒衣殼蛋白及其他結(jié)構(gòu)蛋白,2、R

20、NA病毒（單鏈）： 多數(shù)在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)合成子代RNA及病毒蛋白,（1）正單鏈RNA病毒（有mRNA功能）：,正單鏈RNA,復(fù)制,子代RNA,,結(jié)構(gòu)蛋白（衣殼蛋白等）,非結(jié)構(gòu)蛋白（依賴RNA的RNA多聚酶）,,,,雙鏈RNA（復(fù)制中間型）,,藥物作用的靶,,（2）負(fù)單鏈RNA病毒（有依賴RNA的RNA多聚酶）：,負(fù)單鏈RNA,,依賴RNA的RNA多聚酶,正單鏈RNA（有mRNA功能）,,,子代RNA,結(jié)構(gòu)蛋白（衣殼蛋白等）,雙

21、鏈RNA（復(fù)制中間型）,,藥物作用的靶,,解鏈,（3）逆轉(zhuǎn)錄病毒（有逆轉(zhuǎn)錄酶，即依賴RNA的DNA多聚酶）,單鏈RNA,,逆轉(zhuǎn)錄酶,,,進(jìn)入細(xì)胞核,,整合（前病毒）,,子代病毒RNA,,病毒mRNA,,病毒蛋白質(zhì),,腫瘤發(fā)生,藥物作用的靶,,組裝與釋放assembly and release,裝配（assembly）,釋放（release）,破胞釋放： 無包膜病毒——致細(xì)胞破裂死亡——一次大量釋放 芽生

22、釋放： 有包膜病毒——病毒核衣殼出芽時套上宿主細(xì)胞的核膜或細(xì)胞膜——細(xì)胞不死——逐個釋放,http://www.syljyy.net/wybb/http://www.syljyy.net/zz/http://www.syljyy.net/wybb/by/http://www.syljyy.net/wh/http://www.syljyy.net/zl/http://www.syljyy.net/wybbl

23、x/http://www.syljyy.net/wsx/http://www.syljyy.net/hhx/http://www.syljyy.net/zsx/http://www.syljyy.net/txx/http://www.syljyy.net/wyyybl/,病毒的異常增殖,缺損病毒（ defective virus ） 基因組不完整的病毒體，無感染性缺損干擾顆粒缺損病毒不能復(fù)制，但

24、卻能干擾同種成熟病毒體進(jìn)入細(xì)胞 輔助病毒：輔助缺損病毒復(fù)制具有感染力的完整病毒天然缺損病毒——腺病毒伴隨病毒 頓挫感染（流產(chǎn)感染）：細(xì)胞條件不合適，病毒進(jìn)入細(xì)胞但不能復(fù)制,非容納細(xì)胞——頓挫感染容納細(xì)胞,四、病毒的干擾現(xiàn)象,干擾現(xiàn)象interference 當(dāng)兩種病毒同時或先后感染同一細(xì)胞時，可發(fā)生一種病毒的增殖抑制另一種病毒增殖的現(xiàn)象產(chǎn)生原因 ——干擾

25、素interferon，IFN ——競爭干擾（細(xì)胞表面受體、底物、酶） —— 改變細(xì)胞代謝途徑 （抑制第二種病毒mRNA的轉(zhuǎn)譯）,干擾現(xiàn)象的意義1、非特異性免疫的構(gòu)成部分——抗病毒作用2、指導(dǎo)正確使用疫苗,病毒的遺傳與變異,一、病毒的遺傳特點二、病毒變異的類型三、病毒基因組研究的意義,病毒遺傳的特點,1、遺傳方式簡單2、受宿主細(xì)胞影響3、易產(chǎn)生突變,病毒變異的類型,1、突變2、重組（recombin

26、ation）3、重配（reassortment）4、表型混合,突變株mutant溫度敏感突變株（temperature sensitive，ts） 28～35℃可以復(fù)制， 37～40℃不能復(fù)制 脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗突變株能穩(wěn)定地存在，可在相應(yīng)的宿主或細(xì)胞中傳代與存活,病毒的抵抗力,一、耐冷怕熱二、紫外線敏感三、氧化劑敏感四、包膜病毒對脂溶劑敏感五、耐甘油,病毒感染抗病毒免疫,病毒感染與免疫,病毒的感染：

27、 病毒侵入機體并在易感細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，與機體發(fā)生相互作用的過程,病毒的感染方式,一、水平傳播,病毒在人群不同個體間的傳播,,,第一課件網(wǎng)網(wǎng)站www.1kejian.com,一、水平傳播,1、通過黏膜表面?zhèn)鞑?、通過皮膚傳播 昆蟲叮咬——乙腦病毒 動物咬傷——狂犬病毒3、醫(yī)源性傳播 注射、輸血、拔牙——乙肝、丙肝,,呼吸道——流感病毒,消化道——甲肝病毒,泌尿生殖道——愛滋病毒,,二、垂直傳播,通過胎盤或產(chǎn)道，病毒由母親傳給

28、胎兒的方式,胎盤：風(fēng)疹病毒、CMV、HIV、HBV,產(chǎn)道:HIV、HSV-II,病毒 母體 新生兒 胎盤 顯 隱 胎 受

29、 先 流性 性 兒 染 天 產(chǎn)感 感 正 胎 畸 死染 染 常 兒 形 胎,,,,,,,,,,病毒的致病機理,一、病毒對宿主細(xì)胞的直接作用,—— 細(xì)胞水平上致病機理,二、病毒感染的免疫病理損害,—— 機體水平上致

30、病機理,1、溶細(xì)胞效應(yīng)2、改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)3、包涵體形成4、細(xì)胞增生與轉(zhuǎn)化5、細(xì)胞凋亡,一、病毒對宿主細(xì)胞的直接作用,病毒在細(xì)胞內(nèi)增殖引起細(xì)胞裂解死亡多見于無包膜病毒：脊灰病毒、鼻病毒、腺病毒,1、影響細(xì)胞的生命活力,（1）溶細(xì)胞效應(yīng)（殺細(xì)胞性感染）：,,,,,,CPE,溶細(xì)胞感染,（ 2）改變細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)：（穩(wěn)定狀態(tài)感染）多見于有包膜病毒：正粘病毒、副粘病毒,穩(wěn)定狀態(tài)感染,,,,,,為特異性抗體或CTL細(xì)胞識別,新抗原,,

31、,3、包涵體形成概念——有些病毒感染細(xì)胞，在普通顯微鏡下可見胞漿或胞核內(nèi)出現(xiàn)嗜酸性或嗜堿性、圓形或不規(guī)則的斑快結(jié)構(gòu)意義——病毒感染的鑒別,狂犬病毒包涵體（Negri body）,,細(xì)胞核,原因：病毒基因的整合,,,,細(xì)胞核,,,1、逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制時以DNA整合入細(xì)胞染色體中；,2、失常式整合，DNA病毒多見，病毒的DNA偶而以片段整合入細(xì)胞的染色體DNA中。,4、細(xì)胞增生與轉(zhuǎn)化,http://www.sdwtrl.com/wt

32、rl/http://www.sdwtrl.com/zy/http://www.sdwtrl.com/yc/http://www.sdwtrl.com/yl/http://www.sdwtrl.com/shqh/http://www.sdwtrl.com/gwy/http://yyk.39.net/hospital/182269_lab.html http://yyk.39.net/hospital/182268_lab.h

33、tml,結(jié)果：細(xì)胞增生或惡性轉(zhuǎn)化,（1）細(xì)胞增生：,病毒,細(xì)胞,,,細(xì)胞內(nèi)DNA合成加快,,細(xì)胞增生,可能與腫瘤的發(fā)生有關(guān),（2）細(xì)胞轉(zhuǎn)化,病毒,培養(yǎng)細(xì)胞,,,細(xì)胞轉(zhuǎn)化,細(xì)胞形態(tài)變化繁殖加快成堆生長,細(xì)胞癌基因：調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化病毒癌基因： 以前病毒的方式從細(xì)胞中獲取細(xì)胞癌基因——致癌因素——活化癌基因——細(xì)胞轉(zhuǎn)化（轉(zhuǎn)化細(xì)胞不一定發(fā)生癌變）,與人類腫瘤相關(guān)的病毒,5、細(xì)胞凋亡：,誘導(dǎo)因子（如病毒等）,

34、細(xì)胞,凋亡基因激活,,,,細(xì)胞膜鼓泡細(xì)胞核濃縮染色體DNA降解,,電泳時有階梯式條帶,形成凋亡小體——增加基因突變的機會,,二、病毒感染的免疫病理損害,—— 機體水平上致病機理,1、體液免疫的病理作用2、細(xì)胞免疫的病理作用3、免疫系統(tǒng)的功能被抑制4、自身免疫損傷,病毒感染的類型,病毒感染,隱性感染,顯性感染,持續(xù)性感染,慢性感染,潛伏感染,慢發(fā)病毒感染（遲發(fā)感染）,,,急性感染,,持續(xù)性感染,病毒感染的類型,病毒數(shù)量少，毒

35、力弱，機體免疫力強——隱性感染病毒數(shù)量多，毒力強，機體免疫力弱——顯性感染,病毒感染的類型,不發(fā)病，但機體可獲得特異性免疫 向外播散病毒，成為重要傳染源,急性感染 持續(xù)性感染,隱性感染,顯性感染,,,,,,,,慢性感染：,病程長，病毒可檢出 如HBV,潛伏感染：,可反復(fù)激活，急性發(fā)作病毒只有在急性發(fā)作時才被檢出如 HSV、VZV,慢發(fā)病毒感染：,潛伏期長，發(fā)病后為亞急性進(jìn)行性直至死亡,尋

36、常病毒,非尋常病毒,,prion,麻疹病毒,,,,,,,,持續(xù)性感染,急性和持續(xù)性病毒感染類型比較,抗病毒免疫,一、非特異性免疫,二、特異性免疫,非特異性抗病毒免疫,1、干擾素2、NK細(xì)胞3、補體,干擾素,定 義：,由病毒或其他干擾素誘生劑 刺激機體細(xì)胞所產(chǎn)生的 一種具有抗病毒等作用的糖蛋白,,種 類：,種類產(chǎn)生細(xì)胞 抗病毒 抗腫瘤

37、 免疫調(diào)節(jié) ?人白細(xì)胞 強 弱 弱 ?人成纖維細(xì)胞 強 弱 弱 ?T細(xì)胞 弱 弱 強,,,,,I型,I I型,干擾素性質(zhì),糖蛋白、抗原性弱、對蛋白酶、 胰酶敏感具有相對穩(wěn)定性，56°C30分鐘 不被滅活抗病毒譜廣、無

38、特異性、無毒性干擾素的產(chǎn)生早于特異性抗體在體內(nèi)作用時間短,抗病毒意義：,抗病毒特點,種的特異性、間接性、廣譜性,抗病毒機理：,細(xì)胞受干擾素作用后，合成抗病毒蛋白,（蛋白激酶、2，-5，合成酶、磷酸二酯酶）,早期中斷病毒復(fù)制，阻止病毒擴散,干擾素產(chǎn)生機理,,操縱基因,結(jié)構(gòu)基因,A:DNA,,,,,轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄,mRNA,mRNA,翻譯,翻譯,A阻遏物,干擾素,,,,,,,病毒,,,A阻遏物與病毒結(jié)合失去活性,干擾素作用機理,B:DNA,

39、操縱基因,結(jié)構(gòu)基因,,轉(zhuǎn)錄,轉(zhuǎn)錄,mRNA,mRNA,翻譯,翻譯,B阻遏物,翻譯抑制蛋白TIP,抑制病毒蛋白質(zhì)合成,B阻遏物與干擾素結(jié)合失去活性,干擾素,,,,,,,,,,,,特異性抗病毒免疫,1、體液免疫：中和作用 細(xì)胞毒作用 促進(jìn)作用2、細(xì)胞免疫：細(xì)胞毒作用 DTH炎癥反應(yīng),

40、體液免疫的保護(hù)作用,中和抗體——可中和病毒的感染具有保護(hù)作用的抗體，主要是IgG、IgM、IgA （1）改變病毒表面結(jié)構(gòu)或與病毒表位結(jié)合以阻止病毒的吸附； （2）與病毒形成免疫復(fù)合物有利于巨噬細(xì)胞的吞噬和清除； （3）有包膜病毒與抗體結(jié)合后，激活補體而使病毒裂解。,,,,,,抗體的中和作用,,,,激活補體,,,病毒裂解,有包膜病毒,細(xì)胞免疫的保護(hù)作用,病毒性感染主要靠細(xì)胞免疫致敏T細(xì)胞——CTL、TDTHCTL：

41、直接殺傷或破壞表面帶有特異性抗原的靶細(xì)胞TDTH ：再次接觸病毒感染的細(xì)胞時，釋放多種細(xì)胞因子,,,,,,,,,,,,TDTH,病毒抗原肽,靶組織,細(xì)胞因子（IL-2、TNF、IFN-?）,CD4+T細(xì)胞的效應(yīng)作用機制,活化巨噬細(xì)胞,,,,,,,,,,未活化ICE,活化ICE,ICE底物,P34cdc2（凋亡）,,,,,,,,,,FasL基因,,,,,,,FasL,Fas,TCR,CD8+T細(xì)胞的細(xì)胞毒作用機制,穿孔素,,粒酶,CT

42、L,靶細(xì)胞,病毒感染的檢查方法和防治原則,一、病毒感染的檢查方法1、標(biāo)本采集與送檢2、病毒的分離培養(yǎng)與鑒定3、病毒感染的快速診斷,1、標(biāo)本采集與送檢標(biāo)本采集： 早期；不同病變?nèi)〔煌瑯?biāo)本標(biāo)本處理： 無菌操作；雜菌標(biāo)本+抗生素冷藏速送： 快速送檢；冷藏（-70 0C）血清學(xué)標(biāo)本： 取雙份血清，效價升高4倍有診斷價值,2、病毒的分離培養(yǎng)與鑒定,病毒的分離培養(yǎng)

43、 動物接種（Animals） 雞胚培養(yǎng)（Embryonated eggs）,組織細(xì)胞培養(yǎng)（Organ and tissue culture）,病毒的雞胚接種示意圖,http://www.120sysdyy.com/jrsy/ http://www.120sysdyy.com/jrsy/by/http://www.120sysdyy.com/jrsy/wh/http://www.120sysdy

44、y.com/jrsy/yf/http://www.120sysdyy.com/jrsy/zd/http://www.120sysdyy.com/jrsy/zl/http://www.120sysdyy.com/jrsy/zz/http://www.120sysdyy.com/kfal/http://www.120sysdyy.com/kydt/http://www.120sysdyy.com/lylx/http://www

45、.120sysdyy.com/qt/http://www.120sysdyy.com/qt/azb/http://www.120sysdyy.com/qt/fl/http://www.120sysdyy.com/qt/lb/http://www.120sysdyy.com/qt/md/http://www.120sysdyy.com/qt/rtr/http://www.120sysdyy.com/qt/rxg/http:/

46、/www.120sysdyy.com/rdxwhttp://www.120sysdyy.com/szqpz/http://www.120sysdyy.com/szqpz/by/http://www.120sysdyy.com/szqpz/wh/http://www.120sysdyy.com/szqpz/yf/http://www.120sysdyy.com/szqpz/zd/http://www.120sysdyy.com

47、/szqpz/zl/http://www.120sysdyy.com/szqpz/zz/http://www.120sysdyy.com/yydt/http://www.120sysdyy.com/zjfc/http://www.120sysdyy.com/zljs/,尿囊腔接種,羊膜腔接種,流感病毒,流感病毒,尿液,羊水,,,,血凝及血凝抑制試驗 鑒定病毒,流感病毒+紅細(xì)胞 血凝,,流感病

48、毒+特異抗體 血凝被抑制,,初次,再次,雞胚接種,常用的細(xì)胞培養(yǎng),病毒增殖指標(biāo)細(xì)胞病變效應(yīng)(Cytopathic effect, CPE)包涵體（Inclusion Bodies）多核巨細(xì)胞,病毒的鑒定,正常細(xì)胞,CPE,狂犬病毒包涵體（Negri body）,巨細(xì)胞病毒包涵體,三、病毒感染的快速診斷,1、形態(tài)學(xué)檢查2、檢查病毒性抗原3、檢查病毒抗體4、病毒核酸的檢測,光鏡—大病毒、包涵體

49、 電鏡—直接電鏡、免疫電鏡,免疫標(biāo)記技術(shù)—熒光素、放射性核素、酶,ELISA——IgM,核酸雜交技術(shù) Southern、Nouthern PCR,光鏡檢查法 用光學(xué)顯微鏡直接檢查某些細(xì)胞包涵體巨細(xì)胞病毒包涵體麻疹病毒感染形成多核巨細(xì)胞 狂犬病腦組織神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)中包涵體（Ｎegri 氏小體）等,形態(tài)學(xué)檢查,電鏡檢查法 用電子顯微鏡觀察病毒顆粒的形態(tài)，適于檢查含

50、高濃度病毒的標(biāo)本用于甲型肝炎病毒、輪狀病毒等的檢測近年來利用特異性免疫血清與標(biāo)本混合孵育后，用免疫電鏡法檢測，提高陽性率用于輪狀病毒、鼻病毒、甲型和戊型肝炎病毒、皰疹病毒等的檢測,形態(tài)學(xué)檢查,免疫熒光法（IFT）可快速、早期檢測難以培養(yǎng)的病毒，如流行性出血熱的漢坦病毒上呼吸道上皮細(xì)胞內(nèi)的流感病毒、腺病毒和呼吸道融合病毒（ＲＳＶ），皰疹水皰液中單純皰疹病毒抗原嬰幼兒腹瀉中的輪狀病毒抗原等,檢查病毒性抗原,免疫熒光法示意圖

51、,酶聯(lián)免疫吸附檢測法（ELISA） 可用分光光度比色計或肉眼觀察結(jié)果，無需特殊設(shè)備用于HBV、流行性出血熱、單純皰疹、輪狀病毒和EB病毒等抗原檢測,檢查病毒性抗原,SPRIA示意圖,ELISA示意圖,,,http://www.xasg120.com/fkzl/http://www.xasg120.com/fkzl/lc/http://www.xasg120.com/fkzl/wy/http://www.xasg120.c

52、om/fkzl/yd/http://www.xasg120.com/fkzl/zgjl/http://www.xasg120.com/fuke/http://www.xasg120.com/fuke/fujianyan/http://www.xasg120.com/fuke/gjy/http://www.xasg120.com/fuke/ndy/http://www.xasg120.com/fuke/pqy/http://

53、www.xasg120.com/fuke/ydy/http://www.xasg120.com/fuke/zigongneimoyan/http://www.xasg120.com/gongjing/http://www.xasg120.com/gongjing/feida/http://www.xasg120.com/gongjing/gongjingai/http://www.xasg120.com/gongjing/mi

54、lan/http://www.xasg120.com/gongjing/xirou/http://www.xasg120.com/gongjing/yanzheng/http://www.xasg120.com/jbzs/http://www.xasg120.com/jhsy/http://www.xasg120.com/jhsy/gwy/http://www.xasg120.com/jhsy/jiancha/http:/

55、/www.xasg120.com/jhsy/shanghuanquhuan/http://www.xasg120.com/jhsy/wtrl/http://www.xasg120.com/jhsy/wutongyinchan/http://www.xasg120.com/jhsy/yaoliu/http://www.xasg120.com/jryuyue/http://www.xasg120.com/weichuangfuke

56、/http://www.xasg120.com/yyhj/http://www.xasg120.com/zhengxing/cnmxf/http://www.xasg120.com/zhengxing/xyczx/http://www.xasg120.com/zhengxing/ydjss/http://www.xasg120.com/zhengxing/ydzx/,血凝抑制試驗 用于流感、副流感和流行性乙型腦炎 因這些

57、病毒可凝集動物紅細(xì)胞，加入相應(yīng)抗體后可抑制血細(xì)胞凝集現(xiàn)象補體結(jié)合試驗用于流感、流行性乙型腦炎 用含已知病毒抗原，檢查病人血清中未知抗體中和試驗 用于人群免疫水平的調(diào)查酶聯(lián)免疫吸附試驗已知抗原來測定抗體,檢查病毒抗體,原 位 雜 交 檢 測DNA病 毒 感 染 細(xì) 胞,病毒核酸的檢測,http://www.029nk.com/fkyz/http://www.029nk.com/byby/http://www.029nk

58、.com/fkzl/http://www.029nk.com/gjjb/http://www.029nk.com/jhsy/http://www.029nk.com/fkzx/http://www.029nk.com/gjjb/gjml/http://www.029nk.com/fkyz/ydy/http://www.029nk.com/fkzl/zgjl/http://www.029nk.com/byby/byjc/h

59、ttp://www.029nk.com/fkzx/cvmxf/http://www.029nk.com/jhsy/rljs/http://www.029nk.com/fkyz/bdyc/http://www.029nk.com/byby/nxby/http://www.029nk.com/fkzx/yczx/http://www.029nk.com/jhsy/wtrl/http://www.029nk.com/jhsy/ya

60、oliu/http://www.029nk.com/gjjb/gjxr/http://www.029nk.com/fkyz/fjy/http://www.029nk.com/fkzl/lcnz/http://www.029nk.com/byby/byzl/http://www.029nk.com/jhsy/gwy/http://www.029nk.com/byby/lcxby/http://www.029nk.com/fk

61、zx/ydjs/http://www.029nk.com/jhsy/jyzs/http://www.029nk.com/gjjb/gjfd/http://www.029nk.com/fkyz/pqy/http://www.029nk.com/fkzl/ydnz/http://www.029nk.com/byby/byyy/http://www.029nk.com/fkzx/yjbt/http://www.029nk.com

62、/gjjb/gjy/http://www.029nk.com/fkyz/ndy/http://www.029nk.com/fkzx/ydzx/http://www.029nk.com/byby/gjxby/http://www.029nk.com/fkzx/ydzz/http://www.029nk.com/jhsy/zyjc/,聚合酶鏈反應(yīng)（ＰＣＲ）,1985年美國Saiki等首先提出Polymerse Chain Reac

63、tion PCR是試管內(nèi)特異性DNA片段擴增法，將DNA片段擴增10萬倍，提高了試驗的特異性和敏感性逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）也可特異性的擴增RNA片段近年來成為臨床病原診斷的重要工具,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染技術(shù),Southern blot 用于酶解后DNA片段的分子雜交檢測Northern blot

64、用于酶解后RNA片段的分子雜交檢測Western blot 蛋白免疫印跡試驗，用于蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染技術(shù),常用的血清學(xué)試驗,二、病毒感染的防治原則免疫預(yù)防病毒感染的治療,人工自動免疫減毒活疫苗滅活疫苗新型活疫苗亞單位疫苗,人工被動免疫丙種球蛋白動物免疫血清高效價Ig轉(zhuǎn)移因子未接種疫苗與病人密切接觸的易感兒童，可防止發(fā)病或減少癥狀,,免疫預(yù)防,基因工程疫苗：,合成編碼保護(hù)性抗原的基因片段,,克隆表達(dá)于載

65、體,細(xì)胞、真菌細(xì)菌等,,大量增殖,基因重組疫苗,,純化,,核酸疫苗（DNA和RNA疫苗）： 由載體（質(zhì)粒DNA）和編碼病原體某種抗原的cDNA或mRNA組成,細(xì)胞免疫體液免疫,,機體細(xì)胞,,細(xì)胞表達(dá)病毒抗原,,核酸疫苗,優(yōu)點：便于制備、儲存與運輸，可誘生細(xì)胞免疫和體液免疫且維持時間長,不足：效果不很穩(wěn)定，用于人體，需較極大劑量，且需考慮安全性,,脊髓灰質(zhì)炎疫苗 減毒活疫苗（人二倍體細(xì)胞、Vero細(xì)

66、胞）麻疹疫苗 減毒活疫苗（雞胚細(xì)胞）流行性腮腺炎疫苗 減毒活疫苗（雞胚細(xì)胞）風(fēng)疹疫苗 減毒活疫苗（人二倍體細(xì)胞）甲型肝炎疫苗 減毒活疫苗（人二倍體細(xì)胞）人用狂犬病疫苗 滅活疫苗（地鼠腎細(xì)胞）乙型腦炎疫苗 滅活疫苗（地鼠腎細(xì)胞）森林腦炎疫苗

67、 滅活疫苗（地鼠腎細(xì)胞）乙型肝炎疫苗 基因工程疫苗（酵母菌表達(dá)）,,疫苗名稱 疫苗種類（培養(yǎng)細(xì)胞種類）,我國常見的病毒疫苗,,抗病毒治療,病毒,穿入,,,脫殼,,核酸復(fù)制、轉(zhuǎn)錄 及蛋白質(zhì)合成,,裝配,,吸附,釋放,,核苷類藥物：,皰疹凈,無環(huán)鳥苷、丙氧鳥苷,毒副作用大,,病毒特異性胸苷激酶磷酸化后才起作用,作為類似病毒核苷酸的底物與之競爭并抑制病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶,其他

68、生物制劑：干擾素、干擾素誘生劑、IL-1、TNF等 中草藥：黃芪、板蘭根、大青葉等,抗病毒感染免疫作用維持時間,終身免疫有明顯病毒血癥全身感染抗原性單一穩(wěn)定,短暫免疫無明顯病毒血癥局部感染抗原性多變,本章小結(jié),1、病毒的基本特征2、病毒的形態(tài)、結(jié)構(gòu)3、病毒的增殖過程4、病毒的感染與免疫5、病毒的診斷與防治,預(yù)習(xí)提綱,1、引起呼吸道感染的病毒主要有哪些？2、流感病毒的抗原結(jié)構(gòu)是怎樣的？3、引起流感大流行的原因是什